一种RHOB基因点突变的人源脑瘫兔模型及构建方法

    公开(公告)号:CN114958847A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210521318.9

    申请日:2022-05-13

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种RHOB基因点突变的人源脑瘫兔模型,涉及利用CRISPR‑CAS9构建人源脑瘫兔模型,同时和公开了其构建方法,能够有效模拟人RHOB S73F型脑瘫病理过程,有助于探究RHOB基因突变对于动物大脑及神经发育的具体调控作用及影响因素,增强对RHOB生物学功能的了解,为临床上预防和诊疗脑瘫疾病奠定相关的理论基础,提供新的思路和方法;能更有效地测试新药和新诊断标记物等在临床应用中的效果,同时大大降低新药研发的风险,为临床研究提供基础模型。

    一种构建先天性高胰岛素血症模型的方法及模型

    公开(公告)号:CN114946766B

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202210548261.1

    申请日:2022-05-20

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 应用,能够有助于基础医学研究及机制探究。本发明公开了一种构建先天性高胰岛素血症模型的方法及模型,通过对kcnj11基因P.H259R位点及P.H296R位点进行共同突变打靶,胚胎注射后进行胚胎移植,获得兔先天性高胰岛素血症模型,利用SpRY‑ABEmax基因编辑技术优势是没有识别PAM区域的序列限制,可以完成指定位点的突变顺利进行;克服了传统的CRISPR/(56)对比文件Walczewska-Szewc, K.Spacial models ofmalfunctioned protein complexes help toelucidate signal transduction criticalfor insulin release《.systems》.2019,第177卷第48-55页.Song, YN.CRISPR/Cas9-mediated mosaicmutation of SRY gene induceshermaphroditism in rabbits《.BIOSCIENCEREPORTS》.2018,第38卷(第2期),第1490页.

    体外转录调控DNA
    6.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101984062B

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN201010182404.9

    申请日:2010-05-26

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒构建,其特征在于具体制备方法如下:首先设计基因体外转录空载体Vitro-TransPMD-18T,然后获得EGFP和维持干细胞自我更新的猪源的6个关键基因的cDNA,并按相应的酶切位点进行酶切连接,最后用体外转录试剂盒对7个体外转录质粒进行体外转录,得到相应的mRNA,然后将Vitro-Trans-EGFP转染进猪胚胎成纤维细胞:其6个基因体外转录出的mRNA转染进猪胚胎成纤维细胞后能够使其转变成猪的多能干细胞;6个基因体外转录出的mRNA能够高效翻译。

    双温多重PCR鉴定猪早期胚胎性别的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN101724696A

    公开(公告)日:2010-06-09

    申请号:CN200910217772.X

    申请日:2009-10-28

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明一种双温多重PCR鉴定猪早期胚胎性别的方法及试剂盒,建立一种快速、灵敏、准确率高的适用于猪早期胚胎性别鉴定的双温多重PCR反应体系,用于猪早期胚胎的性别鉴定。以双温多重PCR技术体系开发的猪早期胚胎性别鉴定试剂盒,充分发挥了双温多重PCR高效、经济简便、省时、反应特异性高的特点,实现快速鉴定猪早期胚胎从而为实现猪性别控制,提高猪养殖业经济效益,节约养殖成本提供便利。

    一种构建新型肌萎缩侧索硬化症模型的方法及模型

    公开(公告)号:CN116497060A

    公开(公告)日:2023-07-28

    申请号:CN202210816453.6

    申请日:2022-07-12

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供一种构建新型肌萎缩侧索硬化症模型的方法及模型,利用SpRY‑CBE单碱基基因编辑技术进行ARPP21基因p.P521L位点突变构建一对寡聚核苷酸链。本发明提供的一种构建新型肌萎缩侧索硬化症模型的方法及模型通过对ARPP21基因P.P521L位点进行突变打靶,胚胎注射后进行胚胎移植,获得兔先天性高胰岛素血症模型,利用SpRY‑CBE基因编辑技术优势是没有识别PAM区域的序列限制,可以完成指定位点的突变顺利进行;克服了传统的CRISPR/Cas9基因编辑技术需要识别PAM区域为NGG碱基序列,大部分突变位点无法进行编辑;本发明所利用的SpRY‑CBE碱基编辑技术首次在家兔上进行应用。该兔疾病模型不但能够有助于基础医学研究及机制探究,同时也是SpRY‑CBE碱基编辑系统首次在家兔动物中进行应用。

    构建阿尔兹海默症的兔模型方法

    公开(公告)号:CN115125244A

    公开(公告)日:2022-09-30

    申请号:CN202210522336.9

    申请日:2022-05-14

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种构建阿尔兹海默症的兔模型方法,属于动物生物技术领域。本发明的目的是利用CRISPR/Cas9技术将家兔的两个位点进行点突变,使得构建的双基因位点点突变的兔子呈现阿尔兹海默病表型的构建阿尔兹海默症的兔模型方法。本发明以兔MAPT基因11号外显子和/或PSEN1基因4号外显子为靶向,通过点突变的方式改变其遗传序列,使得兔子呈现阿尔兹海默症的表型。本发明为新一代药物筛选提供新思路,对研究阿尔兹海默病的病理过程对该疾病的预防和治疗具有指导意义。

    采用敲除技术建立Gadd45a敲除兔模型的方法

    公开(公告)号:CN107630043A

    公开(公告)日:2018-01-26

    申请号:CN201710950923.7

    申请日:2017-11-14

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种采用敲除技术建立Gadd45a敲除兔模型的方法,属于生物技术领域。本发明的目的是利用Crispr/cas9技术敲除GADD45a基因,构建兔模型,探究该基因对于动物肝脏影响的采用敲除技术建立Gadd45a敲除兔模型的方法。本发明的步骤是:构建sgRNA、合成双链DNA、p UC-57载体线性化、连接p UC-57载体和双链DNA、转化、单克隆的挑取及质粒DNA的提取、鉴定质粒测序、CAS9表达质粒,经酶切线性化,用于体外转录。本发明经过相关检测,成功获得Gadd45a敲除兔模型,该模型的获得能够在给予相应酒精刺激后模拟临床上脂肪肝、肝硬化和肝癌等肝功能病的病理过程,能更有效地预测新疫苗、新药和新诊断试剂等在临床应用中的效果,同时大大降低新药研发的风险,为临床研究提供基础模型。

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