公开(公告)号：CN119391894A

公开(公告)日：2025-02-07

申请号：CN202411637872.9

申请日：2024-11-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 冯致科 ,  班雅欣 ,  张战战 ,  韦建国 ,  董立尧

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR技术快速检测菵草对唑啉草酯靶标抗药性的引物组合及其应用，该引物组合包括如SEQ ID NO.1所示的特异性单链向导RNA、如SEQ ID NO.2所示的特异性菵草DNA目的片段扩增正向引物、如SEQ ID NO.3所示的特异性菵草DNA目的片段扩增反向引物、如SEQ ID NO.4所示的ssDNA荧光报告探针。采用本发明设计的引物组合基于CRISPR技术对菵草的唑啉草酯抗性进行检测，根据荧光强度来判断待测农田菵草样品是否对唑啉草酯产生了抗药性，直接针对特定基因位点进行精确检测，能够在6个小时内得出结果，及时完成除草剂的精准选药，以高效防除抗性菵草。具有快速、准确、高通量、环保可持续和广泛适应性等显著优势。

公开(公告)号：CN119552944A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202510121935.3

申请日：2025-01-26

Applicant: 南京农业大学三亚研究院

Inventor： 冯致科 ,  韦建国 ,  张战战 ,  班雅欣

IPC: C12Q1/48 ,  G01N21/78

Abstract: 本发明公开一种基于GSH‑DTNB显色高通量快速检测谷胱甘肽硫转移酶对除草剂代谢活性的方法，该方法为：取纯化GST蛋白和除草剂溶液，以GSH溶液作为反应起始剂启动反应，孵育后，加入DTNB溶液作为反应终止剂终止反应得到反应体系；以等体积的纯化洗脱液替代所述反应体系中的纯化GST蛋白作为空白对照体系；检测所述反应体系和空白对照体系的A412吸光值，定量反应体系和空白对照体系中的GSH浓度并计算谷胱甘肽硫转移酶对除草剂的代谢率。该方法不仅提高了检测效率和准确性，还降低了检测成本，为后续更多基于GSH‑DTNB的快速检测方法开发提供了重要参考。

公开(公告)号：CN118703673A

公开(公告)日：2024-09-27

申请号：CN202410847908.X

申请日：2024-06-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 冯致科 ,  张战战 ,  韦建国 ,  吴群 ,  班雅欣 ,  董立尧

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于KASP技术检测反枝苋对氟磺胺草醚靶标抗性的引物组合及其应用，该引物组合物包括如SEQ ID NO.1所示的带有HEX荧光接头的特异性正向引物HEX‑F、如SEQ ID NO.2所示的带有FAM荧光接头的特异性正向引物FAM‑F和如SEQ ID NO.3所示的通用反向引物Com‑R。采用本发明设计的引物组合基于KASP技术的对反枝苋的氟磺胺草醚抗性进行检测，具有快速、准确、高通量、环保可持续和广泛适应性等显著优势。这些优势使其在农田杂草防除中具有重要的田间应用价值。

公开(公告)号：CN118086374A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410241206.7

申请日：2024-03-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 冯致科 ,  刘颖 ,  董立尧 ,  陶小荣 ,  任艳蓉 ,  马友梅 ,  冯明峰

IPC: C12N15/83 ,  C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12N15/54 ,  A01H5/12 ,  A01H6/76

Abstract: 本发明公开了一种在猪殃殃上快速过量表达基因的方法，该方法为将目的基因插入到烟草花叶病毒载体TMV‑GFP中构建重组病毒载体，将重组病毒载体转化导入农杆菌，利用农杆菌菌液浸润植物幼苗制备重组病毒；在猪殃殃上摩擦接种重组病毒，实现目的基因在猪殃殃上的快速过量表达，成功建立猪殃殃基因表达系统。该方法实验周期短，2‑3月时间即可完成猪殃殃抗药性基因功能解析。实验结论准确性高，该方法可以直接在猪殃殃上研究其基因功能，其它转基因方法是异源表达系统，影响猪殃殃抗药性基因功能的准确解析。