一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株及其功能验证方法

    公开(公告)号:CN106978431B

    公开(公告)日:2021-04-30

    申请号:CN201710138049.7

    申请日:2017-03-09

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株及其功能验证方法,该技术方案首先设计了一对引物,利用该引物以斑马鱼粪便菌群DNA为模板,扩增得到了含有Usp45乳酸乳球菌分泌表达信号肽的pBpp蛋白表达基因,再利用pMG36e质粒为载体,先于大肠杆菌MC1061中扩增质粒,而后采用电转方式导入乳酸乳球菌MG1363。该技术依托于乳酸乳球菌定植肠道的特性,可于胃酸环境中对pBpp蛋白起到保护作用,将重组蛋白的分泌表达场所集中于肠道环境,不仅实现了pBpp蛋白体内表达,而且提升了吸收效果。实验发现,本发明所提供的pBpp重组蛋白表达菌株可高效诱导胰腺中β细胞的增殖。

    一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株及其功能验证方法

    公开(公告)号:CN106978431A

    公开(公告)日:2017-07-25

    申请号:CN201710138049.7

    申请日:2017-03-09

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: C12N15/74 A61K49/0008 C07K14/195

    Abstract: 本发明提供了一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株及其功能验证方法,该技术方案首先设计了一对引物,利用该引物以斑马鱼粪便菌群DNA为模板,扩增得到了含有Usp45乳酸乳球菌分泌表达信号肽的pBpp蛋白表达基因,再利用pMG36e质粒为载体,先于大肠杆菌MC1061中扩增质粒,而后采用电转方式导入乳酸乳球菌MG1363。该技术依托于乳酸乳球菌定植肠道的特性,可于胃酸环境中对pBpp蛋白起到保护作用,将重组蛋白的分泌表达场所集中于肠道环境,不仅实现了pBpp蛋白体内表达,而且提升了吸收效果。实验发现,本发明所提供的pBpp重组蛋白表达菌株可高效诱导胰腺中β细胞的增殖。

    一种针对pBpp蛋白的纯化方法

    公开(公告)号:CN106967156A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710137210.9

    申请日:2017-03-09

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: C07K14/195 C12N15/70

    Abstract: 本发明提供了一种针对pBpp蛋白的纯化方法,该技术方案以斑马鱼粪便菌群DNA为模板,扩增得到pBpp表达基因,再利用pET28c质粒为载体,先于大肠杆菌TOP10中扩增质粒,而后转化入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达。在此基础上,本发明针对重组菌株的特性设计了适宜的蛋白表达及诱导条件,对于胞内表达的pBpp蛋白,本发明对菌体进行超声破碎后,先利用镍珠结合游离的蛋白,再进行蛋白洗脱,最后分别利用PBS和甘油进行透析,从而实现了pBpp蛋白的有效纯化。实验发现,本发明所制备的pBpp蛋白可确切诱导胰腺中β细胞的增殖,从而对因胰岛β细胞损伤所导致的糖尿病起到治疗效果。

    用于表达AIF及整合有AIF的重组单链抗体的菌株及该菌株的应用

    公开(公告)号:CN106591207A

    公开(公告)日:2017-04-26

    申请号:CN201611112189.9

    申请日:2016-12-07

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种用于表达AIF及整合有AIF的重组单链抗体的菌株及该菌株的应用。该技术方案利用单链抗体T18与肿瘤内皮细胞标志分子TEM1特异性结合的特性,构建了AIF‑T18蛋白复合物,从而实现凋亡诱导因子AIF对肿瘤细胞的靶向给药,提升其对肿瘤细胞的诱导凋亡作用。本发明首先以pET302质粒为载体构建了整合有AIF‑T18表达基因的重组质粒,而后以原核表达系统E.coli BL21为宿主将重组质粒导入其中,得到了具有稳定表达能力的重组菌株。在此基础上,本发明围绕该重组菌的特性设计了高效的蛋白表达方法,并针对以包涵体形式存在的蛋白表达产物匹配了适宜的变性、复性、纯化条件,从而实现了AIF‑T18的有效制备。

