公开(公告)号：CN116103333A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202211322387.3

申请日：2022-10-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万建民 ,  李超 ,  张傲 ,  单调风 ,  胡健健 ,  胡智超 ,  刘裕强 ,  江玲 ,  田云录

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/52 ,  C12N15/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明提供一种随机多靶点组装和编辑方法。通过添加Barcode序列，利用同尾酶的策略，可以使不同的靶位点，不同的sgRNA scaffold随机的组合在一起，结合碱基编辑工具MoBE，针对水稻ACC内源基因的第34个外显子定向进化，可以筛选出具有新突变的抗除草剂植株。

公开(公告)号：CN117363613A

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN202310430521.X

申请日：2023-04-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万建民 ,  李超 ,  孙岩 ,  胡健健 ,  明子恒 ,  单调风 ,  刘裕强 ,  何俊 ,  刘喜

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明提供一种紧凑型CRISPR/Cas系统及其应用，包括以下单元：(1)pH‑Cas12j‑U3crRNA：依次设置的水稻OsU3启动子、pre‑crRNA、间隔区Spacer、crRNA、SUP4ter、玉米Ubi1启动子、Cas12j、连接序列、核定位信号、豌豆rbcS‑E9终止子；或(2)pH‑Cas12j‑tRNA：pH‑Cas12j‑tRNA：依次设置的柳枝稷Ubi1启动子、tRNA核酶序列、crRNA、间隔区spacer、tRNA核酶序列、花椰菜花叶病毒CaMV终止子、Ubipro、Cas12j、连接序列、核定位信号、豌豆rbcS‑E9终止子；或(3)pH‑Cas12j‑STU：依次设置的玉米Ubi启动子、Cas12j、连接序列、核定位信号、PolyA、pre‑crRNA、间隔区Spacer、crRNA、豌豆rbcS‑E9终止子；或(4)依次设置的黄叶卷曲病毒强启动子CmYLCVpro、crRNA、间隔区Spacer、花椰菜花叶病毒35S终止子、玉米Ubi1启动子、Csy4、P2A、Cas12j、连接序列、核定位信号、豌豆rbcS‑E9终止子。紧凑型CRISPR/Cas系统应用于基因编辑，能够显著提高编辑效率。

公开(公告)号：CN116063549A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202210859265.1

申请日：2022-07-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万建民 ,  李超 ,  张傲 ,  单调风 ,  孙岩 ,  刘裕强 ,  江玲 ,  刘世家

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/82 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明提供一种碱基编辑系统及其应用。该技术基于筛选出来的高效宽窗口腺嘌呤脱氨酶和胞嘧啶脱氨酶，通过在esgRNA的3′添加RNA配体来招募脱氨酶实现高效的碱基编辑；通过串联多个带有不同配体的sgRNA，可以同时在多个位点实现高效的多重碱基编辑。本发明能够实现效率更高、突变类型更丰富的碱基编辑，是一种用途更广的新型植物碱基编辑技术。