公开(公告)号：CN103789337A

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：CN201410054058.4

申请日：2014-02-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 焦新安 ,  耿士忠 ,  田青 ,  潘志明 ,  陈祥 ,  孙林 ,  胡茂志

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明公开了一种用于蓝白斑筛选的自杀载体pGMB152及其应用，所述自杀载体pGMB152是将LacZYA基因克隆入自杀载体pGMB151中而形成；再使用该自杀载体以重组菌蓝白斑筛选法可构建鸡白痢沙门菌hsdM基因缺失株。本发明在原有筛选方法的基础上，通过pGMB152自杀载体上LacZYA报告基因编码的β-半乳糖甘酶与其底物X-gal反应生成蓝色物质的特性，以颜色直观地显示重组菌中pGMB152载体的存在，以予辨别所产生的突变株。该方法显著地减少了工作量，提高了筛选基因缺失株的效率；而且，结果比较直观，只要通过识别蓝白斑重组菌就可以筛选到基因缺失株，且无抗生素基因的残留。