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公开(公告)号：CN101736022A
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200810202926.3
申请日：2008-11-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种人可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的高效制备方法。本发明方法通过如下步骤：(1)将人可溶性鸟苷酸环化酶核苷酸编码序列装入表达载体，并转化表达用大肠杆菌菌株；(2)将(1)所得菌株接种于改进后的TB培养液，IPTG诱导表达过夜；(3)将(2)所得菌体破菌，离心，过Ni-NTA柱，tev酶酶切，过Ni-NTA柱，heme重组。制得纯度达90％以上的人可溶性鸟苷酸环化酶蛋白，产量达20mg/L以上，本方法能克服目前人可溶性鸟苷酸环化酶产量较低，成本较高，不能满足对sGC的应用需求的缺陷，是目前产量最高的低成本表达方法。
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公开(公告)号：CN101736022B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN200810202926.3
申请日：2008-11-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种制备人可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的方法。本发明方法通过如下步骤：(1)将人可溶性鸟苷酸环化酶核苷酸编码序列装入表达载体，并转化表达用大肠杆菌菌株；(2)将(1)所得菌株接种于改进后的TB培养液，IPTG诱导表达过夜；(3)将(2)所得菌体破菌，离心，过Ni-NTA柱，tev酶酶切，过Ni-NTA柱，heme重组。制得纯度达90％以上的人可溶性鸟苷酸环化酶蛋白，产量达20mg/L以上，本方法能克服目前人可溶性鸟苷酸环化酶产量较低，成本较高，不能满足对sGC的应用需求的缺陷，是目前产量最高的低成本表达方法。
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公开(公告)号：CN103908468A
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201410158564.8
申请日：2014-04-21
Applicant: 复旦大学
IPC: A61K31/7084 , A61P35/00
CPC classification number: A61K31/7084 , A61K31/706 , A61K31/7064 , A61K31/7076 , A61K31/708
Abstract: 本发明属于医药技术领域，具体为环二核苷酸cGAMP在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明研究表明，cGAMP可以抑制多种肿瘤细胞的生长，具有明显的抗肿瘤作用，可用于制备抗肿瘤药物；所制备的抗肿瘤药物毒性低、效果好。经裸鼠皮下移植瘤模型表明，cGAMP对人胃癌细胞株MNK-45，人肺腺癌细胞株A549，人结肠癌细胞株Lovo，人肝癌细胞株SMMC-7721，人前列腺癌细胞株PC-3，人胰腺癌细胞SW1990的裸鼠皮下移植瘤均有显著的抑制作用，并经动物急性毒性实验表明cGAMP的急性毒性较低，因此，可用于制备抗肿瘤药物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101798580B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201010023059.4
申请日：2010-01-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种制备人类病原体艰难梭菌中乙酰辅酶A合成酶(ACS)的方法。本发明利用基因工程技术成功得到了人类病原体clostridium difficile630中乙酰辅酶A合成酶目的基因的表达质粒，将质粒转入大肠杆菌宿主菌培养发酵，首次建立了人类病原体clostridium difficile 630中乙酰辅酶A合成酶的高效表达、纯化方法。本发明方法可得纯度达90％以上的clostridium difficile 630乙酰辅酶A合成酶蛋白，产量达10mg/L以上，是目前唯一报道的表达方法。本发明在生物医药领域具有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN101798580A
公开(公告)日：2010-08-11
申请号：CN201010023059.4
申请日：2010-01-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种制备人类病原体艰难梭菌中乙酰辅酶A合成酶(ACS)的方法。本发明利用基因工程技术成功得到了人类病原体clostridium difficile630中乙酰辅酶A合成酶目的基因的表达质粒，将质粒转入大肠杆菌宿主菌培养发酵，首次建立了人类病原体clostridium difficile 630中乙酰辅酶A合成酶的高效表达、纯化方法。本发明方法可得纯度达90％以上的clostridium difficile 630乙酰辅酶A合成酶蛋白，产量达10mg/L以上，是目前唯一报道的表达方法。本发明在生物医药领域具有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN101797251A
公开(公告)日：2010-08-11
申请号：CN201010023052.2
申请日：2010-01-21
Applicant: 复旦大学
IPC: A61K31/4745 , A61K31/444 , A61K31/47 , A61P31/04 , G01N21/31
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体为以乙酰辅酶A合成酶(ACS)为靶点的人类病原体clostridium difficile抑制剂。本发明利用快速反应动力学技术成功发现了具有高度抑制活性的乙酰辅酶A合成酶抑制剂，包括1，10-邻菲咯啉、2，2-联吡啶和8-羟基喹啉，其中已有临床应用的药物8-羟基喹啉在较低浓度时几乎可以100％抑制乙酰辅酶A的甲基转移活性。本发明方法是目前唯一报道的人类病原体clostridium difficile乙酰辅酶A合成酶的高效抑制剂。本发明在生物医药领域具有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN101736005A
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200810202928.2
申请日：2008-11-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种高效制备人细胞色素c的方法。现有技术一直难以得到高纯度的全长人细胞色素c，并且存在产率低的不足。本发明利用RT-PCR等基因工程技术得到了人细胞色素c的cDNA，并构建了质粒，转入大肠杆菌工程菌培养发酵，建立了人细胞色素c的高效表达、纯化方法。本发明方法可得纯度达98％以上的全长人细胞色素c蛋白。该方法人细胞色素c的产量可达20mg/L菌液以上，是目前已知最高的，比通常文献所报道的提高了数倍。本发明在生物医药领域有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN101736004A
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200810202927.8
申请日：2008-11-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因工程和蛋白工程领域，具体涉及一种获得高纯度淀粉样多肽Aβ(1-40)的方法。目前，淀粉样多肽多为利用化学合成的手段获得，本发明首次采用生物工程方法表达可溶性的淀粉样多肽。本发明以smt3-polyQ基因为基础，构建表达质粒，转入大肠杆菌工程菌培养，收集菌体。菌体超声破菌、离心后用Ni柱纯化，经过superdex？G-75分离纯化和除盐处理得到纯度达95％以上的融合蛋白。然后利用SUMO蛋白酶酶切，后经过镍柱分离纯化，再经过superdex？G-75分离纯化和除盐处理可以得到野生型淀粉样多肽Aβ(1-40)。
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