-
公开(公告)号：CN103146845A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310087386.X
申请日：2013-03-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了大豆花叶病毒的一步法环介导逆转录等温扩增检测方法。使用本发明所述的引物组进行RT-LAMP反应，将反应产物于1%TBE琼脂凝胶中电泳或用荧光染料SYBR GreenI对扩增产物的可视化；反应呈阳性，表明存在大豆花叶病毒；反应呈阴性的表示待测样品不含大豆花叶病毒。本发明通过将RNA快速粗提取方法与RT-LAMP检测相结合，以快速粗提取的待测样品总RNA核酸作RT-LAMP的反应模板，节省了一般RT-LAMP采用常规RNA抽提方法所花费的冗余时间，简化了操作过程，加快了检测速度，实现对大豆花叶病毒的一步检测。
-
公开(公告)号：CN114807216A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210469125.3
申请日：2022-04-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/34 , C12N15/66 , C12N1/21 , A01H5/00 , A01H6/54 , A01G7/06 , A01G22/40 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种大豆症青相关病毒侵染性克隆载体和大豆高效接种方法，将不少于1.2个串联重复的大豆症青相关病毒全基因组序列构建到pBINPLUS载体上制备得到大豆症青相关病毒(SoSGV)侵染性克隆载体，并且能够通过发根农杆菌K599诱导的毛状根成功侵染大豆，提供一种解决大豆双生病毒(大豆症青相关病毒)侵染性克隆不易侵染大豆问题的方法。本发明仅用3条引物即可构建2.0个串联重复的侵染性克隆载体；优化大豆中的病毒接种方法：PCR和Western Blot检测结果表明经K599诱导的大豆症青相关病毒能够在多个大豆品种中实现系统侵染，产生症青症状，能作为后续筛选抗性品种体系。
-
公开(公告)号：CN118086374A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410241206.7
申请日：2024-03-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在猪殃殃上快速过量表达基因的方法，该方法为将目的基因插入到烟草花叶病毒载体TMV‑GFP中构建重组病毒载体，将重组病毒载体转化导入农杆菌，利用农杆菌菌液浸润植物幼苗制备重组病毒；在猪殃殃上摩擦接种重组病毒，实现目的基因在猪殃殃上的快速过量表达，成功建立猪殃殃基因表达系统。该方法实验周期短，2‑3月时间即可完成猪殃殃抗药性基因功能解析。实验结论准确性高，该方法可以直接在猪殃殃上研究其基因功能，其它转基因方法是异源表达系统，影响猪殃殃抗药性基因功能的准确解析。
-
公开(公告)号：CN113416736B
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202110544417.4
申请日：2021-05-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 抗病基因Sw‑5b人工改良突变体及其应用，该突变体为33位亮氨酸突变成脯氨酸，319位赖氨酸突变成谷氨酸，927位精氨酸突变成丙氨酸或谷氨酰胺，其余氨基酸位点保持不变，且三个氨基酸位点同时突变。本发明获得的Sw‑5bL33P/K319E/R927A与Sw‑5bL33P/K319E/R927Q两种突变体，该突变体对TSWV野生型及两种病毒田间变异株系TSWVC118Y、TSWVT120N均具有抗病性，为TSWV田间抗性突破变异株系的防控提供了有效的抗病材料。
-
公开(公告)号：CN119082177A
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202411269322.6
申请日：2024-09-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种大豆NLRs抗病基因快速鉴定体系的建立方法及其应用，步骤如下：构建带有病原微生物效应蛋白的表达载体与携带大豆候选NLRs抗病基因的表达载体；将其分别加入农杆菌GV3101菌株中进行电转化，获得两种载体菌液；通过农杆菌介导的瞬时表达体系在二周龄的豇豆对生子叶中同时表达病原效应子与来自大豆的NLRs抗病基因，22℃放置5天后观察叶片上的过敏性坏死表型判断该NLRs是否为识别对应病原微生物效应蛋白的关键抗病基因。本发明利用豇豆兼容更多通过间接调控因子识别病原微生物的大豆NLRs抗病基因，从而更适于大豆NLRs抗病基因高通量筛选等优势，大大缩减了传统大豆NLRs抗病基因克隆时长，为大豆NLRs抗病基因的大规模挖掘和后续的大豆抗病育种提供了重要的技术体系。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117286276A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202310963406.9