    一种增强可达性的TIG焊旋转电弧传感器

    公开(公告)号:CN105817742A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610252874.5

    申请日:2016-04-22

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: B23K9/1276 B23K9/321

    Abstract: 一种增强可达性的TIG焊旋转电弧传感器,所述感器包括外部固定壳体、中部高速旋转装置和内部导电旋转装置。本发明将保护气从导电杆中间通入,对导电杆和钨极的冷却效果更好。采用空冷的冷却方式,减小了传感器的质量和体积;气罩为固定于分流筛上的小体积陶瓷气罩,使得传感器端部体积大为减小。结构紧凑、合理,外形尺寸小巧,使用灵活方便,可达性更好;固定电弧旋转半径,使传感器旋转更加平稳,提高了跟踪精度。可通过更换偏心块更改电弧旋转半径,避免了依靠螺钉改变旋转半径时对偏心套盖板的磨损,从而增加了传感器使用寿命;通过转接接头连接导电杆和分流筛,解决了导电杆和分流筛螺纹不匹配的问题;夹持机构简单牢固。

    一种研究微生物间相互关系的透析袋分离培养法

    公开(公告)号:CN105483043A

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201511013560.1

    申请日:2015-12-31

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: C12N1/20 C12Q1/06

    Abstract: 一种研究不同种类微生物共同培养的方法,其特征是在无菌环境下将少量含不同种类微生物的培养基分别密封于特定孔径的透析袋,之后将上述密封后的透析袋浸泡于液体培养基中进行培养;此方法可以同时培养多种微生物,不影响各种细菌与培养基中的营养物质和细菌代谢物质交换;培养结束后无菌环境下取出透析袋内含细菌的培养基进行活菌计数后可准确计算各细菌生长数量,进而研究不同微生物之间的拮抗或共生作用,此外,此方法可通过选择不同孔径透析袋进而控制细菌进出透析袋的蛋白,研究不同大小细菌蛋白对其他细菌的生理作用。该方法能够同时研究多种微生物之间的相互作用,简单、快捷。

    一种利用水稻osa-miR5511基因提高水稻产量的方法

    公开(公告)号:CN112226458A

    公开(公告)日:2021-01-15

    申请号:CN202011012122.4

    申请日:2020-09-23

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域,具体涉及一种利用水稻osa‑miR5511基因提高水稻产量的方法。该方法通过基因工程手段来抑制osa‑miR5511基因的表达,所述水稻osa‑miR5511基因的成熟序列如SEQ ID NO.1所示,其发夹结构序列如SEQ ID NO.2所示。本发明发现osa‑miR5511缺失表达水稻的穗长显著增长7.2cm,每穗粒数显著增多23.7粒,千粒重显著增加3.0克,单株产量显著提高3.6克,单株产量增产率高达24.2%,为培养高产水稻优良品种提供了一种新的分子育种途径,具有广阔的应用前景。

    一种基于大肠杆菌表达系统的重组pBpp蛋白制备方法

    公开(公告)号:CN106893733A

    公开(公告)日:2017-06-27

    申请号:CN201710138073.0

    申请日:2017-03-09

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: C12N15/70 C07K14/461

    Abstract: 本发明提供了一种基于大肠杆菌表达系统的重组pBpp蛋白制备方法,该技术方案以斑马鱼粪便菌群DNA为模板,扩增得到pBpp表达基因,再利用pET28c质粒为载体,先于大肠杆菌TOP10中扩增质粒,而后转化入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达。在此基础上,本发明针对重组菌株的特性设计了适宜的蛋白表达及诱导条件,对于胞内表达的pBpp蛋白,本发明对菌体进行超声破碎后,先利用镍珠结合游离的蛋白,再进行蛋白洗脱,最后分别利用PBS和甘油进行透析,从而实现了pBpp蛋白的有效纯化。实验发现,本发明所制备的pBpp蛋白可确切诱导胰腺中β细胞的增殖,从而对因胰岛β细胞损伤所导致的糖尿病起到治疗效果。

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