公开(公告)号：CN107397956A

公开(公告)日：2017-11-28

申请号：CN201710668650.7

申请日：2017-08-08

Applicant: 南开大学

Inventor： 吴卫辉 ,  金守光 ,  刘畅 ,  程志晖 ,  靳永新 ,  白芳 ,  陈菲 ,  夏斌 ,  潘晓磊

IPC: A61K39/104 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C07K14/21 ,  C07K1/34 ,  A61P31/04 ,  A61P11/00

Abstract: 本发明涉及一种铜绿假单胞菌外膜蛋白疫苗的制备方法及应用,制备方法是，构建一个能够表达铜绿假单胞菌外膜蛋白OprH的大肠杆菌菌株BL21(DE3)/pET28b-His-OprH，使用IPTG诱导该菌株表达His-OprH融合蛋白并使用Ni-NTA及分子筛进行纯化，之后使用DHPC对融合蛋白进行包被。本发明制备的蛋白疫苗可用于小鼠的免疫，能够对不同血清型的两株铜绿假单胞菌PA14和PA103均产生保护效果，并诱导小鼠产生针对铜绿假单胞菌OprH蛋白的IgG抗体，该抗体能够介导骨髓巨噬细胞吞噬PA14菌株。

公开(公告)号：CN107099495A

公开(公告)日：2017-08-29

申请号：CN201710242405.X

申请日：2017-04-14

Applicant: 南开大学

Inventor： 白芳 ,  金守光 ,  靳永新 ,  刘颖 ,  李振鹏 ,  吴卫辉 ,  程志辉

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/85 ,  C12R1/385

Abstract: 本发明涉及一种用于哺乳动物细胞蛋白质递送的基因工程菌株的构建方法及其应用。构建方法是，将铜绿假单胞菌PAK菌株基因组中4种毒力因子exoS,exoT,exoY,ndk基因删除，使其对哺乳动物细胞无细胞毒性；进一步从染色体上删除抑制细菌III型分泌系统(T3SS)的popN基因，使其T3SS介导的蛋白质注入量显著提高，从而构建出工程菌株Δ5。本发明构建的工程菌株Δ5可用于对多种哺乳动物细胞系实施蛋白质递送，进行基因编辑，细胞重编程，蛋白质功能研究等工作。可实施递送的细胞类型广泛，包括人和鼠的皮肤细胞、肌细胞、肠道细胞、肝细胞、多能干细胞等。