公开(公告)号：CN114846147B

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202080076790.5

申请日：2020-11-02

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 张昊宁 ,  陈松 ,  金波 ,  徐勇刚 ,  汤传根

IPC: C12P19/14 ,  C12P19/04 ,  C07H1/06 ,  C08B37/08 ,  A61K31/737 ,  A61K35/60 ,  A61P19/02

Abstract: 本发明公开了一种低分子量硫酸软骨素及其制备方法，利用大分子硫酸软骨素为原料，经过硫酸软骨素裂解酶的降解、脱蛋白、过滤除菌及干燥等生产工艺，可得到平均分子量小于1000道尔顿的低分子硫酸软骨素，分子量分布范围窄，硫酸软骨素二糖占比为43～60％，硫酸软骨素四糖占比为30～45％，硫酸软骨素二糖和硫酸软骨素四糖含量之和大于87％，低分子量硫酸软骨素中的寡糖总含量在97％以上，蛋白的含量不超过0.5％；与普通市售的大分子硫酸软骨素相比，该产品在50～100μg/mL浓度内，对1mM双氧水损伤的软骨细胞有更明显的修复作用，修复能力强，修复率在14％～23％之间，可用于治疗关节损伤，是医药产品、保健产品、化妆品、食品等的重要原料。

公开(公告)号：CN116990402B

公开(公告)日：2024-06-25

申请号：CN202310747160.1

申请日：2023-06-25

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 吕雨婷 ,  张昊宁 ,  鲍海涛 ,  汤传根 ,  金波 ,  郭正晨

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/34 ,  B01J20/287 ,  G01N30/60 ,  G01N30/89

Abstract: 本发明涉及一种测定维生素K1注射液中异构体含量的分析方法，涉及生物医药技术领域，包括以下步骤：将维生素K1注射液与稀释剂混合，配制成供试品溶液；使用反相高效液相色谱对供试品溶液进行检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂作为色谱柱、冰醋酸水溶液‑甲醇作为流动相，其中冰醋酸水溶液的浓度为35‑45mmol/L；洗脱方式为等度洗脱；对维生素K1的色谱纯度进行测定，根据峰面积，计算维生素K1异构体的含量。本方法流动相配制方法和洗脱方式简单，省时省力，耐用性好，适合后续产品的大批量检测；维生素K1注射液异构体出峰时间快，节约了分析时间。能以687ng/ml定量限检测维生素K1注射液异构体的含量。本发明的方法专属性好、灵敏度高、准确度高。

公开(公告)号：CN116990402A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310747160.1

申请日：2023-06-25

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 吕雨婷 ,  张昊宁 ,  鲍海涛 ,  汤传根 ,  金波 ,  郭正晨

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/34 ,  B01J20/287 ,  G01N30/60 ,  G01N30/89

Abstract: 本发明涉及一种测定维生素K1注射液中异构体含量的分析方法，涉及生物医药技术领域，包括以下步骤：将维生素K1注射液与稀释剂混合，配制成供试品溶液；使用反相高效液相色谱对供试品溶液进行检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂作为色谱柱、冰醋酸水溶液‑甲醇作为流动相，其中冰醋酸水溶液的浓度为35‑45mmol/L；洗脱方式为等度洗脱；对维生素K1的色谱纯度进行测定，根据峰面积，计算维生素K1异构体的含量。本方法流动相配制方法和洗脱方式简单，省时省力，耐用性好，适合后续产品的大批量检测；维生素K1注射液异构体出峰时间快，节约了分析时间。能以6.87ng/ml定量限检测维生素K1注射液异构体的含量。本发明的方法专属性好、灵敏度高、准确度高。

公开(公告)号：CN115505035A

公开(公告)日：2022-12-23

申请号：CN202211006153.8

申请日：2022-08-22

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 杜慈 ,  吕亮 ,  刘彬 ,  范晓阳 ,  汤传根

IPC: C07K14/605 ,  C07K1/18 ,  C07K1/20 ,  C07K1/14 ,  C07K1/36

Abstract: 本发明属于纯化方法技术领域，公开了一种司美格鲁肽中间体多肽Arg34GLP‑1(9‑37)的纯化方法。本发明通过一步阳离子交换层析和一步反相层析完成了司美格鲁肽中间体多肽的纯化，最后经过冻干，获得了纯度≥99.3％的司美格鲁肽中间体多肽成品。在纯化过程中，第一步采用阳离子交换层析法主要用于减少酶切后标签蛋白含量及去除残留核酸、宿主蛋白、抗生素等非特异性杂质；第二步反相层析能够完全去除残留的标签蛋白和第一步纯化未能去除的一些和目的肽性质接近的有关杂质。另外本发明采用离子交换层析和反相层析相结合的纯化方式，在减少有机溶剂使用，缩短工艺周期的同时，有效提高了司美格鲁肽中间体多肽的纯度和收率，有利于工业化的放大生产。

公开(公告)号：CN111471669A

公开(公告)日：2020-07-31

申请号：CN201910747051.3

申请日：2019-08-14

Applicant: 江南大学 ,  美药星(南京)制药有限公司 ,  南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 康振 ,  张昊宁 ,  张琳 ,  陈松 ,  堵国成 ,  汤传根 ,  王浩

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12P19/26

Abstract: 本发明公开了一种肝素裂解酶突变体及其重组表达的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供的肝素裂解酶III有更高的催化效率和热稳定性，突变体S264F/Y490K/D321N的催化效率比原始菌株提高了1.68倍，更有利于低分子量肝素的制备。本发明还对来自变形拟杆菌来源的肝素裂解酶III进行了异源重组表达，胞内酶活可以达到4000U/L以上。

