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公开(公告)号：CN109536565A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811562945.7
申请日：2018-12-20
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用热解糖高温厌氧菌和产琥珀酸放线杆菌混菌发酵生产丁二酸的方法，包括以下步骤：（1）将活化的热解糖高温厌氧菌接种到含有木聚糖的发酵培养基中进行发酵，得到发酵液；（2）将活化的琥珀酸放线杆菌接种到步骤（1）得到的发酵液中，发酵生产丁二酸。当热解糖高温厌氧菌M5培养了48 h时加入产琥珀酸放线杆菌菌泥，丁二酸产量最高，达到43.10 g/L，该方法是目前利用木聚糖为唯一碳源时混菌发酵得到的最高丁二酸产量，降低了工业生产丁二酸的底物成本，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN114317623B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210051005.1
申请日：2022-01-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及基于脂肪酶大肠杆菌表面展示菌株的丁酸丁酯合成方法，在产丁酸丁酯菌株发酵阶段，加入脂肪酶表面展示大肠杆菌的发酵液或同体积脂肪酶表面展示大肠杆菌发酵液离心后收集所得菌体沉淀；所述脂肪酶表面展示大肠杆菌构建方式为：将脂肪酶lipA的编码基因和锚定蛋白estA的编码基因克隆到表达载体上，构建得到的重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，挑选阳性克隆，即所述脂肪酶表面展示大肠杆菌。本发明的合成方法解决了解决丁酸丁酯生物合成方法对外源脂肪酶依赖造成成本过高的问题。
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公开(公告)号：CN115197978A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202211031788.3
申请日：2022-08-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物发酵胞外合成乙酸丁酯的方法，将活化的丙酮丁醇梭菌接种到发酵培养基中进行发酵；发酵1～3天后，加入脂肪酶、萃取剂和表面活性剂继续发酵；在120h添加15g/L乙酸钠，乙酸丁酯浓度达到7.3g/L；或者在丙酮丁醇梭菌发酵96h时以10％的接种比例加入乙酸生产菌株产琥珀酸放线杆菌ΔpflA时，乙酸丁酯产量最高，达到2.2g/L；引入海藻酸钠包埋法固定ΔpflA，最高合成了2.86g/L乙酸丁酯，成功消除了前体物乙酸钠的外源添加，大大降低了成本。与传统化学法生产的乙酸丁酯相比，生物法所得的天然乙酸丁酯更加适合应用于食品及化妆品等行业，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN107760753B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201711285336.7
申请日：2017-12-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用热解糖高温厌氧菌和丙酮丁醇梭菌共培养发酵生产丁醇的方法，包括以下步骤：(1)将活化的热解糖高温厌氧菌接种到含有木聚糖的发酵培养基中进行发酵，得到发酵液；(2)将活化的丙酮丁醇梭菌接种到步骤(1)得到的发酵液中，发酵生产丁醇。当热解糖高温厌氧菌M5培养了60h时加入丙酮丁醇梭菌菌泥，丁醇产量最高，达到8.34g/L，这也是目前利用木聚糖为唯一碳源时共培养得到的最高丁醇产量。该方法降低了工业生产丁醇的成本，同时解决了热解糖高温厌氧菌能利用半纤维素却丁醇产量低的问题，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN107760753A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201711285336.7
申请日：2017-12-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用热解糖高温厌氧菌和丙酮丁醇梭菌共培养发酵生产丁醇的方法，包括以下步骤：(1)将活化的热解糖高温厌氧菌接种到含有木聚糖的发酵培养基中进行发酵，得到发酵液；(2)将活化的丙酮丁醇梭菌接种到步骤(1)得到的发酵液中，发酵生产丁醇。当热解糖高温厌氧菌M5培养了60h时加入丙酮丁醇梭菌菌泥，丁醇产量最高，达到8.34g/L，这也是目前利用木聚糖为唯一碳源时共培养得到的最高丁醇产量。该方法降低了工业生产丁醇的成本，同时解决了热解糖高温厌氧菌能利用半纤维素却丁醇产量低的问题，具有重要的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106676052A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201710168862.9
