公开(公告)号：CN109810976A

公开(公告)日：2019-05-28

申请号：CN201910110764.9

申请日：2019-02-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈振海 ,  王敏敏 ,  孙怀昌 ,  张鑫宇 ,  周晓慧 ,  牟春晓

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/41 ,  C12N15/86 ,  C12Q1/70 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明涉及猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用，包括如下步骤：（1）SVV/GD05株基因组全序列的扩增；（2）pSVV-GD05病毒感染性克隆质粒的构建；（3）pSVV-GD05-iLOV重组质粒的构建；（4）亲本病毒（SVV-GD05）与重组病毒（SVV-GD05-iLOV）拯救。本发明利用一株分离自中国猪群的SVV毒株，构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pSVV-GD05，并能成功拯救出病毒。同时，将报告基因iLOV插入SVV感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该报告基因的重组SVV病毒。本发明为深入开展SVV的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。

公开(公告)号：CN109810976B

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910110764.9

申请日：2019-02-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈振海 ,  王敏敏 ,  孙怀昌 ,  张鑫宇 ,  周晓慧 ,  牟春晓

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/41 ,  C12N15/86 ,  C12Q1/70 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明涉及猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用，包括如下步骤：（1）SVV/GD05株基因组全序列的扩增；（2）pSVV‑GD05病毒感染性克隆质粒的构建；（3）pSVV‑GD05‑iLOV重组质粒的构建；（4）亲本病毒（SVV‑GD05）与重组病毒（SVV‑GD05‑iLOV）拯救。本发明利用一株分离自中国猪群的SVV毒株，构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pSVV‑GD05，并能成功拯救出病毒。同时，将报告基因iLOV插入SVV感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该报告基因的重组SVV病毒。本发明为深入开展SVV的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。

公开(公告)号：CN105886489A

公开(公告)日：2016-08-24

申请号：CN201610300134.4

申请日：2016-05-09

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙怀昌 ,  李光亚 ,  卢会鹏 ,  肖真真 ,  李洋洋 ,  周晓慧 ,  谭笑 ,  张鑫宇 ,  夏晓莉

IPC: C12N9/50 ,  C12N15/70 ,  C12N15/57 ,  C12P21/06

CPC classification number: C12N9/506 ,  C07K14/57 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101 ,  C12N2800/22 ,  C12P21/06

Abstract: 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVP)活性包涵体及其制备方法和在重组蛋白制备中的应用。所述TEVP活性包涵体由两个PT连接头分隔的ELK16自聚肽和烟草蚀纹病毒蛋白酶组成。其制备方法包括表达载体构建、活性包涵体表达与纯化、重组蛋白切割和目的蛋白回收。与现有的TEVP相比，本发明的TEVP活性包涵体具有制备简单、容易从终产物中去除和价格低廉等优点，可以用于各种重组蛋白的制备。