运用分子杂交-酶联免疫显色技术检测坂崎肠杆菌的方法

    公开(公告)号:CN1280429C

    公开(公告)日:2006-10-18

    申请号:CN200410072705.0

    申请日:2004-11-11

    Applicant: 南开大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明公开了一种运用分子杂交-酶联免疫显色技术检测坂崎肠杆菌(Enterobactersakazakii)的方法,属于细菌检测技术,特别是运用分子杂交方法检测致病细菌的技术。其技术方案是,用PCR方法扩增待测细菌的16s和23s rRNA基因间区序列,并用地高辛标记PCR产物,然后与设计的一组特异性寡核苷酸探针杂交,经酶联免疫显色后,可以精确地判断待测样品中是否含有坂崎肠杆菌。该方法的优点是,省去了重复的细菌培养筛选环节,节约时间;分子杂交鉴定方法不受培养条件和细菌生理状态的影响,较生理生化鉴定方法更为准确。

    菌血症检验用基因芯片的检验方法

    公开(公告)号:CN1261590C

    公开(公告)日:2006-06-28

    申请号:CN02129315.5

    申请日:2002-08-30

    Inventor: 黄熙泰 侯亭

    Abstract: 本发明涉及菌血症检验用基因芯片的检验方法,特别是对血液中病原菌DNA的分离、靶基因DNA顺序扩增和鉴定的技术。以基因芯片为基础,建立一种简便快捷、准确的方法,对血液中的病原菌DNA进行有效的分离,PCR(多聚酶链式反应)扩增和标记靶DNA顺序,通过与基因芯片上的探针阵列的杂交、酶联免疫吸附检测,实现对病原菌的分类、鉴定,从而彻底的摒弃冗长、繁杂的血液中病原菌的检验方法。本发明简便快捷、准确,并且由此可延伸到以基因芯片为基础的人体、牲畜其它器官感染病菌检测、环境、卫生检测及海关检疫技术。

    一种检测海水中病原菌污染的寡核苷酸微阵列技术

    公开(公告)号:CN101580877A

    公开(公告)日:2009-11-18

    申请号:CN200910069425.7

    申请日:2009-06-24

    Applicant: 南开大学

    CPC classification number: Y02A50/52

    Abstract: 一种检测海水中病原菌污染的寡核苷酸微阵列技术,属于海水污染监测领域,主要技术方案是以16S-23S rRNA基因转录间区序列作为检测靶点,通过一次聚合酶链式反应扩增,并同时获得地高辛标记,然后进行寡核苷酸杂交;通过酶标抗体催化底物显色,判读获得监测结果。与传统检测海水污染的产品相比,运用微阵列检测获得众多致病菌和污染指标菌的分布状况,即具有高通量的优点;能够直接利用海水作为样本,在保持海水中菌群数目天然比例的情况下真实地获得目标菌的污染状况信息,而现有的检测技术大多数需要富集培养的步骤,不仅破坏了菌群组成的原始比例,结果的可靠程度也较低,并且检测流程较长;寡核苷酸微阵列检测操作流程短,比较灵敏,快速。

    星状诺卡氏菌多重PCR快速检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN1904064A

    公开(公告)日:2007-01-31

    申请号:CN200610014356.6

    申请日:2006-06-15

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种星状诺卡氏菌多重PCR快速检测试剂盒和检测方法。利用PCR技术特异性多重扩增16S-23S核糖体RNA转录间区,达到区分星状诺卡氏菌(Nocardiaasteroides)和相近致病菌的目的,能够大大提高临床诊断星状诺卡氏菌的效率。与传统方法相比能大大缩短诊断时间和准确度,节省劳动力和成本,并且能够排除一些用传统的生化鉴定难以排除的与星状诺卡氏菌非常相近的几个致病种。