申请日：2017-03-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种产丁二酸大肠杆菌的构建方法及其应用，以缺乏乳酸脱氢酶基因、丙酮酸甲酸裂解酶基因活性且磷酸转移酶系统的ptsG染色体发生自发突变的大肠杆菌为出发菌株，构建含有谷氨酸棒状杆菌NCgl2130基因的重组大肠杆菌。本发明的方法构建的重组大肠杆菌对丁二酸的分泌能力明显提高，整个过程菌体生长、耗糖及丁二酸生产能力明显增强。本发明的方法为强化大肠杆菌转运丁二酸能力提供了一个新的优良转运蛋白，为强化丁二酸分泌性能提供了一种新途径。
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公开(公告)号：CN115287308A
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN202211136016.6
申请日：2022-09-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用混菌体系实现木质纤维素从头合成丁酸丁酯的方法，包括将活化的棘孢木霉接种至以木质纤维素为碳源的发酵培养基中好氧发酵48‑120 h；将活化的丙酮丁醇梭菌和酪丁酸梭菌接种至好氧发酵的发酵液中并转厌氧发酵；向厌氧发酵的发酵液中添加脂肪酶表面展示大肠杆菌的发酵液或菌体沉淀，合成丁酸丁酯，发酵完毕后萃取得到丁酸丁酯产品。该方法是目前利用微晶纤维素为唯一碳源时混菌发酵得到的最高丁酸丁酯产量，同时，该方法还可以应用到直接以木质纤维素为原料合成丁酸丁酯的发酵过程中，在以玉米芯为底物的发酵培养基中进行发酵，可产生1.35 g/L的丁酸丁酯，极大降低了工业生产丁酸丁酯的底物成本，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN111206057B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202010096092.3
申请日：2020-02-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物混菌发酵与原位萃取相结合生产丁酸丁酯的方法，包括以下步骤：（1）将活化的丙酮丁醇梭菌和酪丁酸梭菌接种到发酵培养基中进行发酵；（2）发酵24 h后，加入脂肪酶和萃取剂继续发酵；本方法丁酸丁酯的产量最高达到16.77 g/L，收率为0.30 g/g。与传统的化学法生产的丁酸丁酯相比，生物法所得的天然丁酸丁酯更加适合应用于食品及化妆品等行业，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN114317623A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210051005.1
申请日：2022-01-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及基于脂肪酶大肠杆菌表面展示菌株的丁酸丁酯合成方法，在产丁酸丁酯菌株发酵阶段，加入脂肪酶表面展示大肠杆菌的发酵液或同体积脂肪酶表面展示大肠杆菌发酵液离心后收集所得菌体沉淀；所述脂肪酶表面展示大肠杆菌构建方式为：将脂肪酶lipA的编码基因和锚定蛋白estA的编码基因克隆到表达载体上，构建得到的重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，挑选阳性克隆，即所述脂肪酶表面展示大肠杆菌。本发明的合成方法解决了解决丁酸丁酯生物合成方法对外源脂肪酶依赖造成成本过高的问题。
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公开(公告)号：CN111206057A
公开(公告)日：2020-05-29
申请号：CN202010096092.3
申请日：2020-02-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物混菌发酵与原位萃取相结合生产丁酸丁酯的方法，包括以下步骤：（1）将活化的丙酮丁醇梭菌和酪丁酸梭菌接种到发酵培养基中进行发酵；（2）发酵24 h后，加入脂肪酶和萃取剂继续发酵；本方法丁酸丁酯的产量最高达到16.77 g/L，收率为0.30 g/g。与传统的化学法生产的丁酸丁酯相比，生物法所得的天然丁酸丁酯更加适合应用于食品及化妆品等行业，具有广阔的市场前景。
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