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公开(公告)号：CN103320367B
公开(公告)日：2014-12-31
申请号：CN201310288669.0
申请日：2013-07-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株能够在纯厌氧条件下利用廉价合成培养基同步消耗木质纤维素水解液主要成分木糖和葡萄糖合成丁二酸的大肠杆菌及其筛选方法和用途，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）BA405，其保藏号登记号为：CCTCCNO：M2013160。本发明采用常压低温等离子体诱变大肠杆菌，利用合成培养基平板筛选出能够在厌氧条件下快速生长的菌株，该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源同步消耗木质纤维素水解液主要成分木糖和葡萄糖生长并积累丁二酸。本发明实现了利用无机氮源同步消耗木质纤维素水解液主要成分木糖和葡萄糖生长并积累丁二酸。由于原始出发菌株在纯厌氧，合成培养基条件下，生长非常慢，产酸量也很低，因此该突变株BA405具有重大的社会意义和经济价值。
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公开(公告)号：CN102321682B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201110269332.6
申请日：2011-09-13
Applicant: 南京工业大学
CPC classification number: C12P7/46 , C07C51/412 , C07C51/43 , C07C51/44 , C07C55/10
Abstract: 本发明属于生物化工领域，涉及一种发酵丁二酸分离过程水循环利用的方法。本发明将分离过程水用于E.coliAFP111的有氧生长和厌氧发酵生产丁二酸，最终产物浓度为55g/L，收率达91.6%，和用自来水配制的培养基发酵结果相比，丁二酸浓度提高8.5%，生产强度提高8.46%。本发明突出的优点是回收利用了丁二酸分离过程中的蒸发水，实现了丁二酸工业化生产过程中的水循环利用，对环境友好，同时丁二酸分离过程中产生的蒸发水含有少量的乙酸和甲酸等有机酸，将其用于菌体的有氧生长阶段，蒸发水中含有的少量有机酸可作为糖异生碳源提高了细胞内一些关键酶的酶活，从而有利于菌体的厌氧发酵产酸。
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公开(公告)号：CN102643775A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210143174.4
申请日：2012-05-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BA305，其保藏号编号为CCTCC NO：M2012102。其构建过程主要包括失活或敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和磷酸转运系统中的ptsG基因，并过量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶，使重组大肠杆菌能够高效利用葡萄糖、木糖、阿拉伯糖及果糖等单糖，同时高效利用各种比例混合糖以及纤维素水解液生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。
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公开(公告)号：CN103320367A
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201310288669.0
申请日：2013-07-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株能够在纯厌氧条件下利用廉价合成培养基同步消耗木质纤维素水解液主要成分木糖和葡萄糖合成丁二酸的大肠杆菌及其筛选方法和用途，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）BA405，其保藏号登记号为：CCTCCNO：M2013160。本发明采用常压低温等离子体诱变大肠杆菌，利用合成培养基平板筛选出能够在厌氧条件下快速生长的菌株，该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源同步消耗木质纤维素水解液主要成分木糖和葡萄糖生长并积累丁二酸。本发明实现了利用无机氮源同步消耗木质纤维素水解液主要成分木糖和葡萄糖生长并积累丁二酸。由于原始出发菌株在纯厌氧，合成培养基条件下，生长非常慢，产酸量也很低，因此该突变株BA405具有重大的社会意义和经济价值。
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公开(公告)号：CN102604880A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210096712.9
申请日：2012-04-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法。具体是高效利用葡萄糖产丁二酸基因工程菌株EscherichiacoliBA103菌株及其构建方法及其产丁二酸的方法。通过表达外源丙酮酸羧化酶，使重组大肠杆菌能够利用葡萄糖代谢生长，大幅度提高丁二酸的得率及生产强度，减少副产物丙酮酸的生成。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102399738A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201110380396.3
申请日：2011-11-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法，具体是一株高效利用木糖生长并产丁二酸重组菌株及其利用该菌株发酵生产丁二酸的方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌BA204，其保藏号登记号为CCTCCNO：M2011207。其构建过程主要包括失活或敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，并过量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶，使重组大肠杆菌能够利用木糖代谢生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。
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公开(公告)号：CN102352382A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110309507.1
申请日：2011-10-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种两阶段发酵生产苹果酸的方法。本发明的技术要点在于种子培养、两阶段发酵方法利用埃希氏菌属大肠埃希氏菌EscherichiacoliJM127（CGMCCNo.2300）发酵的过程：有氧发酵阶段提高菌体生物量，再厌氧发酵阶段发酵产苹果酸；其特征在于在有氧阶段添加乙酸盐。对于分子改造后埃希氏菌属大肠埃希氏菌EscherichiacoliJM127耗糖能力下降，限制了产酸能力的问题，采用了发酵调控的手段得以解决，即在有氧阶段补加乙酸盐为唯一碳源进行连续诱导，使其耗糖能力提高，加强了发酵产酸的能力，发酵结束对苹果酸的积累有明显的作用。
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公开(公告)号：CN102296082A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110200742.5
申请日：2011-07-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及利用木糖代谢产丁二酸大肠杆菌基因工程菌的构建方法及其发酵生产丁二酸的方法。本发明通过分子生物学手段改造大肠杆菌的ATP生物合成途径，过量表达与该途径有关的酶的活性，有效的提高了大肠杆菌胞内ATP的总量，使重组大肠杆菌能够利用木糖代谢生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。
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公开(公告)号：CN103451126B
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201310279778.6
申请日：2013-07-04
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株高浓度铵根离子耐受型产丁二酸的大肠杆菌，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BEW308，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2013157。本发明还公开了上述大肠杆菌在丁二酸发酵生产中的应用。本发明采用等离子体诱变大肠杆菌，利用含有高浓度铵根离子浓度的合成培养基平板筛选出能够在厌氧条件下耐受高浓度铵根离子生长的菌体，该菌株可以在厌氧条件下，耐受高浓度的铵根离子，并积累丁二酸。在厌氧摇瓶中，72h菌体密度达到了OD600=5.1，丁二酸产量为20.3g/L，而原始出发菌株在该条件生长极其缓慢，72h菌体OD600仅为0.45，产酸量为3.96g/L。相对于出发菌株，丁二酸产量提高5倍。因此该突变株BEW308具有重大的社会意义和经济价值。
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公开(公告)号：CN104232553A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410442254.9
申请日：2014-09-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株能在低pH值下产丁二酸基因工程菌菌株，其分类命名为大肠埃希氏菌BA601（EscherichiacoliBA601），其保藏号编号为CCTCCNO：M2014210。本发明还公开了该菌在产丁二酸的方法。本发明以缺乏乳酸脱氢酶(LDH)基因，丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)基因活性和磷酸转移酶系统的ptsG自发突变的大肠杆菌AFP111为出发菌株，过量表达其耐酸基因gadBC。这种通过分子生物学及微生物驯化手段，使原先不能在低pH(pH5.6)条件下生长并发酵产酸的大肠杆菌AFP111能够高效利用葡萄糖产丁二酸的方法未见公开，而这种应用将大大推进丁二酸产业的进步和发展。
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