公开(公告)号：CN103898059B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410078438.1

申请日：2014-03-05

Applicant: 吉林医药学院

Inventor： 郝峰 ,  扈昕虹 ,  方芳 ,  杨敬研 ,  郑锴 ,  曲适 ,  杨娟 ,  王长文 ,  孙宝霄 ,  李艳 ,  许会静 ,  孙美艳 ,  陈爽 ,  于向博 ,  王彦力

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明提供了一种筛选钙激活氯离子通道抑制剂的细胞模型及筛选方法，依次包括如下步骤：（1）构建Anoctamin1或Anocatmin2以及YFP?H148Q/I152L的真核表达载体；（2）将上述两种载体分别稳定转染入FRT细胞中，使FRT细胞共表达YFP?H148Q/I152L和Anoctamin1或Anocatmin2两种蛋白，经过多次有限稀释，获取FRT细胞模型；（3）将FRT细胞模型传代到黑壁透明底的黑壁微孔板中；（4）将待测小分子化合物加入黑壁微孔板中，孵育后加入使细胞内钙离子浓度升高的试剂和高浓度碘离子，通过检测相对荧光强度的变化，可筛选钙激活氯离子通道抑制剂。

公开(公告)号：CN112280820A

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN202011074687.5

申请日：2020-10-09

Applicant: 吉林医药学院

Inventor： 郝峰 ,  杨敬研 ,  姜琳 ,  郑锴 ,  解宇浩 ,  张嘉琪

IPC: C12Q1/02 ,  C12N5/10 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及生物医药领域，特别涉及FRT细胞株在制备筛选CFTR调节剂的制剂或试剂盒中的应用。倒置荧光显微镜下观察到CFTR表达在细胞膜上，YFP‑H148Q/I152L表达于胞浆中；成功构建共表达CFTR和YFP‑H148Q/I152L的FRT细胞模型；荧光变化斜率值与CFTR调节剂浓度成剂量依赖关系，该模型可筛选CFTR调节剂；荧光变化斜率值可反映胞浆内cAMP浓度，该模型可敏感检测胞浆内cAMP浓度。