公开(公告)号：CN117683944A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202410051689.4

申请日：2024-01-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 徐毅 ,  艾好 ,  胡天宇 ,  程锐祥 ,  乔思静 ,  戴纤一 ,  王婧雯 ,  邓晓林

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明公开了一种大豆症青病毒可视化LAMP检测方法，该检测方法是以大豆症青病毒Rep基因区域序列为靶基因设计特异性引物进行环介导等温扩增，再向所述环介导等温扩增的产物中加入染料进行染色，直接观察检测结果。本发明建立了一种解决田间现场及基层科室大豆症青病毒检测的技术，仅用4条引物即可特异性扩增到植物DNA样本中的大豆症青病毒；无需特殊的仪器设备，仅需一台普通的恒温水浴加热装置即可完成核酸扩增反应过程，检测结果也可通过肉眼观察反应液的颜色；具有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点，可以为大豆症青病毒的田间检测、鉴定、防控以及抗大豆症青病毒育种提供依据。

公开(公告)号：CN114807216A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210469125.3

申请日：2022-04-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陶小荣 ,  徐毅 ,  程锐祥 ,  梅若鑫

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/34 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  A01H6/54 ,  A01G7/06 ,  A01G22/40 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种大豆症青相关病毒侵染性克隆载体和大豆高效接种方法，将不少于1.2个串联重复的大豆症青相关病毒全基因组序列构建到pBINPLUS载体上制备得到大豆症青相关病毒(SoSGV)侵染性克隆载体，并且能够通过发根农杆菌K599诱导的毛状根成功侵染大豆，提供一种解决大豆双生病毒(大豆症青相关病毒)侵染性克隆不易侵染大豆问题的方法。本发明仅用3条引物即可构建2.0个串联重复的侵染性克隆载体；优化大豆中的病毒接种方法：PCR和Western Blot检测结果表明经K599诱导的大豆症青相关病毒能够在多个大豆品种中实现系统侵染，产生症青症状，能作为后续筛选抗性品种体系。

公开(公告)号：CN118910327A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202410753697.3

申请日：2024-06-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陶小荣 ,  柳勤海 ,  徐毅 ,  廖佳琪 ,  程锐祥

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明公开了同步检测SoSGV、SMV、BCMV和CpMMV四种大豆重要病毒的引物及方法，所述引物包括用于扩增SoSGV的引物对、用于扩增SMV的引物对、用于扩增BCMV的引物对和用于扩增CpMMV的引物对。本发明回避了4种病毒基因组中核苷酸相似度较高部分，设计的SoSGV、SMV、BCMV和CpMMV的检测引物组具有良好的检测效果和特异性，且4种病毒特异性检测引物具有相近的退火温度，保证能在一个反应体系内工作；节省了检测时间，同时显著减少了检测频次，降低了检测成本，提高了田间大豆病毒病害快速诊断的水平；建立的同步快速检测技术利用提取的样品总核酸为模板，实现了DNA病毒和RNA病毒的同步检测。