公开(公告)号：CN118853620A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202310462116.6

申请日：2023-04-26

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 贾红华 ,  李艳 ,  张婷 ,  林磊 ,  田少伟 ,  唐可馨

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/18 ,  C12P19/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种基于祖先序列重建的糖基转移酶及其应用，所述糖基转移酶基因核苷酸序列全长1485碱基，编码495个氨基酸，其核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该基因能在大肠杆菌表达体系中高效的可溶性表达，由该基因表达的重组酶酶学性质为：以R’‑苯乙醇为底物，该酶的最适反应温度为55℃，最适pH为10.5，并且在55℃以下和pH 7‑11的范围内具有良好的稳定性，在8 h内能维持90%以上的酶活性。本发明还提供了两株突变株M1、M2，活性分别提高了4.68、5.44倍。使用蔗糖合酶McSusy突变体S31D偶联糖基转移酶UGTAn85突变体M2经分批补料反应以2‑苯乙醇为底物最高可生产45.8 g/L 2‑苯乙醇糖苷、以酪醇为底物可生产51.49 g/L红景天苷。