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公开(公告)号：CN110229761A
公开(公告)日：2019-09-13
申请号：CN201910530202.X
申请日：2019-06-19
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明公开了高效利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌的构建及应用，在酿酒酵母木糖代谢菌株中分别过表达内源噻唑合酶THI4或木酮糖还原酶XYL2。该高效利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌的构建及应用，在过表达来源于热带假丝酵母的木糖还原酶XR(由XYL1编码)和木糖醇脱氢酶XDH(由XYL2编码)的过表达质粒pYX212-XR-XDH的基础上，进一步过表达酿酒酵母BY4741内源噻唑合酶THI4或木酮糖还原酶XYL2，转化单倍体酿酒酵母BY4741及二倍体酿酒酵母Kyokai No.6。该方法应用常用组成型高拷贝质粒pYX212，能够实现在混糖发酵过程中提高木糖、葡萄糖共利用过程中碳源的消耗速率和乙醇产量。
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公开(公告)号：CN113774076A
公开(公告)日：2021-12-10
申请号：CN202110982255.2
申请日：2021-08-25
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明属于微生物改造技术领域，公开了一种利用葡萄糖进行辅助微生物基因操作的方法。该方法为：将质粒pMV26N导入大肠杆菌DH10B(ΔPTS)后采用含有抗生素的LB液体培养基培养，得到活化供体菌；将Nocardioidessp.菌采用LB液体培养基培养，得到活化Nocardioidessp.菌；将活化供体菌和活化Nocardioidessp.菌混合后涂布基本培养基固体平板培养，涂布加有卡那霉素的无菌超纯水上层，培养20‑30h，获得成功导入质粒的Nocardioidessp.菌。该方法无需使用抗生素杀死供体菌，便可实现接合转移，且接合转移效果好。
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公开(公告)号：CN104109688A
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201410351442.0
申请日：2014-07-23
Applicant: 南通大学
IPC: C12N15/76
Abstract: 本发明公开了一种链霉菌基因组DNA大片段体内随机敲除的方法，包括：1）构建系列重组质粒pTNL_101、pTNL_103、pTNL_104、pTNL_105为第一个sceS酶切位点随机导入质粒；2）将所构建的重组质粒pTNL_101、pTNL_103、pTNL_104、pTNL_105导入天蓝色链霉菌M145，构建随机染色体大片段缺失的突变子库1；3）构建系列重组质粒pTNL_102为第二个sceS酶切位点随机导入质粒，导入突变子库1，获得突变子库2；4）R2YE平板筛选出大片段敲除突变子，精细定位染色体删除区段，并在出发菌株中进行定位敲除予以验证。本发明可以有效随机去除染色体区域可以去除的部分，目前定位结果表明敲除片段长度在2kb-100kb之间，为改造链霉菌为抗生素异源表达宿主和底盘生物提供依据。
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公开(公告)号：CN116497048A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202310424222.5
申请日：2023-04-20
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明提供了可用于成团泛菌胞内游离复制的质粒和转化方法，可用于在成团泛菌内进行内源和异源基因的表达。如果进一步增加可用基因元器件，这些质粒在成团泛菌的基因编辑、底盘细胞和细胞工厂改造等方面都具有潜在的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114990148B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202210835174.4
申请日：2022-07-15
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明构建了一些应用于简单类诺卡氏菌的质粒及其筛选和测试方法，接合本发明描述的方法可用于鉴别不同复制区在简单类诺卡氏菌中的稳定性。同时，在这些质粒上克隆入不同的生物元件可用于进一步发现和验证简单类诺卡氏菌可用的生物元件，进行适配性测试。这些质粒同时也可用于简单类诺卡氏菌中进行基因表达和合成生物学等研究。
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公开(公告)号：CN117187149A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310904383.4
申请日：2023-07-24
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明提出一种成团泛菌突变株及其获取方法和应用。成团泛菌的突变株性状包括：白色；没有胡萝卜素合成基因簇；没有β‑内酰胺酶基因；丢失若干内源质粒；其导入的外源质粒的稳定性提高至95％。本发明所描述的突变株可适配归巢核酸酶I‑sceⅠ的基因编辑方案(Posfai et al.,1999,Nucleic Acids Research和Yu etal.,2008Nucleic Acids Research)的相关质粒；增加该菌可用的抗生素筛选标签和增加后续导入质粒的稳定性(可用于增加基因表达的稳定性)；同时以缺失β‑胡萝卜素生物合成基因簇的成团泛菌NTU‑3W作为底盘生物理论上可用于提高草欧菌素(herbicolin)和andrimid等天然产物的产量(缺少胡萝卜素生物合成基因簇后可提高目标产物合成的前体代谢物如乙酰CoA的积累实现)并降低产物提取的难度和成本。
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公开(公告)号：CN113774076B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202110982255.2
申请日：2021-08-25
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明属于微生物改造技术领域，公开了一种利用葡萄糖进行辅助微生物基因操作的方法。该方法为：将质粒pMV26N导入大肠杆菌DH10B(ΔPTS)后采用含有抗生素的LB液体培养基培养，得到活化供体菌；将Nocardioidessp.菌采用LB液体培养基培养，得到活化Nocardioidessp.菌；将活化供体菌和活化Nocardioidessp.菌混合后涂布基本培养基固体平板培养，涂布加有卡那霉素的无菌超纯水上层，培养20‑30h，获得成功导入质粒的Nocardioidessp.菌。该方法无需使用抗生素杀死供体菌，便可实现接合转移，且接合转移效果好。
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公开(公告)号：CN114990148A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210835174.4
申请日：2022-07-15
Applicant: 南通大学
Abstract: 本发明构建了一些应用于简单类诺卡氏菌的质粒及其筛选和测试方法，接合本发明描述的方法可用于鉴别不同复制区在简单类诺卡氏菌中的稳定性。同时，在这些质粒上克隆入不同的生物元件可用于进一步发现和验证简单类诺卡氏菌可用的生物元件，进行适配性测试。这些质粒同时也可用于简单类诺卡氏菌中进行基因表达和合成生物学等研究。
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公开(公告)号：CN104109688B
公开(公告)日：2017-03-01
申请号：CN201410351442.0
申请日：2014-07-23
Applicant: 南通大学
IPC: C12N15/76
Abstract: 本发明公开了一种链霉菌基因组DNA大片段体内随机敲除的方法，包括：1）构建系列重组质粒pTNL_101、pTNL_103、pTNL_104、pTNL_105为第一个sceS酶切位点随机导入质粒；2）将所构建的重组质粒pTNL_101、pTNL_103、pTNL_104、pTNL_105导入天蓝色链霉菌M145，构建随机染色体大片段缺失的突变子库1；3）构建系列重组质粒pTNL_102为第二个sceS酶切位点随机导入质粒，导入突变子库1，获得突变子库2；4）R2YE平板筛选出大片段敲除突变子，精细定位染色体删除区段，并在出发菌株中进行定位敲除予以验证。本发明可以有效随机去除染色体区域可以去除的部分，目前定位结果表明敲除片段长度在2kb-(56)对比文件Zhiqun Lu, 等.Promotion of markerlessdeletion of the actinorhodin biosyntheticgene cluster in Streptomyces coelicolor.《Acta Biochim Biophys Sin》.2010,第42卷(第10期),Gust B, 等.PCR-targeted Streptomycesgene replacement identifies a proteindomain needed for biosynthesis of thesesquiterpene soil odor geosmin《.PNAS》.2003,第100卷(第4期),1541-1546.
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