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公开(公告)号:CN116676395A
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202310380409.X
申请日:2023-04-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种三叶斑潜蝇(Liriomyza trifolii)的特异性引物对,其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种基于环境DNA检测植物叶片中三叶斑潜蝇(Liriomyza trifolii)为害的方法,包括以下步骤:将含有昆虫潜道的植物叶片进行DNA提取、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测,当检测结果为有电泳条带且条带位置为750bp时,表明有三叶斑潜蝇为害;否则为没有三叶斑潜蝇为害。本发明涉及的三叶斑潜蝇环境DNA检测方法能够在潜道中检测到三叶斑潜蝇为害的发生,确定了检测到时间阈值和检测方法,这将在斑潜蝇鉴定及田间预警监测应用中具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN115399294A
公开(公告)日:2022-11-29
申请号:CN202210873699.7
申请日:2022-07-21
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种三叶斑潜蝇成虫CTmax的动态测定方法,包括以下步骤:(1)使用CO2处理三叶斑潜蝇成虫,将其分装到多孔板内;(2)保持程序升降恒温箱温度稳定;(3)待三叶斑潜蝇成虫恢复正常活动后,将24孔板放置到程序升降恒温箱,设置温度上升斜率和最高温度;(4)启动电脑录像,待三叶斑潜蝇成虫全部无法运动,停止程序升降恒温箱工作和电脑录像,拿出多孔板;(5)确认三叶斑潜蝇成虫CTmax值。本方法采用设备均为实验室常用仪器,操作简单;能够更加准确的测定出在动态温度下三叶斑潜蝇成虫的高温耐受能力,对于三叶斑潜蝇成虫的近缘物种也具有一定的参考价值。
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公开(公告)号:CN105950618A
公开(公告)日:2016-09-21
申请号:CN201610539895.5
申请日:2016-07-08
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/11 , C12Q1/686 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了一种用于扩增覆盖斑潜蝇属昆虫线粒体全基因组的长片段的通用引物组,该引物组由两对引物组成,其序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.4所示。采用本发明的扩增引物,可以有效地扩增出多种斑潜蝇属物种线粒体基因组的长片段,有助于缩短获取分子数据的周期,为斑潜蝇属昆虫的系统发育研究及分子鉴定特异性引物位点选择提供了重要工具。
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公开(公告)号:CN116716413A
公开(公告)日:2023-09-08
申请号:CN202310696169.4
申请日:2023-06-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种特异性引物组合及其试剂盒和在检测福寿螺中的应用,特异性引物组合的DNA序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明还公开了所述特异性引物在制备检测福寿螺的试剂或试剂盒、区分小管福寿螺和斑点福寿螺中的应用以及一种区分小管福寿螺和斑点福寿螺的方法。本发明从分子水平,依据两种福寿螺线粒体COI基因设计出3条引物,利用这3条引物,再利用多重PCR技术进行扩增,结果显示这3条引物的扩增结果能够有效快速地区分出两种福寿螺。同时该引物对于不同的福寿螺以及同种福寿螺的重复均体现出较好的稳定性,保证了鉴定结果的准确性,说明该套引物具有较高的灵敏度。
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公开(公告)号:CN113234133B
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN202110421728.1
申请日:2021-04-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种三叶斑潜蝇热休克转录因子蛋白原核表达的方法,包括蛋白表达载体构建和原核表达载体的诱导表达两个部分,具体为:设计带有特定酶切位点(BamHI和XhoI)的特异性引物并进行目的片段的扩增。将PCR产物回收、克隆并在测序正确之后进行提取质粒。原核表达载体的构建酶切。表达菌的制备。诱导表达最佳条件摸索。目的蛋白表达形式及Western blot鉴定。本实验不仅摸索出了提高三叶斑潜蝇热休克转录因子蛋白原核表达水平的最佳IPTG浓度,提高了实验效率和效果,而且对我们系统全面研究整个Hsp家族基因转录调控机制,及其在斑潜蝇温度耐受性和入侵传播中的功能具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN116376953B
公开(公告)日:2024-07-12
申请号:CN202310386956.9
