公开(公告)号：CN114958855B

公开(公告)日：2024-03-29

申请号：CN202210715326.7

申请日：2022-06-23

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  李鹏 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种促内皮细胞凋亡的siRNA及SIRT6低表达细胞系。本发明利用RNA干扰(RNAi)技术获得了SIRT6敲低的siRNA和shRNA，siRNA的序列SEQ ID NO:1‑2所示，shRNA的序列如SEQ ID NO:5‑6所示，SIRT6敲低后能够显著促进氧化应激诱导的内皮细胞凋亡。此外，本发明构建了SIRT6低表达的微血管内皮细胞模型，可用于研究SIRT6在内皮间凋亡发生发展中的作用，这有助于揭示内皮凋亡发生发展的机制，为治疗由内皮凋亡所致的心血管疾病提供有用的线索。本发明具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114958855A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210715326.7

申请日：2022-06-23

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  李鹏 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种促内皮细胞凋亡的siRNA及SIRT6低表达细胞系。本发明利用RNA干扰(RNAi)技术获得了SIRT6敲低的siRNA和shRNA，siRNA的序列SEQ ID NO:1‑2所示，shRNA的序列如SEQ ID NO:5‑6所示，SIRT6敲低后能够显著促进氧化应激诱导的内皮细胞凋亡。此外，本发明构建了SIRT6低表达的微血管内皮细胞模型，可用于研究SIRT6在内皮间凋亡发生发展中的作用，这有助于揭示内皮凋亡发生发展的机制，为治疗由内皮凋亡所致的心血管疾病提供有用的线索。本发明具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN115851686A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202210906268.6

申请日：2022-07-29

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  李鹏 ,  吴娜 ,  葛均波

IPC: C12N9/80 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C07K1/107 ,  C12P21/06 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明提供了一种SIRT6H133Y蛋白及其富集豆蔻酰化修饰肽段的方法和应用，蛋白制备方法包括：以SIRT6‑FLAG为模板得到SIRT6‑FLAG片段，以pET28a质粒为模板得到质粒片段，两片段拼接得到表达质粒pET28TEV‑SIRT6，以其为模板进行PCR定点突变技术，得到过表达质粒pET28TEV‑SIRT6H133Y，转入大肠杆菌内纯化蛋白；本发明基于SIRT6H133Y蛋白对豆蔻酰基的结合力，并通过SIRT6H133Y蛋白上的His‑tag和Flag‑tag标签对豆蔻酰化修饰肽段进行免疫共沉淀，富集得到豆蔻酰化修饰肽段，质谱检测分析得到豆蔻酰化修饰靶蛋白和修饰位点。