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公开(公告)号：CN118852376A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410877616.0
申请日：2024-07-02
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种水稻SSIIIa突变型蛋白、突变型基因及其应用，所述SSIIIa突变型蛋白是将野生型SSIIIa蛋白的第1697位氨基酸突变为半胱氨酸、亮氨酸或苯丙氨酸得到的。本发明还公开了利用碱基编辑技术创制抗性淀粉含量升高水稻的育种方法。本发明首次利用CRISPR/Cas9胞嘧啶碱基编辑技术，对SSIIIa基因进行定点突变，通过后代筛选，在T1可以获得不含外源基因、稻米外观透明、淀粉组分改变、抗性淀粉含量升高和能稳定遗传的水稻品种新品系。相对于传统的化学诱变育种和杂交育种等方式，基因编辑技术具有高效、精准等优点，极大提高育种效率、加快育种进程。
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公开(公告)号：CN114921479B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202210622297.X
申请日：2022-06-02
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于分子遗传学领域，公开了一种调控抗性淀粉含量的水稻SBEIIb等位基因。该基因在野生型水稻品种日本晴的SBEIIb基因第16外显子上的第56位腺嘌呤(A)被鸟嘌呤(G)替换，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，编码区序列如SEQ ID No.2所示，所述水稻SBEIIb等位基因编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。上述SBEIIb等位基因对直链淀粉含量无显著影响，但改变水稻支链淀粉的链长；可显著提高米饭的抗性淀粉含量和降低米饭葡萄糖生成速率，且对稻米品质影响较小，在高抗性淀粉水稻育种中具有很强的应用。
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公开(公告)号：CN108802080A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810932711.0
申请日：2018-08-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N23/2202
CPC classification number: G01N23/2202
Abstract: 本发明涉及一种玉米成熟种子中胚乳淀粉生长环的原位观察方法，包括以下步骤：步骤1）、在玉米成熟种子中选定需要观察淀粉生长环结构的选定区域，使用金属刀片在选定区域切开玉米种子，并用金属刀片对玉米种子块的胚乳切面进行粗修平；步骤2）、使用超薄切片机将平整切面进行精修平；步骤3）、使用水蒸汽处理光滑切面，使光滑切面充分吸水后在恒温恒湿环境中密闭干燥；步骤4）、使用离子溅射镀膜仪对干燥后的光滑切面进行真空喷金处理；步骤5）、使用扫描电子显微镜观察并拍摄光滑切面处胚乳淀粉的生长环结构。通过本发明，相比于以前研究玉米胚乳淀粉生长环结构的方法，直接使用玉米成熟种子作为材料，其操作步骤简单，明显缩短了研究时间。
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公开(公告)号：CN106706527B
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201611012536.0
申请日：2016-11-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种高直链淀粉各组分含量的分析方法，该方法包括淀粉溶液的制备、淀粉各组分的琼脂糖凝胶层析柱分离、各组分含量的测定等步骤。该测定方法简单、方便，结果重现性好，并能用少量淀粉同时定量测定淀粉中直链淀粉、中间组分和支链淀粉的含量，也能够分离和富集淀粉不同组分，为高直链淀粉分子结构的研究提供技术支持。
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公开(公告)号：CN104788578A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510179660.5
申请日：2015-04-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C08B30/04
Abstract: 本发明公开了一种莲藕淀粉5级颗粒的纯化方法，将莲藕淀粉粒按照大小分为非常大(45-55μm)、大(35-45μm)、中(25-35μm)、小(15-25μm)和非常小(0-15μm)五个部分，包括配制淀粉悬液、混匀、静置沉降、吸取上清和收集保存等步骤。该方法的优点是操作简单、快速、成本低廉、各级淀粉纯度高，从而为研究莲藕淀粉不同大小淀粉粒的结构和功能特性提供了技术支持，对莲藕淀粉粒的加工和应用具有重要的意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104450859A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410811254.1
申请日：2014-12-23
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种谷物种子胚乳细胞的形态学分析方法，包括树脂切片的制作、切片的染色、图像的采集、图像的前处理和细胞的形态学分析等步骤；图像的前处理利用Photoshop软件的钢笔工具对种子细胞的轮廓进行精确的勾勒和描边。本发明不仅可以用来分析胚乳细胞的形态学特征，还可以进一步分析胚乳细胞内容物(淀粉和蛋白)的特性。通过Photoshop和Image-Pro Plus软件在原位对胚乳细胞进行精确地处理和分析，极大地减少了误差，并可以实现大批量、全自动的分析。本发明克服了常规方法会造成细胞损失、分析结果不准确等缺点，为谷物的育种、加工和利用提供理论依据，对提高种子的品质和产量具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN104374601A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410743579.0
申请日：2014-12-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种谷物成熟种子的树脂切片制作方法，包括取材、固定、漂洗、脱水、树脂渗透、包埋、聚合、修块、半薄切片和染色等步骤，其特点是：①采用了4%多聚甲醛--2.5%戊二醛固定液二次固定技术；②使用了粘度很低、渗透能力很强的伦敦白胶（LRWhite）树脂作为包埋剂；③建立了一种成熟种子的干切技术；④建立了一种45℃--60℃二级展片法。本发明克服了常规方法制作的成熟种子切片严重卷曲、无法展片、容易破碎以及无法进行碘染色的缺点，能够获得组织、细胞结构完整、清晰，反差明显的谷物成熟种子树脂切片，从而为研究成熟种子的结构和功能提供了准确的技术支持。
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公开(公告)号：CN118853704A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410805479.X
申请日：2024-06-21
Abstract: 本发明公开了一种利用基因编辑技术替换OsSBEIIb重要氨基酸来改良水稻淀粉组分的方法。通过构建胞嘧啶碱基编辑器CBE载体靶向OsSBEIIb基因第21外显子特定序列，以粳稻中花11为转化材料，OsSBEIIb蛋白第785位甘氨酸发生四种不同形式的替换突变，包括G785E、G785Q、G785K和G785R。四种单氨基酸替换的等位突变体的籽粒外观、淀粉组分和淀粉热力学特性发生显著改变，具有不同的应用潜力。本发明提供的不含外源基因的四种纯合OsSBEIIb基因等位突变体是非常有价值的种质资源，为快速改良水稻淀粉组分和优质功能型水稻新品系的创制提供有效策略。
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公开(公告)号：CN105547793B
公开(公告)日：2018-01-30
申请号：CN201610021972.8
申请日：2016-01-13
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种玉米成熟种子粉质胚乳指甲油辅助完整切片制作方法，包括种子的粘贴固定、修块、指甲油包埋、再修块、半薄切片、切片染色和观察等步骤，其特点是：①采用强力胶水将成熟种子粘贴固定于树脂底座上；②使用无色透明指甲油作为包埋剂，快速包埋胚乳组织；③建立一种适用于玉米成熟种子粉质胚乳的快速简便干切技术，获得种子的完整切片；④切片有多种用途，可以进行碘液染色或者偏光观察淀粉粒的形态和大小以及在胚乳组织中的空间分布。本发明解决了石蜡切片和树脂切片无法制备玉米成熟种子完整切片的问题，同时克服了干切法不能制备粉质胚乳切片的缺陷，从而为研究玉米成熟种子粉质胚乳的形态结构提供技术支持。
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