申请日:2023-04-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/435 , C12Q1/06 , C12Q1/10 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于三叶斑潜蝇LtHsp20.8的重组质粒。本发明还公开了一种重组三叶斑潜蝇热激蛋白及其在应对外界热胁迫功能方面的应用。本发明还公开了一种基于大肠杆菌的生长活性检测三叶斑潜蝇热激蛋白应对外界热胁迫功能的方法。本发明方法通过对表达重组LtHsp20.8蛋白的大肠杆菌进行热胁迫处理,并对其生长OD600值和单菌落数目进行观察,以此反应热胁迫下重组Hsps蛋白的大肠杆菌的生长是否具有抑制或其他作用,间接证明了重组热激蛋白能否增加大肠杆菌对高温的耐受性,从分子层面为研究温度胁迫下三叶斑潜蝇热激蛋白的保护机制具有十分重要的意义。
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公开(公告)号:CN116376953A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310386956.9
申请日:2023-04-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/435 , C12Q1/06 , C12Q1/10 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于三叶斑潜蝇LtHsp20.8的重组质粒。本发明还公开了一种重组三叶斑潜蝇热激蛋白及其在应对外界热胁迫功能方面的应用。本发明还公开了一种基于大肠杆菌的生长活性检测三叶斑潜蝇热激蛋白应对外界热胁迫功能的方法。本发明方法通过对表达重组LtHsp20.8蛋白的大肠杆菌进行热胁迫处理,并对其生长OD600值和单菌落数目进行观察,以此反应热胁迫下重组Hsps蛋白的大肠杆菌的生长是否具有抑制或其他作用,间接证明了重组热激蛋白能否增加大肠杆菌对高温的耐受性,从分子层面为研究温度胁迫下三叶斑潜蝇热激蛋白的保护机制具有十分重要的意义。
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公开(公告)号:CN115992182A
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202210840145.7
申请日:2022-07-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/87 , C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种三叶斑潜蝇预蛹期浸泡dsRNA抑制靶标基因表达的方法,包括dsRNA的浸泡递送和靶标基因的抑制效率检测两个部分,具体为:通过靶标基因的筛选验证,dsRNA的合成,不同浓度下dsRNA的预蛹浸泡以及靶基因抑制效率检测。本发明不仅摸索出了三叶斑潜蝇中预蛹浸泡dsRNA的最佳浓度,而且系统和全面建立了三叶斑潜蝇预蛹浸泡dsRNA的RNA干扰(RNAi)体系,这将在斑潜蝇基因功能研究及基于RNAi的斑潜蝇防控技术研究具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN111642468B
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202010610273.3
申请日:2020-06-30
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/033 , A01M1/02
Abstract: 本发明公开了一种三叶斑潜蝇卵的收集装置,包括两端开口的收集管,所述所述收集管侧面以黑布包裹,一开口端设有营养液且不密封,另一开口端设有三叶斑潜蝇产卵刺激物。还公开了利用上述收集装置收集蝇卵的方法,具体为:(1)在收集管一端通过石蜡薄膜设置葡萄糖溶液,(2)投放成虫,(3)在收集管另一端通过纱布设置蜂蜜水,(4)用一层黑布裹住收集管侧面,使得玻璃管仅两端口透光。本发明不仅可以定点收集三叶斑潜蝇卵,而且显著提高了卵的收集效率,为田间防治三叶斑潜蝇提供了新思路,采用自制玻璃管装置,结构简单,操作便捷,便于高效迅速的人工收集卵,提高防治效率。
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公开(公告)号:CN111642468A
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN202010610273.3
申请日:2020-06-30
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/033 , A01M1/02
Abstract: 本发明公开了一种三叶斑潜蝇卵的收集装置,包括两端开口的收集管,所述所述收集管侧面以黑布包裹,一开口端设有营养液且不密封,另一开口端设有三叶斑潜蝇产卵刺激物。还公开了利用上述收集装置收集蝇卵的方法,具体为:(1)在收集管一端通过石蜡薄膜设置葡萄糖溶液,(2)投放成虫,(3)在收集管另一端通过纱布设置蜂蜜水,(4)用一层黑布裹住收集管侧面,使得玻璃管仅两端口透光。本发明不仅可以定点收集三叶斑潜蝇卵,而且显著提高了卵的收集效率,为田间防治三叶斑潜蝇提供了新思路,采用自制玻璃管装置,结构简单,操作便捷,便于高效迅速的人工收集卵,提高防治效率。
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