公开(公告)号：CN119462889A

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202411563952.4

申请日：2024-11-05

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 屈树晨 ,  孙玲玲 ,  陈苏苏 ,  范晓阳 ,  汤传根

IPC: C07K14/62 ,  C07K1/16 ,  C07K1/30

Abstract: 本发明公开了一种重组人胰岛素的结晶方法，属于生物医药技术领域，包括：取含有重组人胰岛素的样品，柱层析转盐，得到转盐洗脱液，随后加入纯化水后调节pH制备待结晶溶液，加入酸溶液、锌盐溶液和精氨酸，得到结晶液；调节结晶液pH值、温度，析晶得六面体晶体。本发明将纯化制备合格的含人胰岛素的洗脱液，采用层析转盐的方式制备待结晶溶液，待结晶溶液制备方式简单高效易操作；结晶液体系简单，仅需向待结晶溶液中添加酸、锌盐和精氨酸，不需要添加酚类和有机溶剂，避免化学物质残留。本发明充分利用转盐浓缩液中残留的盐和有机溶剂参与结晶反应，无需重复添加溶剂，节省试剂、缩短工艺时间。

公开(公告)号：CN117467632B

公开(公告)日：2024-09-24

申请号：CN202210889750.3

申请日：2022-07-27

Applicant: 江南大学 ,  南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 康振 ,  王阳 ,  陈松 ,  汤传根 ,  郗欣彤 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  孟俊东

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种肝素N‑磺基转移酶突变体构建方法，属于生物工程技术领域。本发明对人源的双功能酶(NCBI Reference Sequence:NP_001534.1)中的硫酸乙酰肝素N‑磺基转移酶1进行了改造，通过截短、单点突变、多点组合突变等生物技术手段，获得了能够使得稳定性和催化效率显著提升的肝素N‑磺基转移酶突变体。本发明提供的人源肝素N‑磺基转移酶突变体催化效率比人源肝素N‑磺基转移酶原始菌株提高了1.3倍，且在37℃下的稳定性也较野生型有显著提升，更有利于长时间催化获得高转化率的N‑磺酸化肝素前体。

公开(公告)号：CN115260293A

公开(公告)日：2022-11-01

申请号：CN202211005618.8

申请日：2022-08-22

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 汤传根 ,  刘彬 ,  吕亮 ,  杜慈 ,  范晓阳

IPC: C07K7/23 ,  C07K1/20 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明属于纯化方法技术领域，公开了一种醋酸加尼瑞克的纯化方法。本发明通过一步反相层析完成了醋酸加尼瑞克粗肽的纯化，再经过转盐、旋蒸、冻干获得了纯度≥99.9％，最大单杂含量≤0.05％，乙酸根含量为7.10‑10.80％，TFA离子含量＜0.05％，氯离子含量＜0.05％、硫酸根含量＜0.02％和磷酸根含量＜0.05％的醋酸加尼瑞克精肽样品。在反相层析中采用乙酸盐‑TFA缓冲液，弥补了离子配对剂本身没有缓冲能力的缺点，解决了离子配对剂体系重现性差的问题，使制备峰形稳定，提高了杂质去除能力。且纯化、转盐流动相体系中均使用到乙酸盐和乙酸，使用物料单一，减少了其他离子的引入，缩短了转盐工艺的周期，有利于工业化的放大生产。

公开(公告)号：CN114292338A

公开(公告)日：2022-04-08

申请号：CN202111664146.2

申请日：2021-12-31

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 王璟 ,  汤传根 ,  张腾 ,  范晓阳 ,  陈松 ,  金波

IPC: C07K19/00 ,  C07K14/605 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N15/81 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白及其制备司美格鲁肽中间体多肽的方法，属于基因工程及多肽制备技术领域。所述融合蛋白包括一段融合肽，蛋白酶酶切位点和目的主分子序列。通过优化融合肽序列，改变蛋白等电点及亲水性等性质，有效提高了融合蛋白的表达量，最高可达13.1g/L；同时，也改善了融合蛋白的性状，利于后续提取、酶切及纯化工艺的开发，酶切后中间体多肽的量为3.62g/L。从源头降低了司美格鲁肽中间体多肽Arg34GLP‑1(9‑37)的生产成本，有利于工业化放大，适用于工业化生产。

公开(公告)号：CN111741963A

公开(公告)日：2020-10-02

申请号：CN201980013421.9

申请日：2019-11-01

Applicant: 南京汉欣医药科技有限公司

Inventor： 王印 ,  崔怀言 ,  梁旭光 ,  李德耿 ,  徐勇刚 ,  汤传根 ,  陈松 ,  张昊宁

IPC: C07H13/04 ,  C07H5/06 ,  C07H1/00 ,  C08B37/08 ,  A61P19/02 ,  C12P19/26 ,  A23L33/125 ,  A61K8/73 ,  A61K8/60 ,  A61Q19/00

Abstract: 本发明公开了一种低分子量硫酸软骨素及其制备方法，利用大分子硫酸软骨素为原料，经过硫酸软骨素裂解酶的降解、脱蛋白、过滤除菌及干燥等生产工艺，可得到平均分子量小于1000道尔顿的低分子硫酸软骨素，分子量分布范围窄，硫酸软骨素二糖占比为43～60％，硫酸软骨素四糖占比为30～45％，硫酸软骨素二糖和硫酸软骨素四糖含量之和大于87％，低分子量硫酸软骨素中的寡糖总含量在97％以上，蛋白的含量不超过0.5％；与普通市售的大分子硫酸软骨素相比，该产品在50～100μg/mL浓度内，对1mM双氧水损伤的软骨细胞有更明显的修复作用，修复能力强，修复率在14％～23％之间，可用于治疗关节损伤，是医药产品、保健产品、化妆品、食品等的重要原料。