一种快速高效的甘蓝型油菜毛状根诱导及培养方法

    公开(公告)号:CN106497971A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201710025503.8

    申请日:2017-01-13

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12N15/8205 A01H4/00

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种快速高效的甘蓝型油菜毛状根诱导及培养方法。该方法使用农杆菌重悬液重悬活化后的发根农杆菌;在生长2周的无菌甘蓝型油菜幼苗的近子叶端下胚轴处制造伤口;用发根农杆菌重悬液侵染伤口处;继续无菌培养侵染后的幼苗,在伤口处产生毛状根;将带有毛状根的下胚轴切下后,培养获得无菌的毛状根;将毛状根的根尖切下在继代培养基中培养可获得大量毛状根。本发明中使用的发根农杆菌可为野生型发根农杆菌,也可以为转入带有目的基因的发根农杆菌。野生型发根农杆菌诱导产生的毛状根可以用于根生理研究或次级代谢物的生产,而带有目的基因的农杆菌诱导产生的毛状根可以用于特定基因或启动子等组件的功能研究。

    BnaALDH10A9蛋白及其编码基因在调控芸薹属作物香味中的应用

    公开(公告)号:CN119351448A

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202411573821.4

    申请日:2024-11-06

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种BnaALDH10A9蛋白及其编码基因在调控芸薹属作物香味中的应用,所述BnaALDH10A9蛋白包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的BnaA06.ALDH10A9蛋白和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的BnaC03.ALDH10A9蛋白。本发明证实了敲除油菜BnaALDH10A9基因可获得在不同组织中都可产生香味物质2AP的甘蓝型油菜新种质。本发明对油菜BnaALDH10A9的两个拷贝(BnaA06.ALDH10A9和BnaC03.ALDH10A9)基因的外显子区域设计靶点并构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,通过遗传转化获得敲除突变体。突变体(包括单突变和双突变体)的叶片、花和种子中都可检测到香味物质2‑乙酰‑1‑吡咯啉(2AP),且花和菜籽油中都散发出一股明显的清甜香味。此方法适用于创制香味油菜新种质。

    一种甘蓝型油菜BnMATE12基因及其应用

    公开(公告)号:CN118685421A

    公开(公告)日:2024-09-24

    申请号:CN202410686414.8

    申请日:2024-05-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开一种甘蓝型油菜BnMATE12基因及其应用,利用CRISPR/Cas9系统对甘蓝型油菜BnMATE12基因进行编辑,从而获得BnMATE12基因功能缺失的亚油酸和亚麻酸含量改变的甘蓝型油菜种子。BnMATE12在甘蓝型油菜中存在两个拷贝,其基因编码区序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,序列长度为1524bp,基因编辑的靶位点序列如SEQ ID NO:3所示。突变体种子的品质分析表明BnMATE12能够调控甘蓝型油菜种子亚油酸和亚麻酸的含量,对改善甘蓝型油菜种子的油脂组成和品质性状育种改良具有十分重要的意义。

    一种选育甘蓝型油菜细胞质雄性不育材料的方法

    公开(公告)号:CN102550393A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201110453812.8

    申请日:2011-12-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于现代农业和油菜育种领域,公开了一种选育甘蓝型油菜细胞质雄性不育材料的方法,是先电融合制备白芥和甘蓝型油菜体细胞杂种;再将上述得到的体细胞杂种用甘蓝型油菜进行连续回交,从回交后代中筛选得到染色体数为38条的不育株;最后将不育株与甘蓝型油菜品系进行测交,筛选获得保持系,利用该保持系连续回交,选育出甘蓝型油菜不育系。

    一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用

    公开(公告)号:CN109652419B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN201811570132.2

    申请日:2018-12-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜(Brassica napus)中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明,该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应,但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低,仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导,仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达,仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达,增强油菜对核盘菌的抵抗能力。

    一种快速高效的甘蓝型油菜毛状根诱导及培养方法

    公开(公告)号:CN106497971B

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201710025503.8

    申请日:2017-01-13

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种快速高效的甘蓝型油菜毛状根诱导及培养方法。该方法使用农杆菌重悬液重悬活化后的发根农杆菌;在生长2周的无菌甘蓝型油菜幼苗的近子叶端下胚轴处制造伤口;用发根农杆菌重悬液侵染伤口处;继续无菌培养侵染后的幼苗,在伤口处产生毛状根;将带有毛状根的下胚轴切下后,培养获得无菌的毛状根;将毛状根的根尖切下在继代培养基中培养可获得大量毛状根。本发明中使用的发根农杆菌可为野生型发根农杆菌,也可以为转入带有目的基因的发根农杆菌。野生型发根农杆菌诱导产生的毛状根可以用于根生理研究或次级代谢物的生产,而带有目的基因的农杆菌诱导产生的毛状根可以用于特定基因或启动子等组件的功能研究。

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