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公开(公告)号:CN118703474A
公开(公告)日:2024-09-27
申请号:CN202410663744.5
申请日:2024-05-27
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于菌株发酵技术领域,公开了一种产生淀粉糖化酶假单胞菌发酵方法。包括发酵时间44.5h、发酵温度22℃、发酵起始pH 6.0、接种量1vt%、装液量110ml/250mL,转速191r/min。可有效提高酶活,为将实验室研究结果转化为大规模工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号:CN118421532A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410663779.9
申请日:2024-05-27
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一株产低温肌氨酸氧化酶的蜡样芽孢杆菌的发酵培养基。培养基成分为:肌酸、蛋白胨、硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、海水。按培养基配方比例称取肌酸、蛋白胨、硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾,加入渤海湾海水搅拌溶解,调节pH至7.0后进行高压蒸汽灭菌。本发明的发酵培养基培养的蜡样芽孢杆菌产肌氨酸氧化酶酶活达到1.54U/mL。
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公开(公告)号:CN118406564A
公开(公告)日:2024-07-30
申请号:CN202410663753.4
申请日:2024-05-27
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于微生物工程领域,公开了一种低温生淀粉糖化酶产生菌筛选方法。仅通过无碘液添加透明圈初筛结合酶活及扫描电镜复筛即可成功筛选生淀粉糖化酶产生菌株。不仅可以有效避免碘液对菌株的不利影响,防止一些潜在有价值的菌株因碘液反应而被错误地判定为阴性。还能更准确地识别和筛选出具有生淀粉糖化酶产生能力的菌株,从而提高筛选的效率和准确性。这种方法在微生物筛选和酶工程领域具有一定的应用价值和发展潜力。
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公开(公告)号:CN116103321A
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202310130187.6
申请日:2023-02-17
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域,公开了一种(+)γ‑内酰胺酶基因的克隆与表达方法及其应用。采用菌株发掘出产(+)γ‑内酰胺酶的基因,将其进行目的基因扩增,构建工程菌,用来生产(+)γ‑内酰胺酶,从而进行工业化生产(‑)γ‑内酰胺。
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公开(公告)号:CN115976000A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202310130199.9
申请日:2023-02-17
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种产(+)γ‑内酰胺酶菌株发酵条件优化方法。所述产(+)γ‑内酰胺酶菌株的发酵条件的优化方法为培养基初始为:温度25.0℃、pH7.6、葡萄糖质量浓度4.0g/L,首先使用Plackett‑Burman法筛选出初始葡萄糖质量浓度、p H值、温度三个影响大的因素,然后进行最陡爬坡实验逐步改变初始pH值、培养温度、葡萄糖质量的浓度,逼近最佳响应面区域,最后使用Box‑Benhnken,利用Design‑Expert.V8.6.0.1软件进行回归分析,获得各因素的最优培养条件等。本发明得到的(+)γ‑内酰胺酶预测最大酶活为116.9U/L,进行验证试验得到(+)γ‑内酰胺酶酶活平均值为114.5U/L,相对偏差为2.1%。因此采用响应面法对(+)γ‑内酰胺酶菌株培养条件进行优化准确可靠。
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公开(公告)号:CN118421531A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410663749.8
申请日:2024-05-27
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于微生物工程领域,公开了一种假单胞菌高效发酵培养基及其发酵方法与应用。包括可溶性淀粉、氮源、七水硫酸镁、磷酸氢二钾、氯化钠、氯化钾。上述假单胞菌高效发酵培养基培养假单胞菌Pseudomonasjaponica Y‑4上的应用,将Pseudomonasjaponica Y‑4菌体活化的种子液接种于发酵培养基中,在25℃,150r/min的条件下振荡培养48h。Pseudomonasjaponica Y‑4的接种量为1vt%,装液量为100mL/250mL。可有效提高酶活,为将实验室研究结果转化为大规模工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号:CN116004741A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202310130194.6
申请日:2023-02-17
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种(+)γ‑内酰胺酶转化拆分制备(‑)γ‑内酰胺的方法。方法包括以下步骤:步骤1,微生物发酵产(+)γ‑内酰胺酶;步骤2,获得粗酶液样品制备;步骤3,酶液浓缩;步骤4,生产(‑)γ‑内酰胺。本发明首次提出一种(+)γ‑内酰胺酶转化生产(‑)γ‑内酰胺的方法,该方法生产产品低廉、生产周期短;浓缩酶液所用材料可循环利用,环境友好,且操作过程简单、酶活回收率高;实现了以低价值的(±)γ‑内酰胺为原料高效生产具有高医疗价值的(‑)γ‑内酰胺,为合成(‑)γ‑内酰胺类药物奠定坚实临床基础,具有广阔的应用前景与经济效益。
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公开(公告)号:CN118460425A
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202410680205.2
申请日:2024-05-29
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于微生物筛选及发酵领域,公开了一株产(‑)γ‑内酰胺酶的氧化微杆菌的筛选方法。本发明以(±)γ‑内酰胺为唯一碳源,才用平板筛选法初筛、高效液相色谱技术进行复筛,从深海海泥样品中成功筛选到一株产(‑)γ‑内酰胺的菌株,鉴定为氧化微杆菌(Microbacterium hydrocarbonoxydans)。该发明为海洋资源开发利用提供了参考,为产(‑)γ‑内酰胺酶菌株提供了新途径。
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公开(公告)号:CN118421613A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410663785.4
申请日:2024-05-27
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种提升菌株产低温肌氨酸氧化酶酶活的复合诱变方法。对蜡样芽孢杆菌Q5进行亚硝酸钠‑紫外复合诱变,诱变条件为紫外诱变120s和亚硝酸钠诱变25min。得到正突变效果最佳的突变株,其产肌氨酸氧化酶酶活达到2.98U/mL。
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公开(公告)号:CN115960975A
公开(公告)日:2023-04-14
申请号:CN202310130190.8
申请日:2023-02-17
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种分离提纯(‑)γ‑内酰胺的方法。通过调控反应体系中的理化因素,利用筛选得到的产(+)γ‑内酰胺酶菌株高立体选择性降解(±)γ‑内酰胺中的(+)γ‑内酰胺,得到(‑)γ‑内酰胺,进而对(‑)γ‑内酰胺进行分离提纯,以期来满足工业生产的需要。
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