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公开(公告)号:CN113355358B
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN202110673143.9
申请日:2021-06-17
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12N15/864 , C12N15/113 , A61K48/00 , A61P9/04
Abstract: 本发明涉及一种血清9型重组腺相关病毒复合剂的制备方法,首先分别设计合成两端带有EcoR I与Hind III两个酶切位点的目的基因片段,构建含有hsa‑mir‑21‑5p的重组穿梭质粒和含有hsa‑miR‑128‑3p及hsa‑miR‑221‑3p串联序列的重组穿梭质粒,然后分别制备过表达hsa‑miR‑21‑5p序列的重组腺相关病毒和过表达hsa‑miR‑128‑3p及hsa‑miR‑221‑3p串联序列的腺相关病毒,等体积混合制成复合剂。经实验证明,该复合剂能靶向PI3KR1,抑制PI3K信号通路,进而减少心肌肥大标志基因ANP和BNP的表达,为防治病理性心肌细胞肥大提供了新的治疗药物。
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公开(公告)号:CN111394305A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010269310.9
申请日:2020-04-08
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/073 , A61K35/50 , A61P9/00
Abstract: 本发明涉及一种人羊膜间充质干细胞来源的细胞外囊泡,制备方法为:分离培养获得人羊膜间充质干细胞后,培养并进行传代扩增,培养第3-5代人羊膜间充质干细胞,密度达到70%-80%时弃去培养基,用PBS洗涤后换用含5%无细胞外囊泡的胎牛血清的α-MEM(不含酚红)培养液,继续培养48h后收集细胞培养上清,最后通过梯度及高速离心制备得到细胞外囊泡。该细胞外囊泡可通过携带的miRNAs21-5p/128-3p/221-3p,直接靶向结合肥大的心肌细胞内的PIK3R1 mRNA的3’-UTR区,抑制PI3K/Akt通路,因此可用于制备防治病理性心肌细胞肥大药物。
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公开(公告)号:CN108486241A
公开(公告)日:2018-09-04
申请号:CN201810205531.2
申请日:2018-03-13
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及用于诊断复发性流产的血清信使核糖核酸生物标志物、引物组及应用和试剂盒。所述血清信使核糖核酸生物标志物包括:与SEQ ID NO:1所示核苷酸序列具有90%以上同源性的第一mRNA、与SEQ ID NO:2所示核苷酸序列具有90%以上同源性的第二mRNA和与SEQ ID NO:3所示核苷酸序列具有90%以上同源性的第三mRNA中的至少一种。血清mRNA是新颖的生物标志物,不仅稳定、微创、易于检测,而且定量精确,将大大提高复发性流产诊断的敏感性和特异性。
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公开(公告)号:CN107744526A
公开(公告)日:2018-03-02
申请号:CN201711033952.3
申请日:2017-10-30
Applicant: 南京医科大学
CPC classification number: A61K35/50 , A61K8/99 , A61K9/19 , A61Q19/08 , C12N5/0668 , C12N2500/84 , C12N2501/91
Abstract: 本发明公开了一种羊干素及其制备方法和应用,并公开了其制剂冻干粉的制备方法,该羊干素是通过从人胎盘羊膜组织中分离培养羊膜间充质干细胞,用人血小板裂解液培养扩增,再通过收集人羊膜间充质干细胞的培养上清,浓缩后收集制得,解决了AMSCs细胞倍增时间长和多分化潜能差的问题,可以对羊干素活性成分定性、定量分析,可以提高羊干素中的活性成分如抗氧化剂和多种生长因子等,且使其活性成分避免降解。动物实验和临床试验结果表明,本技术制备的羊干素可用于延缓衰老、防治骨质疏松和皮肤衰老、促进皮肤创伤愈合。
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公开(公告)号:CN108486241B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN201810205531.2
申请日:2018-03-13
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及用于诊断复发性流产的血清信使核糖核酸生物标志物、引物组及应用和试剂盒。所述血清信使核糖核酸生物标志物包括:与SEQ ID NO:1所示核苷酸序列具有90%以上同源性的第一mRNA、与SEQ ID NO:2所示核苷酸序列具有90%以上同源性的第二mRNA和与SEQ ID NO:3所示核苷酸序列具有90%以上同源性的第三mRNA中的至少一种。血清mRNA是新颖的生物标志物,不仅稳定、微创、易于检测,而且定量精确,将大大提高复发性流产诊断的敏感性和特异性。
