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公开(公告)号：CN103146845B
公开(公告)日：2014-09-24
申请号：CN201310087386.X
申请日：2013-03-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了大豆花叶病毒的一步法环介导逆转录等温扩增检测方法。使用本发明所述的引物组进行RT-LAMP反应，将反应产物于1%TBE琼脂凝胶中电泳或用荧光染料SYBR GreenI对扩增产物的可视化；反应呈阳性，表明存在大豆花叶病毒；反应呈阴性的表示待测样品不含大豆花叶病毒。本发明通过将RNA快速粗提取方法与RT-LAMP检测相结合，以快速粗提取的待测样品总RNA核酸作RT-LAMP的反应模板，节省了一般RT-LAMP采用常规RNA抽提方法所花费的冗余时间，简化了操作过程，加快了检测速度，实现对大豆花叶病毒的一步检测。
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公开(公告)号：CN103146847B
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201310093869.0
申请日：2013-03-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒及检测方法，其中该方法包括：植物病毒总RNA的提取，RT-LAMP反应和电泳检测或荧光染料检测，确定植物是否带病。本发明根据CGMMV的外壳蛋白基因保守区域设计了RT-LAMP引物，采用RT-LAMP技术建立了一种快速、灵敏、高度特异性的检测黄瓜、西瓜和葫芦等葫芦科植物植株上CGMMV的检测技术及其在病害诊断上的应用方法。本发明可以利用快速抽提RNA和常规RNA抽提作为RNA模板用于RT-LAMP实验。利用这一方法可以快速鉴定出黄瓜绿斑驳花叶病毒植株样本，进而采取针对性的检疫性保护措施，减少病害带来的损失。
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公开(公告)号：CN103146847A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310093869.0
申请日：2013-03-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒及检测方法，其中该方法包括：植物病毒总RNA的提取，RT-LAMP反应和电泳检测或荧光染料检测，确定植物是否带病。本发明根据CGMMV的外壳蛋白基因保守区域设计了RT-LAMP引物，采用RT-LAMP技术建立了一种快速、灵敏、高度特异性的检测黄瓜、西瓜和葫芦等葫芦科植物植株上CGMMV的检测技术及其在病害诊断上的应用方法。本发明可以利用快速抽提RNA和常规RNA抽提作为RNA模板用于RT-LAMP实验。利用这一方法可以快速鉴定出黄瓜绿斑驳花叶病毒植株样本，进而采取针对性的检疫性保护措施，减少病害带来的损失。
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公开(公告)号：CN103146845A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310087386.X
申请日：2013-03-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了大豆花叶病毒的一步法环介导逆转录等温扩增检测方法。使用本发明所述的引物组进行RT-LAMP反应，将反应产物于1%TBE琼脂凝胶中电泳或用荧光染料SYBR GreenI对扩增产物的可视化；反应呈阳性，表明存在大豆花叶病毒；反应呈阴性的表示待测样品不含大豆花叶病毒。本发明通过将RNA快速粗提取方法与RT-LAMP检测相结合，以快速粗提取的待测样品总RNA核酸作RT-LAMP的反应模板，节省了一般RT-LAMP采用常规RNA抽提方法所花费的冗余时间，简化了操作过程，加快了检测速度，实现对大豆花叶病毒的一步检测。
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