    一种利用环介导等温扩增技术检测创伤弧菌的试剂盒

    公开(公告)号:CN101348835B

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN200810151271.1

    申请日:2008-09-09

    Applicant: 南开大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明涉及一种利用环介导等温扩增(LAMP)技术检测创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的试剂盒和检测方法,属于病原菌诊断领域。主要技术方案是利用LAMP技术,针对创伤弧菌毒性相关基因(virulence-correlated gene)的六个区域,设计四条高特异性引物,达到特异性检测创伤弧菌的目的。与传统方法相比,该方法所需设备和操作步骤简单,而且具有快速,高特异性,稳定性强以及灵敏度高等优点,检测成本较低,适合普通诊所和野外检验。

    星状诺卡氏菌多重PCR快速检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN1904064B

    公开(公告)日:2010-09-08

    申请号:CN200610014356.6

    申请日:2006-06-15

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种星状诺卡氏菌多重PCR快速检测试剂盒和检测方法。利用PCR技术特异性多重扩增16S-23S核糖体RNA转录间区,达到区分星状诺卡氏菌(Nocardiaasteroides)和相近致病菌的目的,能够大大提高临床珍断星状诺卡氏菌的效率。与传统方法相比能大大缩短诊断时间和准确度,节省劳动力和成本,并且能够排除一些用传统的生化鉴定难以排除的与星状诺卡氏菌非常相近的几个致病种。

    运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌的方法

    公开(公告)号:CN1635156A

    公开(公告)日:2005-07-06

    申请号:CN200410072852.8

    申请日:2004-11-22

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明公开了一种运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的方法,属于细菌检验技术。其技术方案是利用坂崎肠杆菌种特异性DNA序列,设计特异性寡核苷酸引物和探针,分别应用外切酶探针荧光PCR和荧光染料嵌合PCR技术直接从样本中扩增细菌靶基因。本发明包括设计的坂崎肠杆菌种特异性6条寡核苷酸序列,作为对照的两条报告质粒扩增序列,以及与之配套的荧光PCR反应条件。本发明解决了从食品和临床样本中检测坂崎肠杆菌的标准方法,其有益效果是:省略了细菌的反复培养,不需电泳观察,从而节约时间;此外,此法灵敏度更高,检测速度更快,可进行定量分析。

    用于鉴定血液中病原菌的基因芯片及其制造方法

    公开(公告)号:CN1414112A

    公开(公告)日:2003-04-30

    申请号:CN02129314.7

    申请日:2002-08-30

    Inventor: 黄熙泰 黄志刚

    Abstract: 本发明涉及医学体外诊断技术,具体地讲是一种基因芯片。它是在尼龙膜上设置包括有鉴定细菌的种,属特异性的探针,还包括由此衍生的探针以及每种探针的互补探针或它们的变体。特异性探针可以鉴定包括:流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、甲型副伤寒沙门氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌等至少40细菌,还包括有革兰氏阴性细菌通用探针、细菌通用探针以及假丝酵母探针。基于基因探针构成的基因芯片检测法比较快速、准确,可以用于临床微生物实验室中进行常规诊断,可用于提高微生物感染诊断的速度和准确度,因此可以达到更有效的治疗。

    运用复合荧光PCR技术检测食源性致病肠杆菌的方法

    公开(公告)号:CN101113471A

    公开(公告)日:2008-01-30

    申请号:CN200710057578.0

    申请日:2007-06-07

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明公开了一种运用复合荧光PCR技术检测食源性致病肠杆菌的方法,属于细菌检验技术领域,主要的技术方案是设计了引物组序列。致病肠杆菌是食品中常见的致病菌,严重威胁着人们的健康。快速、准确的检测食品中的致病肠杆菌是有效预防和控制病原菌感染的主要前提条件。需要检测的食源性致病肠杆菌主要包括以下几种:志贺氏菌、沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、出血性大肠杆菌和大肠杆菌O157:H7。针对上述目标菌,本发明克服了现有技术中的缺点,提供一种运用复合荧光PCR技术快速低成本的检测志贺氏菌、沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、出血性大肠杆菌和大肠杆菌O157:H7的方法。该方法可以使用两管PCR反应,能够初筛出上述几种病原微生物。

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