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公开(公告)号:CN111394305B
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN202010269310.9
申请日:2020-04-08
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/073 , A61K35/50 , A61P9/00
Abstract: 本发明涉及一种人羊膜间充质干细胞来源的细胞外囊泡,制备方法为:分离培养获得人羊膜间充质干细胞后,培养并进行传代扩增,培养第3‑5代人羊膜间充质干细胞,密度达到70%‑80%时弃去培养基,用PBS洗涤后换用含5%无细胞外囊泡的胎牛血清的α‑MEM(不含酚红)培养液,继续培养48h后收集细胞培养上清,最后通过梯度及高速离心制备得到细胞外囊泡。该细胞外囊泡可通过携带的miRNAs21‑5p/128‑3p/221‑3p,直接靶向结合肥大的心肌细胞内的PIK3R1 mRNA的3’‑UTR区,抑制PI3K/Akt通路,因此可用于制备防治病理性心肌细胞肥大药物。
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公开(公告)号:CN103773859A
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201410012282.7
申请日:2014-01-10
Applicant: 南京医科大学
CPC classification number: C12Q1/6883 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明属于基因工程及生殖医学领域,公开了一种与临床原因不明的弱精子症相关的线粒体DNA的SNP标志物及其应用。该标志物为C5601T,T12338C,A12361G,G13928C,A15851G,C16179T,G16291A的组合,可用于制备临床原因不明的弱精子症辅助诊断试剂盒,具有较好的特异性和灵敏度。
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公开(公告)号:CN113151357B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202110326877.X
申请日:2021-03-26
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明涉及一种Bmi‑1‑RING1B过表达的血清9型重组腺相关病毒的构建方法,设计合成带有BamH I和EcoR I两个酶切位点的Bmi‑1和RING1B串联的序列,扩增后得目的片段,利用BamH I和EcoR I对穿梭质粒pshuttl‑CMV和目的片段进行双酶切,然后连接,得到重组穿梭质粒,将重组穿梭质粒扩增提纯后,与pAAV‑RC和pHelper质粒一起共转染293T细胞,培养后收获细胞,反复冻融离心,即得。该病毒靶向心脏,在心脏细胞内表达Bmi‑1‑RING1B复合蛋白,直接靶向GATA4,促进GATA4泛素化及选择性自噬降解,可作为防治病理性心肌细胞肥大的药物。
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公开(公告)号:CN103773859B
公开(公告)日:2016-09-14
申请号:CN201410012282.7
申请日:2014-01-10
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明属于基因工程及生殖医学领域,公开了一种与临床原因不明的弱精子症相关的线粒体DNA的SNP标志物及其应用。该标志物为C5601T,T12338C,A12361G,G13928C,A15851G,C16179T,G16291A的组合,可用于制备临床原因不明的弱精子症辅助诊断试剂盒,具有较好的特异性和灵敏度。
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公开(公告)号:CN113355358A
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN202110673143.9
申请日:2021-06-17
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12N15/864 , C12N15/113 , A61K48/00 , A61P9/04
Abstract: 本发明涉及一种血清9型重组腺相关病毒复合剂的制备方法,首先分别设计合成两端带有EcoR I与Hind III两个酶切位点的目的基因片段,构建含有hsa‑mir‑21‑5p的重组穿梭质粒和含有hsa‑miR‑128‑3p及hsa‑miR‑221‑3p串联序列的重组穿梭质粒,然后分别制备过表达hsa‑miR‑21‑5p序列的重组腺相关病毒和过表达hsa‑miR‑128‑3p及hsa‑miR‑221‑3p串联序列的腺相关病毒,等体积混合制成复合剂。经实验证明,该复合剂能靶向PI3KR1,抑制PI3K信号通路,进而减少心肌肥大标志基因ANP和BNP的表达,为防治病理性心肌细胞肥大提供了新的治疗药物。
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