公开(公告)号：CN119868575A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510188462.9

申请日：2025-02-20

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  方哲彦 ,  葛均波

IPC: A61K47/64 ,  A61K47/69 ,  A61K31/7088 ,  A61P9/00

Abstract: 本发明公开了一种靶向成纤维细胞递送miR‑92a‑1‑5p的纳米颗粒及其制备方法和应用。本发明采用了具有ROS反应性的聚甲基丙烯酸乙二醇酯‑聚赖氨酸纳米材料，通过交联反应、透析纯化、超声处理和离心制备PML纳米粒子，PMLP纳米粒子通过共价偶联的形式连接胶原纤维聚集肽段CREKA，形成以PML为核心，CREKA为表面修饰的成纤维靶向纳米粒子，miR‑92a‑1‑5核酸小分子药物包埋于PMLP纳米粒子的核心疏水空腔中；所制备的纳米颗粒可以实现纤维化疾病中对于成纤维细胞的靶向递送，并释放包裹在其中的miR‑92a‑1‑5p核酸小分子，最终达到特异性抗纤维化的治疗效果，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114958855B

公开(公告)日：2024-03-29

申请号：CN202210715326.7

申请日：2022-06-23

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  李鹏 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种促内皮细胞凋亡的siRNA及SIRT6低表达细胞系。本发明利用RNA干扰(RNAi)技术获得了SIRT6敲低的siRNA和shRNA，siRNA的序列SEQ ID NO:1‑2所示，shRNA的序列如SEQ ID NO:5‑6所示，SIRT6敲低后能够显著促进氧化应激诱导的内皮细胞凋亡。此外，本发明构建了SIRT6低表达的微血管内皮细胞模型，可用于研究SIRT6在内皮间凋亡发生发展中的作用，这有助于揭示内皮凋亡发生发展的机制，为治疗由内皮凋亡所致的心血管疾病提供有用的线索。本发明具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114807238B

公开(公告)日：2023-09-26

申请号：CN202210536111.9

申请日：2022-05-17

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12N15/54

Abstract: 本发明公开了一种过表达SIRT6重组慢病毒质粒载体及其细胞模型的构建方法，重组慢病毒质粒载体中SIRT6DNA双链片段的基因SIRT6蛋白质编码区苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；本发明利用重组慢病毒载体，实现了SIRT6稳定持续性高表达，显著促进内皮细胞的自噬并抑制凋亡，维持了内皮细胞的功能，这为临床上干预内皮细胞功能从而改善心血管疾病带来了新的希望；有助于后续进行更深一步的研究SIRT6与内皮凋亡和自噬之间潜在的分子机制，为治疗由内皮功能障碍所致的心血管疾病提供有用的线索；具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN116286827A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310450083.3

申请日：2023-04-24

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  A61K31/7088 ,  A61P9/00 ,  A61P9/10

Abstract: 本发明涉及一种抑制内质网应激的siRNA及其细胞系，属于生物医药技术领域。本发明提供了一种抑制Ero1α表达的RNA，包括序列为SEQ ID NO：1所示的寡聚核酸单链siRNA分子，寡聚核酸siRNA1的3’端为2个dT修饰；或以寡聚核酸siRNA为靶点合成的shRNA，shRNA包括序列为SEQ ID NO：5所对应的单链RNA分子和SEQ ID NO：6所对应的单链RNA。本发明提供了包含上述RNA序列的重组慢病毒表达载体，构建了Ero1α低表达的微血管内皮细胞系；本发明通过揭示血管内皮细胞ERS和凋亡发生发展的机制，为治疗心脏缺血再灌注损伤提供了新的路径，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114958855A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210715326.7

申请日：2022-06-23

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  李鹏 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种促内皮细胞凋亡的siRNA及SIRT6低表达细胞系。本发明利用RNA干扰(RNAi)技术获得了SIRT6敲低的siRNA和shRNA，siRNA的序列SEQ ID NO:1‑2所示，shRNA的序列如SEQ ID NO:5‑6所示，SIRT6敲低后能够显著促进氧化应激诱导的内皮细胞凋亡。此外，本发明构建了SIRT6低表达的微血管内皮细胞模型，可用于研究SIRT6在内皮间凋亡发生发展中的作用，这有助于揭示内皮凋亡发生发展的机制，为治疗由内皮凋亡所致的心血管疾病提供有用的线索。本发明具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114807238A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210536111.9

