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公开(公告)号：CN110196219A
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201910405117.0
申请日：2019-05-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N15/14 , C12N5/0783
Abstract: 本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法，包括如下步骤：（1）细菌培养，所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC；（2）鸡的免疫及采样；（3）靶细胞—巨噬细胞的制备；（4）效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备：包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏CD8+T细胞的步骤；（5）CTL特异性杀伤巨噬细胞。相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：本发明贴壁获得的巨噬细胞（靶细胞）纯度较高，且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显，分离时间短；以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞，可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力；将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用，可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。
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公开(公告)号：CN103789337A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201410054058.4
申请日：2014-02-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于蓝白斑筛选的自杀载体pGMB152及其应用，所述自杀载体pGMB152是将LacZYA基因克隆入自杀载体pGMB151中而形成；再使用该自杀载体以重组菌蓝白斑筛选法可构建鸡白痢沙门菌hsdM基因缺失株。本发明在原有筛选方法的基础上，通过pGMB152自杀载体上LacZYA报告基因编码的β-半乳糖甘酶与其底物X-gal反应生成蓝色物质的特性，以颜色直观地显示重组菌中pGMB152载体的存在，以予辨别所产生的突变株。该方法显著地减少了工作量，提高了筛选基因缺失株的效率；而且，结果比较直观，只要通过识别蓝白斑重组菌就可以筛选到基因缺失株，且无抗生素基因的残留。
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公开(公告)号：CN118374459A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410535980.9
申请日：2024-04-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/00 , A23L3/3571 , A23B4/22 , C12R1/92
Abstract: 本发明公开了一株广谱沙门菌噬菌体(Salmonella sp.phage)YZ26及其应用，所述噬菌体分离于扬州屠宰场猪粪便中，该噬菌体可裂解鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌、印第安纳沙门菌、山夫顿堡沙门菌等多种血清型沙门菌，以及志贺菌、大肠杆菌等非沙门菌。该噬菌体能有效抑制鼠伤寒沙门菌的增殖。同时，该噬菌体在pH2～13和30～70℃条件下能保持较好的稳定性。通过噬菌体全基因组序列分析发现，该噬菌体YZ26基因组全长47548bp，不携带任何毒力或抗生素耐药基因，可以安全地应用于食品中沙门菌的防控。
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公开(公告)号：CN112430267A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011250847.7
申请日：2020-11-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明提供了一种鸡肠炎沙门菌的检测抗体以及检测方法，所述抗体包括重链和轻链，所述轻链包括三个互补决定区。本发明采用基于针对H:g抗原单抗的竞争ELISA方法，与现有技术相比，单抗的竞争ELSIA方法拥有更好的特异性，并缩短了检测时间，简化了检测步骤。
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公开(公告)号：CN116676262A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310456466.1
申请日：2023-04-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0783 , C12Q1/6888 , G01N15/14 , C12N1/20 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，提供基于流式分选的鸡原代T细胞的体外分离及培养方法，其特征在于，包括以下步骤：从鸡外周血中分离出免疫细胞，并进行分选前样品处理；流式分选仪分选经过样品处理后的细胞；对经过流式分选仪分选后的CD3抗体阳性的T淋巴细胞进行纯度检测，并将经过流式分选仪分选后的CD3抗体阳性的T淋巴细胞与感染沙门菌后的巨噬细胞共培养，检测共培养后T细胞的IL‑6和IL‑1β产生情况。采用本发明方法可以得到更高纯度的细胞，且细胞死亡率更低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119913111A
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202510060660.7
申请日：2025-01-15
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一株沙门菌噬菌体及其应用，所述噬菌体为沙门菌噬菌体TZCZ65，保藏于中国典型培养物保藏中心，CCTCC NO：M 20242879，保藏日期为2024年12月23日，保藏地址为武汉。本发明公开的的沙门菌噬菌体TZCZ65，其稳定性好、无毒力耐药基因、安全性高，对不同来源的沙门菌均具有裂解活性，宿主范围广，潜伏期短，子代噬菌体爆发量高，可以应用在畜禽屠宰、加工和养殖环节，为畜禽及其产品提供一种安全高效的生物抗菌产品。
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公开(公告)号：CN119552993A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202510060646.7
申请日：2025-01-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/689 , C12N15/113 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡白痢沙门菌的sgRNA及其在RPA‑CRISPR/Cas12b检测中的应用，属于生物技术领域。本发明以group_3798基因为特异性靶标，设计的sgRNA在用于检测鸡白痢沙门菌时具有良好的灵敏性、特异性和重复性，不依赖大型实验设备，能将结果可视化展示，为家禽养殖业提供一种现场快速检测鸡白痢沙门菌的方法。
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公开(公告)号：CN116990263A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310895215.3
申请日：2023-07-20
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N21/552 , G01N1/28
Abstract: 本发明涉及一种利用表面等离子体共振技术检测沙门菌，包括如下步骤：(1)芯片的制备，所述的芯片为CM5芯片；(2)细菌培养，所述的细菌为肠炎沙门菌C50041；(3)细菌与抗体孵育，所述的抗体为沙门菌PagN(3B3)蛋白抗体；(4)游离抗体分离；(5)表面等离子体共振技术检测。相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：本发明可以半定量检测样品中的沙门菌；将单克隆抗体作为检测靶标，本发明具有优良特异性；将表面等离子体共振技术应用于沙门菌检测，可以缩短检测时间；对再生条件进行了优化，可以确保检测的重复性。
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公开(公告)号：CN112430267B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN202011250847.7
申请日：2020-11-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明提供了一种鸡肠炎沙门菌的检测抗体以及检测方法，所述抗体包括重链和轻链，所述轻链包括三个互补决定区。本发明采用基于针对H:g抗原单抗的竞争ELISA方法，与现有技术相比，单抗的竞争ELSIA方法拥有更好的特异性，并缩短了检测时间，简化了检测步骤。
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公开(公告)号：CN110196219B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN201910405117.0
申请日：2019-05-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N15/14 , C12N5/0783
Abstract: 本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法，包括如下步骤：（1）细菌培养，所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC；（2）鸡的免疫及采样；（3）靶细胞—巨噬细胞的制备；（4）效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备：包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏CD8+T细胞的步骤；（5）CTL特异性杀伤巨噬细胞。相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：本发明贴壁获得的巨噬细胞（靶细胞）纯度较高，且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显，分离时间短；以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞，可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力；将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用，可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。
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