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公开(公告)号:CN113981149A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111395888.X
申请日:2021-11-23
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种猪δ冠状病毒检测引物组和探针、试剂盒及应用,属于生物技术领域。所述检测引物组和探针,包含核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1‑5所示的FIP、BIP、F3、B3和LoopF组成的引物组以及如SEQ ID NO:6所示的探针probe。本发明在该探针相应位点设计可与靶基因相结合的RNA碱基,当两者特异互补结合时,激活RNase H2酶发生切割,报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,产生荧光信号;当不发生特异结合时不产生荧光信号;在此反应机理上,所设计的引物组和探针可以实现高特异性、高敏感性的快速定量的检测猪δ冠状病毒。
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公开(公告)号:CN117448284B
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202311447148.5
申请日:2023-11-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种稳定传代的表达EGFP的重组坦布苏病毒,该病毒由携带有外源基因EGFP的片段P6和片段P7、片段P8进行无缝克隆连接,获得重组质粒pTMUV‑muC‑EGFP;再将EGFP转染BHK21细胞,拯救得到;所述片段P6中EGFP基因的3’端连接有2A肽,且2A肽序列后的坦布苏病毒C蛋白前25个氨基酸对应的核苷酸序列进行同义密码子突变;本申请通过对2A肽序列后的坦布苏病毒C蛋白前25个氨基酸对应的核苷酸序列进行同义密码子突变,提高了该重组病毒的传代稳定性,使其在传代5代后仍能保持外源基因不丢失,此外本申请还公开了一种稳定传代的表达EGFP的重组坦布苏病毒的构建方法。
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公开(公告)号:CN111676316B
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN202010489411.7
申请日:2020-06-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒基因II型与其它基因型的荧光检测方法、引物及探针。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线Tm值差异鉴定非洲猪瘟病毒基因II型与其它基因型;操作简单、检测速度快且高通量,本发明的检测方法准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN117448284A
公开(公告)日:2024-01-26
申请号:CN202311447148.5
申请日:2023-11-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种稳定传代的表达EGFP的重组坦布苏病毒,该病毒由携带有外源基因EGFP的片段P6和片段P7、片段P8进行无缝克隆连接,获得重组质粒pTMUV‑muC‑EGFP;再将EGFP转染BHK21细胞,拯救得到;所述片段P6中EGFP基因的3’端连接有2A肽,且2A肽序列后的坦布苏病毒C蛋白前25个氨基酸对应的核苷酸序列进行同义密码子突变;本申请通过对2A肽序列后的坦布苏病毒C蛋白前25个氨基酸对应的核苷酸序列进行同义密码子突变,提高了该重组病毒的传代稳定性,使其在传代5代后仍能保持外源基因不丢失,此外本申请还公开了一种稳定传代的表达EGFP的重组坦布苏病毒的构建方法。
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公开(公告)号:CN111676316A
公开(公告)日:2020-09-18
申请号:CN202010489411.7
申请日:2020-06-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒基因II型与其它基因型的荧光检测方法、引物及探针。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线Tm值差异鉴定非洲猪瘟病毒基因II型与其它基因型;操作简单、检测速度快且高通量,本发明的检测方法准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN118006687A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202311670565.6
申请日:2023-12-07
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒重组病毒的制备方法和应用,涉及生物技术领域,其技术方案要点是:以毒株G2型猪流行性腹泻病毒株PEDV HDDJ作为亲本病毒,G2型猪流行性腹泻病毒株PEDV HDDJ的核衣壳蛋白基因进行部分核苷酸缺失,获得一株安全性高的减毒猪流行性腹泻病毒候选疫苗株rHDDJ‑△N;所述的减毒猪流行性腹泻重组病毒株毒力显著致弱,高剂量不产生发病和致死现象,且保留了猪流行性腹泻病毒主要抗原表位,用此减毒猪流行性腹泻毒株免疫后,猪对亲本毒株PEDV HDDJ具有较好的保护作用,作为预防猪流行性腹泻的疫苗候选株,具有极大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN117487968B
公开(公告)日:2024-03-22
申请号:CN202410004715.8
申请日:2024-01-03
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种检测番鸭查帕马病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测引物和探针,所述引物包括上游引物和下游引物;所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No:2所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No:3所示;所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示。基于该引物和探针的检测方法快速、简单、特异性强、灵敏度高。同时,本发明还提供了该毒株培养方法,我们发现该病毒可以在鸭胚肾原代细胞中增殖,且不产生明显的细胞病变,基于该培养方法可为后续的毒株的增殖和疫苗制备提供基础。
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公开(公告)号:CN116970574B
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202310759605.8
申请日:2023-06-26
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明涉及疫苗生产技术领域,公开了一种波形蛋白的用途,通过实验验证,使用波形蛋白能够促进鹅星状病毒的增殖,这大大提高了鹅星状病毒疫苗制备时的便利性,同时,本申请还公开了一种促进增殖鹅星状病毒的方法,包括将鹅星状病毒感染能够表达鹅源波形蛋白的细胞系,此外,本申请还公开了使用上述的增殖鹅星状病毒的方法制得的疫苗及使用上述的增殖鹅星状病毒的方法培养得到的病毒用于制备疫苗的用途。
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公开(公告)号:CN115161294B
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202210653186.5
申请日:2022-06-09
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 浙江迪福润丝生物科技有限公司 , 华南农业大学 , 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种新城疫疫苗株,分类名为新城疫病毒(Newcastle disease virus),保藏编号为:CCTCC No:V202235;保藏日期:2022年5月7日,保藏单位:武汉大学中国典型培养物保藏中心。该疫苗株突变缺失了HN蛋白的关键中和位点,通过病毒拯救获得了重组病毒rLa‑mGM。将重组病毒和LaSota疫苗免疫SPF鸡后,通过测定HI抗体能够确定是否免疫成功,通过间接ELISA方法能够实现野毒和疫苗毒的鉴别。同时,本发明还提供了该疫苗株的构建方法、禽类免疫识别方法、应用。
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公开(公告)号:CN110241259B
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN201910540545.4
申请日:2019-06-21
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分鹅1型星状病毒和鹅2型星状病毒的HRM检测方法及其引物,本发明操作简单,只需要一对通用引物,在PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,缩短了分型所需时间;不需要特异性荧光标记探针;特异性强、准确性高,可以快速、准确、高通量地对样品进行分析,有利于在临床实践中推广应用,具有较高的应用价值。
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