非洲猪瘟病毒DP238L蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118878646A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410809814.3

    申请日:2024-06-21

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒DP238L蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用,将密码子优化后的所述重组的非洲猪瘟病毒DP238L蛋白的编码基因序列克隆到原核表达载体中,得到含有非洲猪瘟病毒DP238L亚单位蛋白编码基因的重组质粒;再将所述含有非洲猪瘟病毒DP238L亚单位蛋白编码基因的重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞Rosetta中,得到重组工程菌;通过条件优化重组工程菌的菌株,得到高度表达该蛋白的条件;发酵培养高度表达的菌株,纯化后得到重组的非洲猪瘟病毒DP238L亚单位可溶性融合蛋白,制备方法简单、成本低能够达到国家现有标准,并且相关方法可以结合应用于疫苗的开发,具有重要的社会效益。

    一种能将应激信号转变为EGFP荧光信号的报告细胞系

    公开(公告)号:CN112301000B

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202011277088.3

    申请日:2020-11-16

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种能将应激信号转变为EGFP荧光信号的报告细胞系,同时还公开了如何制备该报告细胞系相关的方法,以猪基因组中的一个能识别特异性应激源的猪HSPA6基因为前提,利用CRISPR/Cas9介导基因敲入技术,成功地构建了猪HSPA6基因与EGFP同步表达的PK‑15细胞系,结果显示该细胞系能高效且灵敏的将猪HSPA6基因应激源对该细胞系的刺激信号转变为EGFP荧光信号;本发明可以应用于病原检测、环境监测、食品安全、药物及毒物研究等方面。

    能有效编辑猪miR-17-92基因簇的sgRNA

    公开(公告)号:CN108642055A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810470831.3

    申请日:2018-05-17

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供一条能有效编辑猪miR-17-92基因簇的sgRNA,以能特异识别猪miR-17-92基因簇的sgRNA为前提,利用CRISPR/Cas9和RNAi技术,成功将shRNA定点整合到猪肾细胞PK-15-EGFP-KI细胞,并筛选出敲低了EGFP基因表达的阳性细胞克隆;利用上述sgRNA将shRNA定点整合到猪胎儿成纤维细胞,成功筛选出shRNA定点整合的阳性细胞系,并检测到shRNA的稳定转录和定点整合事件,该细胞系的制备过程中,shRNA在猪miR-17-92基因簇的启动子的作用下稳定转录和有效表达,没有引入任何的外源的启动子基因及正负筛选标记基因,增加了转基因猪的安全性,对去除转基因猪的生物安全隐患具有重要意义。

    能有效编辑猪ROSA26基因的sgRNA及其应用

    公开(公告)号:CN106916820A

    公开(公告)日:2017-07-04

    申请号:CN201710341126.9

    申请日:2017-05-16

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一条能有效编辑猪ROSA26基因的sgRNA及其应用,以猪基因组中的一个能特异识别猪ROSA26基因的sgRNA为前提,利用CRISPR/Cas9 介导基因敲入技术,成功地构建了EGFP定点整合的猪胎儿成纤维细胞的细胞系,结果显示该细胞系能稳定且高效的表达EGFP基因,且该细胞系的制备过程中没有引入任何的外源的启动子基因及正负筛选标记基因。这大大的增加的转基因猪的安全性,对去除转基因猪农产品的生物、食品安全隐患具有重要意义。

    一种用于检测猪瘟病毒感染的报告细胞系

    公开(公告)号:CN104017904A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410273857.0

    申请日:2014-06-19

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: C07K14/00 C12N15/85

    Abstract: 本发明提供了一种用于检测猪瘟病毒感染的报告细胞系,制备的猪瘟病毒感染报告细胞系含有CSFV特异识别的氨基酸序列、GFP荧光淬灭序列以及GFP蛋白。该细胞系只有在感染CSFV后才发出绿色荧光,不需要后续处理,可以在病毒感染后快速、直观地报告病毒感染情况;检测灵敏度高,而且可以一次分析多个样本。该报告细胞系既可以用于CSFV的诊断,也可以用于病毒分离培养、抗病毒药物筛选及疫苗生产,在临床检测、实验室研究上具有广阔的应用前景。

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