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公开(公告)号：CN106995829B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201710332977.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种酶法转化淫羊藿总黄酮制备淫羊藿苷元的方法，由耐热α‑L‑鼠李糖苷酶和耐热β‑葡萄糖苷酶组成的双酶体系协同转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷生成淫羊藿苷元。本发明可将淫羊藿总黄酮中多组分黄酮类化合物（淫羊藿苷、朝霍定A、朝霍定B及朝霍定C等）几乎完全转化为目的产物；最适作用温度高，使得底物及中间产物都具有良好溶解性，不需要助溶剂；酶解时间短，得率高。本发明制备得到的淫羊藿苷元针对肝癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌的增殖抑制作用显著高于转化前的淫羊藿总黄酮各单体。
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公开(公告)号：CN106086046B
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201610405275.2
申请日：2016-06-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用，包括经优化的拟南芥糖基转移酶基因78D2，蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB，其核酸序列分别如SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示。该重组菌能高效表达全基因优化的糖基转移酶基因op78D2，该酶能高效、特异性的在山萘酚3位羟基进行糖基化；同时通过强化重组菌UDP‑glucose的合成途径，使重组菌能高效供应UDP‑glucose，解除重组菌合成紫云英苷的瓶颈。最终通过发酵条件的优化，实现了紫云英苷的高效合成。
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公开(公告)号：CN104328098B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201410510836.6
申请日：2014-09-28
Applicant: 江苏康缘药业股份有限公司 , 南京林业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术及生物医药领域，具体涉及一种β‑葡萄糖苷酶及其制备方法与应用，尤其是应用于酶法转化制备人参皂苷20(S)‑Rg3的应用。本发明所述β‑葡萄糖苷酶能耐受高温，在70℃下保温3h酶活力几乎不变；本发明所述β‑葡萄糖苷酶对人参皂苷Rb1的转化能力强，本发明所述β‑葡萄糖苷酶与人参皂苷Rb1孵育60min，人参皂苷Rb1几乎完全转化为人参皂苷20(S)‑Rg3；本发明所述制备人参皂苷20(S)‑Rg3的方法酶促转化反应中间产物少，转化后产物人参皂苷20(S)‑Rg3纯度高。
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公开(公告)号：CN107384896A
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201710685211.7
申请日：2017-08-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种制备稀有人参皂苷的酶组合物及其应用，应用于转化多组分人参皂苷制备人参皂苷C-K等稀有人参皂苷。其特征在于一种嗜热菌来源能够一次性切除人参皂苷母核3位上两个糖基的β-葡萄糖苷酶，获得稀有组分C-Y、C-Mc和C-Mx，其摩尔转化率均高于96%。再一步，通过3种特异性的糖苷水解酶再分别切除前述三种产物各自20位外侧的阿拉伯吡喃糖、阿拉伯呋喃糖和木糖，获得最终产物稀有人参皂苷C-K，摩尔转化率也均高于98%。本发明提供了一种新的稀有人参皂苷制备路线，并且能够同时高效转化多组分人参皂苷Rb2、Rc和 Rb3获得稀有人参皂苷C-K。
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公开(公告)号：CN104762281B
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201510102927.0
申请日：2015-03-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种α‑鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α‑鼠李糖苷的黄酮类化合物或萜类香气前体化合物中的鼠李糖等领域中具有广泛的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103031290B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201210541293.5
申请日：2012-12-14
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种耐高糖的β-葡萄糖苷酶Bgl4及其表达基因和应用，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明首次克隆并重组表达了黑曲霉菌株（Aspergillusniger）耐高糖β-葡萄糖苷酶Bgl4的基因，重组酶Bgl4的耐葡萄糖系数Ki为2mol/L。
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公开(公告)号：CN106995829A
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201710332977.7
申请日：2017-05-12
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P17/06 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12Y302/01021 , C12Y302/0104
Abstract: 一种酶法转化淫羊藿总黄酮制备淫羊藿苷元的方法，由耐热α‑L‑鼠李糖苷酶和耐热β‑葡萄糖苷酶组成的双酶体系协同转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷生成淫羊藿苷元。本发明可将淫羊藿总黄酮中多组分黄酮类化合物（淫羊藿苷、朝霍定A、朝霍定B及朝霍定C等）几乎完全转化为目的产物；最适作用温度高，使得底物及中间产物都具有良好溶解性，不需要助溶剂；酶解时间短，得率高。本发明制备得到的淫羊藿苷元针对肝癌、肺癌、结肠癌和乳腺癌的增殖抑制作用显著高于转化前的淫羊藿总黄酮各单体。
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公开(公告)号：CN104805064A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510070692.1
申请日：2015-02-10
Applicant: 南京林业大学 , 广元贝尔天然生物活性物质工程技术研究院 , 四川金贝尔生态科技开发有限公司
Abstract: 耐高温黄酮苷元转化酶及其应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的耐高温黄酮苷元转化酶热稳定性好，能耐受高温，对不同母核类型及不同糖苷键类型的黄酮糖苷都具有较强的催化转化能力，本发明提供的耐高温黄酮苷元转化酶与典型的黄酮糖苷(异槲皮素、紫云英苷、大豆苷、染木苷)孵育一定时间后经检测，黄酮糖苷几乎完全转化为相应的黄酮苷元(槲皮素、山奈酚、大豆苷元和染木素)。
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公开(公告)号：CN104611313A
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201510026295.4
申请日：2015-01-19
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/2445 , C12P33/20 , C12Y302/01021
Abstract: 一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述β-葡萄糖苷酶热稳定性优异，能耐受高温；本发明所述β-葡萄糖苷酶具有较高β-1,6-糖苷键水解能力同时具有较强的α-1，6-阿拉伯吡喃糖苷键水解能力，对人参皂苷Rb1和Rb2的转化能力强，本发明所述β-葡萄糖苷酶与人参皂苷Rb1和Rb2孵育一定时间后，检测到人参皂苷Rb1或Rb2几乎完全转化为人参皂苷Rd；本发明所述TPEBGL1的制备方法不需要诱导剂IPTG即可高效表达。
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公开(公告)号：CN105695552A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610219039.1
申请日：2016-04-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P33/20 , C12N9/2402 , C12N9/2445 , C12Y302/01021 , C12Y302/0104
Abstract: 一种酶法制备稀有人参皂苷Rh1的方法，利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和黑曲霉(Aspergillus niger)的α-鼠李糖苷酶，降解人参皂苷Re生产Rh1。本发明通过酶法催化人参皂苷Re生产稀有人参皂苷Rh1，生成的稀有人参皂苷Rh1纯度高，没有副产物。酶法转化的效率高，摩尔得率达到95％。
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