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公开(公告)号：CN103911333B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201410152517.2
申请日：2014-04-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株产L-苯丙氨酸菌株，其分类命名为大肠杆菌WR1001（Escherichia coliWR1001），已于2013年7月7日保存于中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号：CCTCC NO: M 2013319。本发明还提供该菌株的诱变筛选方法及利用该菌株生产L-苯丙氨酸的方法。该菌株通过发酵产L-苯丙氨酸高达15g/L，并且通过8次传代后，含量无显著差别，遗传稳定性较好。
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公开(公告)号：CN104498519A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410799948.8
申请日：2014-12-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及生物催化技术领域，特别涉及一种表达重组载体、含其的基因工程菌及利用其全细胞转化生产1,5-戊二胺的方法。本发明公开了一种重组表达载体，其含有表达cadB的核酸序列和表达赖氨酸脱羧酶cadA的核酸序列，上述核酸序列各自受一单独启动子调控转录，其特征在于表达cadB的核酸序列的5’端融合周质分泌信号肽编码序列。本发明所得基因工程菌菌体活性高，初步研究发现全细胞转化343 g/l底物，1,5-戊二胺含量达到221 g/l，远优于现有技术报道。
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公开(公告)号：CN103911333A
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201410152517.2
申请日：2014-04-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株产L-苯丙氨酸菌株，其分类命名为大肠杆菌WR1001（EscherichiacoliWR1001），已于2013年7月7日保存于中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号：CCTCCNO:M2013319。本发明还提供该菌株的诱变筛选方法及利用该菌株生产L-苯丙氨酸的方法。该菌株通过发酵产L-苯丙氨酸高达15g/L，并且通过8次传代后，含量无显著差别，遗传稳定性较好。
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公开(公告)号：CN102643774B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210143173.X
申请日：2012-05-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BA306，其保藏编号为CCTCC NO：M2012103。其构建过程主要包括失活或敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和磷酸转运系统中的ptsG基因，并过量共表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶和烟酸磷酸核糖转移酶，使重组大肠杆菌能够高效利用葡萄糖、木糖、阿拉伯糖及果糖等单糖，同时高效利用各种比例混合糖以及纤维素水解液生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。
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公开(公告)号：CN102643770A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210138292.6
申请日：2012-05-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌EscherichiacoliBER108，其保藏号登记号为：CCTCC NO.M2012068。本发明还公开了上述大肠杆菌在丁二酸发酵生产中的应用。本发明采用等离子体诱变大肠杆菌，利用合成培养基平板筛选出能够在厌氧条件下快速生长的菌株，该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源和葡萄糖生长，并积累丁二酸。在摇瓶发酵中，以碱式碳酸镁作为PH调节剂，发酵72h，该菌株OD600达到了7.6，丁二酸产量达到11.2g/L，相对于出发菌株，丁二酸产量提高了近3倍。由于原始出发菌株在纯厌氧，合成培养基条件下，生长非常慢，产酸量也很低，因此该突变株BER108具有重大的社会意义和经济价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104531784A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201510013436.9
申请日：2015-01-12
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/46 , C12P2201/00
Abstract: 一种电化学装置利用玉米芯水解液的方法，包括以下步骤：将玉米芯加到稀硫酸中灭菌后，经活性炭脱色、抽滤、旋蒸处理后得玉米芯水解液；配种子培养基、阴极液、阳极液、种子洗液、电子中介体、DTT；对所配试剂、生物电化学反应器以及血清瓶灭菌处理；取灭菌后的血清瓶，接入种子培养基，通入CO2后再接入产琥珀酸放线杆菌培养作为发酵菌种；将发酵菌种离心去上清后，洗涤再离心得菌体，将菌体接入阴极液，再将电子中介体和玉米芯水解液加入阴极液中混匀，并接入到生物电化学反应器的阴极腔，再将DTT接入到阳极液混匀并加入阳极腔；向阴极腔内通入化学CO2，37℃下发酵得产品。本发明方法简单，产量高，适合工业化操作。
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公开(公告)号：CN106011216B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201610609543.2
申请日：2016-07-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种微生物联合培养生产1,5‑戊二胺的方法。该方法包括：配种子培养基、发酵培养基、葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液、乳糖诱导液以及赖氨酸溶液；对发酵罐，步骤1中的培养基以及三角瓶灭菌，其中步骤1中发酵培养基中的葡萄糖单独灭菌；取三角烧瓶接入种子培养基，分别接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌培养后作为发酵菌种；向装有发酵培养基的发酵罐中通入无菌空气或纯O2，接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌作为出发菌株，并加入葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液和乳糖诱导液，控制菌体比生长速率发酵；厌氧转化阶段，控制葡萄糖浓度和pH即得产物1,5‑戊二胺的方法。本发明方法简单易行，节约成本。
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公开(公告)号：CN104004798B
公开(公告)日：2016-11-30
申请号：CN201410277338.1
申请日：2014-06-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种高效、安全的微生物发酵生产L‑苯丙氨酸方法，属于生物工程技术领域。通过硫酸铵浓度和有机氮源种类优化，以及多阶段L‑酪氨酸指数补料方法，显著提高发酵液中L‑苯丙氨酸的浓度。L‑苯丙氨酸产量达到56 g/L左右。同时，硫酸铵、酵母粉和L‑酪氨酸用量较普通发酵方法相比明显减少，大大降低了L‑苯丙氨酸的生产成本。
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公开(公告)号：CN106011216A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610609543.2
申请日：2016-07-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种微生物联合培养生产1,5‑戊二胺的方法。该方法包括：配种子培养基、发酵培养基、葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液、乳糖诱导液以及赖氨酸溶液；对发酵罐，步骤1中的培养基以及三角瓶灭菌，其中步骤1中发酵培养基中的葡萄糖单独灭菌；取三角烧瓶接入种子培养基，分别接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌培养后作为发酵菌种；向装有发酵培养基的发酵罐中通入无菌空气或纯O2，接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌作为出发菌株，并加入葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液和乳糖诱导液，控制菌体比生长速率发酵；厌氧转化阶段，控制葡萄糖浓度和pH即得产物1,5‑戊二胺的方法。本发明方法简单易行，节约成本。
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公开(公告)号：CN104004798A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410277338.1
申请日：2014-06-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种高效、安全的微生物发酵生产L-苯丙氨酸方法，属于生物工程技术领域。通过硫酸铵浓度和有机氮源种类优化，以及多阶段L-酪氨酸指数补料方法，显著提高发酵液中L-苯丙氨酸的浓度。L-苯丙氨酸产量达到56g/L左右。同时，硫酸铵、酵母粉和L-酪氨酸用量较普通发酵方法相比明显减少，大大降低了L-苯丙氨酸的生产成本。
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