申请日：2023-08-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , A01H1/04
Abstract: 番茄Sw‑5b基因特异性分子标记及其应用，该分子标记包含2对特异性引物Sw‑5b‑F1/R1和Sw‑5b‑F2/R1。其中，Sw‑5b‑F1/R1特异性扩增Sw‑5b的抗性等位基因（Sw‑5bR），扩增产物长度为660 bp，Sw‑5b‑F2/R1特异性扩增Sw‑5b的感病等位基因（Sw‑5bS），扩增产物长度为459 bp。本发明开发的番茄Sw‑5b基因特异性分子标记是能够区分Sw‑5b抗、感等位基因的有效分子标记。另外，利用本发明的分子标记还能够正确区分番茄植株中Sw‑5b基因的基因型即抗性纯合子、抗性杂合子或易感纯合子。本发明提高了对携带Sw‑5b基因的番茄种质资源的检测和筛选效率，可为培育抗TSWV番茄品种提供有力的帮助。
-
公开(公告)号：CN113416736A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110544417.4
申请日：2021-05-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 抗病基因Sw‑5b人工改良突变体及其应用，该突变体为33位亮氨酸突变成脯氨酸，319位赖氨酸突变成谷氨酸，927位精氨酸突变成丙氨酸或谷氨酰胺，其余氨基酸位点保持不变，且三个氨基酸位点同时突变。本发明获得的Sw‑5bL33P/K319E/R927A与Sw‑5bL33P/K319E/R927Q两种突变体，该突变体对TSWV野生型及两种病毒田间变异株系TSWVC118Y、TSWVT120N均具有抗病性，为TSWV田间抗性突破变异株系的防控提供了有效的抗病材料。
-
公开(公告)号：CN118910327A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202410753697.3
申请日：2024-06-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了同步检测SoSGV、SMV、BCMV和CpMMV四种大豆重要病毒的引物及方法，所述引物包括用于扩增SoSGV的引物对、用于扩增SMV的引物对、用于扩增BCMV的引物对和用于扩增CpMMV的引物对。本发明回避了4种病毒基因组中核苷酸相似度较高部分，设计的SoSGV、SMV、BCMV和CpMMV的检测引物组具有良好的检测效果和特异性，且4种病毒特异性检测引物具有相近的退火温度，保证能在一个反应体系内工作；节省了检测时间，同时显著减少了检测频次，降低了检测成本，提高了田间大豆病毒病害快速诊断的水平；建立的同步快速检测技术利用提取的样品总核酸为模板，实现了DNA病毒和RNA病毒的同步检测。
-
公开(公告)号：CN103146845B
公开(公告)日：2014-09-24
申请号：CN201310087386.X
申请日：2013-03-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了大豆花叶病毒的一步法环介导逆转录等温扩增检测方法。使用本发明所述的引物组进行RT-LAMP反应，将反应产物于1%TBE琼脂凝胶中电泳或用荧光染料SYBR GreenI对扩增产物的可视化；反应呈阳性，表明存在大豆花叶病毒；反应呈阴性的表示待测样品不含大豆花叶病毒。本发明通过将RNA快速粗提取方法与RT-LAMP检测相结合，以快速粗提取的待测样品总RNA核酸作RT-LAMP的反应模板，节省了一般RT-LAMP采用常规RNA抽提方法所花费的冗余时间，简化了操作过程，加快了检测速度，实现对大豆花叶病毒的一步检测。
-
公开(公告)号：CN103146847B
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201310093869.0
申请日：2013-03-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒及检测方法，其中该方法包括：植物病毒总RNA的提取，RT-LAMP反应和电泳检测或荧光染料检测，确定植物是否带病。本发明根据CGMMV的外壳蛋白基因保守区域设计了RT-LAMP引物，采用RT-LAMP技术建立了一种快速、灵敏、高度特异性的检测黄瓜、西瓜和葫芦等葫芦科植物植株上CGMMV的检测技术及其在病害诊断上的应用方法。本发明可以利用快速抽提RNA和常规RNA抽提作为RNA模板用于RT-LAMP实验。利用这一方法可以快速鉴定出黄瓜绿斑驳花叶病毒植株样本，进而采取针对性的检疫性保护措施，减少病害带来的损失。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
11
records
(took 0.016 seconds)
