公开(公告)号：CN118374481A

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202410502220.8

申请日：2024-04-24

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 章文明 ,  胡海波 ,  姜岷 ,  信丰学 ,  王燕霞 ,  蒋羽佳 ,  姜万奎

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/24 ,  C12P19/02 ,  C12R1/125 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变型及其应用。所述突变型DAEase‑I66V是在序列如SEQ ID NO：1所示的来源于根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列第66位氨基酸由异亮氨酸I突变为缬氨酸V所得到的。以400 g/L D‑果糖为底物，D‑阿洛酮糖产量达到88.2 g/L，较原始菌株活性提升约11%。突变酶的酶活、稳定性以及RMSD、RMSF、SASA等分子动力学参数结果显示，其稳定性和活性较原始菌株DAEase都有提升。

公开(公告)号：CN115820761A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211503997.3

申请日：2022-11-28

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 章文明 ,  胡海波 ,  姜岷 ,  信丰学 ,  蒋羽佳 ,  姜万奎 ,  万子健

IPC: C12P17/06 ,  C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生物法催化合成D‑葡萄糖醛酸的方法。利用重组大肠杆菌PET‑28（+）‑Mm‑MIOX表达来自小鼠（Marmota monax）的肌醇加氧酶，反复冻融后加入底物肌醇进行全细胞催化反应，得D‑（+）‑葡萄糖醛酸。其中，所述的酶包括来自小鼠（Marmota monax）的肌醇加氧酶Mm‑MIOX，诱导产酶的诱导剂为0.1M的异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷，通过反复的冻融可以有效地提高底物肌醇的转化率，从而提高D‑葡萄糖醛酸的产量。本发明方法原料利用率高，D‑葡萄糖醛酸转化率高，步骤简捷，生产成本低，污染小，对环境影响小，可实现D‑葡萄糖醛酸的规模化生产。经重组大肠杆菌生产的肌醇氧化酶，以8g/L肌醇为底物，全细胞催化反应的D‑葡萄糖醛酸产量能达到5.62g/L，转化率高达86.3%。

公开(公告)号：CN117343976A

公开(公告)日：2024-01-05

申请号：CN202310956545.9

申请日：2023-08-01

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 章文明 ,  胡海波 ,  姜岷 ,  信丰学 ,  王燕霞 ,  蒋羽佳 ,  姜万奎 ,  陈帅强 ,  钱刘骏

IPC: C12P19/44 ,  C12P19/24 ,  C12P19/18 ,  C12P19/02 ,  C12N9/10 ,  C12N9/90 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开一种双酶级联联产甘油葡萄糖苷和D‑阿洛酮糖的方法，以蔗糖、甘油作为共底物，同时加入蔗糖磷酸化酶、D阿洛酮糖‑3‑差向异构酶共同催化反应，获得甘油葡萄糖苷和D‑阿洛酮糖。本发明首次实现从蔗糖到D‑阿洛酮糖的多酶级联反应，催化更为经济的蔗糖和甘油为底物生产D‑阿洛酮糖，原料利用率高，D‑阿洛酮糖转化率高，步骤简捷，生产成本低，污染小，对环境影响小，可实现D‑阿洛酮糖的规模化生产。经重组大肠杆菌生产的蔗糖磷酸化酶和D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶，以蔗糖与甘油为底物，超声破碎后双酶级联催化反应的甘油葡萄糖苷产量289.8g/L，D‑阿洛酮糖产量93.4g/L，甘油转化率高达75.6%。