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公开(公告)号：CN116769769A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310931753.3
申请日：2023-07-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种直扩DNA提取液及其在提取植物DNA中的应用。所述DNA提取液，包括以下组分：0.1～1M NaOH、0.01％～0.1％十二烷基硫酸钠、10～500nM NaCl、0.01mM乙二胺四乙酸二钠、0.05～0.5g/L明胶和0.001％～0.01％消泡剂A。本发明还公开了一种简易、高效的植物基因组DNA制备方法，该方法仅需一步即可提取植物DNA，5分钟即可获得数百份DNA样本进行后续的PCR扩增反应，无有机试剂污染。所述方法包括：在96孔深孔板中加入样本、钢珠以及直扩DNA提取液；利用振动式磨样机进行震荡研磨，破碎组织；吸取上清液稀释5～10倍进行PCR扩增。
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公开(公告)号：CN119351448A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411573821.4
申请日：2024-11-06
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/82 , C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种BnaALDH10A9蛋白及其编码基因在调控芸薹属作物香味中的应用，所述BnaALDH10A9蛋白包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的BnaA06.ALDH10A9蛋白和/或氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的BnaC03.ALDH10A9蛋白。本发明证实了敲除油菜BnaALDH10A9基因可获得在不同组织中都可产生香味物质2AP的甘蓝型油菜新种质。本发明对油菜BnaALDH10A9的两个拷贝(BnaA06.ALDH10A9和BnaC03.ALDH10A9)基因的外显子区域设计靶点并构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，通过遗传转化获得敲除突变体。突变体(包括单突变和双突变体)的叶片、花和种子中都可检测到香味物质2‑乙酰‑1‑吡咯啉(2AP)，且花和菜籽油中都散发出一股明显的清甜香味。此方法适用于创制香味油菜新种质。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117925697A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202410124874.1
申请日：2024-01-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了BnaA07.MKK9基因或其SNAP分子标记在调控植物菌核病抗性中的应用。本发明首次定位并克隆一个调控油菜菌核病抗性的基因BnaA07.MKK9，过量表达该基因可以增强油菜的菌核病抗性；该基因的编码蛋白和SNAP分子标记可用于菌核病抗性遗传改良。
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公开(公告)号：CN109652419B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201811570132.2
申请日：2018-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , A01H6/20 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜（Brassica napus）中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明，该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应，但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低，仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导，仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达，仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达，增强油菜对核盘菌的抵抗能力。
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公开(公告)号：CN117925697B
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202410124874.1
申请日：2024-01-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了BnaA07.MKK9基因或其SNAP分子标记在调控植物菌核病抗性中的应用。本发明首次定位并克隆一个调控油菜菌核病抗性的基因BnaA07.MKK9，过量表达该基因可以增强油菜的菌核病抗性；该基因的编码蛋白和SNAP分子标记可用于菌核病抗性遗传改良。
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公开(公告)号：CN109652419A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811570132.2
申请日：2018-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜（Brassica napus）中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明，该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应，但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低，仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导，仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达，仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达，增强油菜对核盘菌的抵抗能力。
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公开(公告)号：CN107604001A
公开(公告)日：2018-01-19
申请号：CN201710832330.0
申请日：2017-09-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于真空渗入的甘蓝和甘蓝型油菜叶片瞬时表达的方法。该方法包括用农杆菌侵染液悬浮活化后的农杆菌；将甘蓝或甘蓝型油菜幼苗叶片切割成小块；将叶片小块置于农杆菌侵染液中，抽真空处理促进农杆菌对植物组织的渗入；将农杆菌侵染后的叶片小块暗培养的步骤。本发明结合叶片预处理和真空处理实现农杆菌渗入甘蓝或甘蓝型油菜叶片组织中从而实现农杆菌高效浸染甘蓝或甘蓝型油菜细胞，并且可以实现高效率的甘蓝和甘蓝型油菜中外源基因瞬时表达。
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