申请日：2022-05-17

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  郭振杨 ,  葛均波

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10 ,  C12N15/54

Abstract: 本发明公开了一种过表达SIRT6重组慢病毒质粒载体及其细胞模型的构建方法，重组慢病毒质粒载体中SIRT6DNA双链片段的基因SIRT6蛋白质编码区苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；本发明利用重组慢病毒载体，实现了SIRT6稳定持续性高表达，显著促进内皮细胞的自噬并抑制凋亡，维持了内皮细胞的功能，这为临床上干预内皮细胞功能从而改善心血管疾病带来了新的希望；有助于后续进行更深一步的研究SIRT6与内皮凋亡和自噬之间潜在的分子机制，为治疗由内皮功能障碍所致的心血管疾病提供有用的线索；具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114807141A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210520746.X

申请日：2022-05-13

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  方哲彦 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  A61K31/713 ,  A61P9/00 ,  A61P9/10

Abstract: 本发明公开了一种用于抑制XPB表达物质及其XPB低表达的内皮细胞系，包括小干扰RNA与shRNA其中的任意一种，所述小干扰RNA为siRNA1、siRNA2与siRNA3其中的任意一种，本发明XPB siRNA2与XPB shRNA2能抑制人微血管内皮细胞中XPB的表达；XPB shRNA2能抑制HMEC‑1在缺氧条件下的内皮间质转分化，抑制细胞的迁移能力；RNAi技术抑制微血管内皮细胞中XPB基因的表达，构建XPB低表达的微血管内皮细胞模型，研究XPB在内皮间质化发生发展中的重要作用，有助于揭示内皮间质化的潜在机制，为治疗由内皮间质化所致的心血管疾病提供有用的线索。本发明具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN119932111A

公开(公告)日：2025-05-06

申请号：CN202510129488.6

申请日：2025-02-05

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  冯润阳 ,  葛均波

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A61K38/17 ,  A61K48/00 ,  A61P9/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于医学分子生物学和基因工程技术领域，具体公开了一种微血管内皮细胞ATF2位点突变质粒载体及ATF2K296R高表达细胞模型和应用。本发明应用点突变质粒技术提高微血管内皮细胞中ATF2K296R蛋白的表达，构建ATF2K296R高表达的微血管内皮细胞模型，研究ATF2豆蔻酰化修饰在内皮屏障发生发展中的作用，并证明了ATF2的豆蔻酰化修饰对于内皮细胞屏障有负面影响，而经过ATF2K296点突变并过表达后能够明显降低ATF2的豆蔻酰化修饰水平，达到保护内皮细胞屏障功能的目的，为临床上靶向治疗内皮屏障功能失衡及治疗心血管疾病带来希望。

公开(公告)号：CN115572723A

公开(公告)日：2023-01-06

申请号：CN202210435390.X

申请日：2022-04-24

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  方哲彦 ,  葛均波

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种减缓内皮间质化的siRNA及GTF2H4低表达的细胞系。本发明提供了利用RNAi敲低GTF2H4表达的3种siRNA，其序列如SEQ ID NO：1‑6所示，本发明还提供了序列如SEQ ID NO：13‑14所示的shRNA，并基于该序列构建了GTF2H4低表达的微血管内皮细胞系；该细胞系能够显著抑制缺氧诱导的内皮间质化，抑制细胞的迁移能力，促进细胞的成管能力，这为临床上干预内皮间质化从而改善心血管疾病带来了新的希望，同时有助于后续进行更深一步的研究以探索GTF2H4与内皮间质化之间潜在的分子机制，为治疗由内皮间质化所致的心血管疾病提供有用的线索，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN120060301A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510215393.6

申请日：2025-02-26

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 李华 ,  方哲彦 ,  葛均波

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  C12N15/64 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种促进血管新生的XPB高表达载体及内皮细胞系。本发明提供了一种携带有HA标签的XPB DNA双链片段，其序列如SEQ ID NO：4所示，本发明还提供了包含如SEQ ID NO：4所示的目的基因序列的表达载体和XPB高表达微血管内皮细胞系，该细胞系能促进HMEC‑1在缺氧条件下的增殖能力，促进细胞的迁移能力，促进细胞的成管能力，此外，本发明利用融合标签技术将HA标签融合入XPB过表达重组载体中，这将有助于探XPB在血管新生中与其他关键分子的潜在互作机制；本发明具有重要的应用价值。