公开(公告)号：CN112779217A

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN202110332346.1

申请日：2021-03-29

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 顾建英 ,  周宇红 ,  卢莉莉 ,  孙磊 ,  吴伟忠 ,  卫传元 ,  高子煦 ,  肖淑秀 ,  宋正清 ,  白金金

IPC: C12N5/0783 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞的培养方法，包括：无菌切取肿瘤组织置于培养液中，在无菌冷链条件下将瘤体机械剪碎、消化，获取单细胞悬液，分离提取肿瘤浸润T淋巴细胞，加入到含有分离诱导培养液的培养基中进行体外扩增和诱导分化，培养7–21天得到高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞，分离诱导培养液为含有IL‑2、IL‑7、IL‑15浓度分别为10ng/ml、10ng/ml、20ng/ml的培养基。本发明通过分离诱导培养液对TIL细胞进行体外扩增和诱导分化，最大限度获得具有高效增殖活性及强大肿瘤杀伤能力的高记忆表型TILs，方法简单且高效，记忆表型T淋巴细胞占比高，可用于治疗晚期恶性黑色素瘤。

公开(公告)号：CN118126953A

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202410167780.2

申请日：2024-02-06

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 顾建英 ,  卫传元 ,  高子煦 ,  沈康杰 ,  杨杨 ,  王璐 ,  宋正清 ,  朱煜 ,  郑少鸾 ,  宣江颖

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/569 ,  G01N33/574

Abstract: 本申请涉及细胞培养领域，公开了一种人肢端恶性黑色素瘤永生化细胞株及应用。人肢端恶性黑色素瘤永生化细胞株共两株，分别命名为：ZSAM‑09和ZSAM‑15。本申请的人肢端恶性黑色素瘤永生化细胞株用于探究肢端恶性黑色素瘤生物学特点和发生发展机制，应用包括：制备人肢端恶性黑色素瘤诊断试剂；制备人肢端恶性黑色素瘤药物；制备人肢端恶性黑色素瘤细胞模型或动物模型；人肢端恶性黑色素瘤的体外研究；开发药物靶点。本申请构建了来源于人的肢端恶性黑色素瘤细胞系，所得永生化细胞系与原代黑色素瘤细胞系相比，可以无限传代且增殖能力更强，且该细胞系具有中国人的遗传背景，为国人肢端型恶性黑色素瘤的相关研究提供了良好的材料。

公开(公告)号：CN112779217B

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202110332346.1

申请日：2021-03-29

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 顾建英 ,  周宇红 ,  卢莉莉 ,  孙磊 ,  吴伟忠 ,  卫传元 ,  高子煦 ,  肖淑秀 ,  宋正清 ,  白金金

IPC: C12N5/0783 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞的培养方法，包括：无菌切取肿瘤组织置于培养液中，在无菌冷链条件下将瘤体机械剪碎、消化，获取单细胞悬液，分离提取肿瘤浸润T淋巴细胞，加入到含有分离诱导培养液的培养基中进行体外扩增和诱导分化，培养7–21天得到高记忆表型肿瘤浸润T淋巴细胞，分离诱导培养液为含有IL‑2、IL‑7、IL‑15浓度分别为10ng/ml、10ng/ml、20ng/ml的培养基。本发明通过分离诱导培养液对TIL细胞进行体外扩增和诱导分化，最大限度获得具有高效增殖活性及强大肿瘤杀伤能力的高记忆表型TILs，方法简单且高效，记忆表型T淋巴细胞占比高，可用于治疗晚期恶性黑色素瘤。