一种单细胞基因组测序文库的构建方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN118048697A

    公开(公告)日:2024-05-17

    申请号:CN202410076321.3

    申请日:2024-01-18

    Abstract: 本申请提供了一种单细胞基因组测序文库的构建方法及试剂盒。该方法包括步骤S1制备单细胞样本的基因组DNA;步骤S2将基因组DNA置于片段化反应体系中,获得具有细胞标签和文库扩增接头序列的片段化DNA,基因组DNA片段化反应体系中包括含有细胞标签和文库扩增接头序列的Tn5转座酶;步骤S3将不同单细胞来源的片段化后的基因组DNA混合;步骤S4将混合后的DNA使用测序文库接头引物同步完成DNA量的扩增和测序文库的构建。本申请通过使用Tn5转座酶,使极微量的单细胞基因组DNA在随机被切断的同时末端被引入文库扩增接头序列,以细胞标签区分不同单细胞,以测序文库接头作为引物扩增片段化后的DNA片段,同步实现多个单细胞基因组的扩增和文库的构建。

    一种经热解芳构化反应合成酮基布洛芬的方法

    公开(公告)号:CN117417245A

    公开(公告)日:2024-01-19

    申请号:CN202311375453.8

    申请日:2023-10-23

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种经热解芳构化反应合成酮基布洛芬的方法,该合成方法以环己酮为起始物质,经Stork烯胺化得到中间体1‑吡咯烷‑1‑环己烯,中间体1‑吡咯烷‑1‑环己烯与卤化苄发生取代反应,再经水解生成2‑苄基环己酮。2‑苄基环己酮在路易斯酸的作用下发生Aldol缩合与内酯化串联反应生成中间体二氢苯并呋喃酮,之后再在高温下发生热解芳构化反应得到脱氧酮基布洛芬,脱氧酮基布洛芬经苄位氧化得到酮基布洛芬。该合成方法中用到反应物均为常规试剂且条件稳定可控,操作简单安全,原料易得,反应后处理简单。

    一种基于微流控技术的高通量空间转录组测序方法

    公开(公告)号:CN119120669A

    公开(公告)日:2024-12-13

    申请号:CN202411347054.5

    申请日:2024-09-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及空间转录组测序技术领域,具体公开了一种基于微流控技术的高通量空间转录组测序方法,步骤:S1、制备微流控芯片;S2、正电基片上贴芯片一并通入B0,孵育后通入48种barcode‑A;S3、将芯片二替换至正电基片上,通入48种barcode‑B及T4DNA连接酶连接体系后孵育;S4、将芯片三替换至正电基片上,将含有15种barcode‑C序列的T4DNA连接酶连接体系加至微孔中孵育;S5、将组织切片贴到负载了空间编码阵列的基片上;S6、在基片上合成cDNA;S7、从基片上释放并回收RNA/DNA杂交链产物;S8、合成cDNA双链并扩增cDNA双链产物;S9、文库构建并测序;S10、进行数据分析。简化了微流控芯片进行组织样本检测的流程,避免在贴、揭PDMS芯片时造成组织脱落及RNA扩散,并保证空间转录组测序的质量。

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