公开(公告)号：CN117683805A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202311681903.6

申请日：2023-12-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万建民 ,  李超 ,  孙岩 ,  胡智超 ,  许根成 ,  纪元 ,  王益华 ,  周时荣 ,  陈亮明

IPC: C12N15/82 ,  C12N9/22 ,  C07K19/00 ,  C12N15/113 ,  A01H6/46 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供一种可以拆分的紧凑型CRISPR/Cas系统。所述系统包括依次连接的以下单元：(a)Cas12j2‑STU.v4‑N：依次设置的玉米Ubi启动子、nCas12j2的N端、内含肽的N端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS)；和(b)Cas12j2‑STU.v4‑C:依次设置的玉米Ubi启动子、内含肽的的C端、nCas12j2的C端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS)、PolyA、Cas12j2的pre‑crRNA变体、间隔区Spacer、Cas12j2的crRNA变体、豌豆rbcS‑E9终止子(E9ter)。Cas12j2系统相比于常见的Cas9和Cas12a，体积小、结构简单且特异性较强，在细胞间递送效率上更有优势，有更广泛的适用场景。本方案在高效Cas12j2系统的基础上，选择Cas12j2蛋白上的关键氨基酸残基对Cas12j2基因编辑工具进行进一步拆分，在尽量不影响其效率的基础上缩小系统的整体体积，拓宽系统的递送方式。

公开(公告)号：CN116103333A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202211322387.3

申请日：2022-10-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 万建民 ,  李超 ,  张傲 ,  单调风 ,  胡健健 ,  胡智超 ,  刘裕强 ,  江玲 ,  田云录

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/52 ,  C12N15/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明提供一种随机多靶点组装和编辑方法。通过添加Barcode序列，利用同尾酶的策略，可以使不同的靶位点，不同的sgRNA scaffold随机的组合在一起，结合碱基编辑工具MoBE，针对水稻ACC内源基因的第34个外显子定向进化，可以筛选出具有新突变的抗除草剂植株。