公开(公告)号：CN105199425A

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201510655494.1

申请日：2015-10-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 杨立飞 ,  朱月林 ,  刘丹丹 ,  应铮峥

IPC: C09B61/00 ,  C07D311/62

Abstract: 本发明属于植物有效成分提取领域，提供一种花青素的提取方法。该方法包括如下步骤：(1)试样准备、(2)叶片研磨、(3)花青素提取；以柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液作为提取溶剂，经过正交试验，发现各因素对紫色生菜花青素提取效果的响应主次顺序为：料液比＞提取温度＞提取时间，因此在花青素提取工艺中，应优先确定料液比。通过控制料液比、提取时间、提取温度和提取液pH值四个条件，证实本发明方法在降低成本，简化工艺的同时，提高了提取速率和花青素的溶出率。由于使用的提取溶剂均为无毒的且广泛用做食品添加剂的试剂，能够满足现代人对安全的要求，因而它在食品、保健、药品等领域有着广泛的应用。

公开(公告)号：CN116606766B

公开(公告)日：2025-02-25

申请号：CN202310463422.1

申请日：2023-04-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘云欢 ,  刘金燕 ,  刘鲜姣 ,  刘建新 ,  刘丹丹 ,  康玮笠 ,  李金燕 ,  史梦蝶 ,  王禹博

IPC: C12N1/20 ,  A61K35/747 ,  A61K47/46 ,  A61P1/16 ,  A61P29/00 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种食淀粉乳杆菌胞外囊泡的制备方法，其包括步骤：接种食淀粉乳杆菌进行培养，将发酵菌液离心，去除菌体沉淀，将上清液过滤，将得到的滤液使用高级离心管离心，将超滤液超速离心，将得到的沉淀重悬、过滤，获得所述食淀粉乳杆菌胞外囊泡。上述制备方法或其制备的食淀粉乳杆菌胞外囊泡可应用于制备预防或治疗胆汁淤积性肝病的制剂、制备胞外囊泡载药系统等。本发明以食淀粉乳杆菌的生长曲线为切入点，以特定培养时间扩大菌体产量，结合超滤法滤过小分子蛋白等杂质，再以超速离心法分离出胞外囊泡，从而获得高浓度的菌源胞外囊泡，提供了一种高效、高纯度、低成本的胞外囊泡制备方法，且不会破坏囊泡结构。

公开(公告)号：CN114015698A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111521651.1

申请日：2021-12-13

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 黄克和 ,  李好磊 ,  岳冬梅 ,  王孟孟 ,  何文淼 ,  刘丹丹 ,  陈兴祥 ,  甘芳 ,  刘云欢

IPC: C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  A61K48/00 ,  A61K38/17 ,  A61P39/02 ,  A61P39/06 ,  C12R1/01 ,  A61K35/744

Abstract: 本发明公开了一种表达热休克蛋白Hsp70的重组乳酸乳球菌及其制备方法和应用，通过PCR扩增Hsp70基因全序列并回收纯化，之后制备pNZ8149线性化载体，将两者进行同源重组连接反应，得到重组表达质粒pNZ8149‑Hsp70；制备感受态细胞，将重组表达质粒pNZ8149‑Hsp70通过电转化转入感受态细胞，制得高效表达Hsp70的重组乳酸乳球菌。本发明利用同源重组技术构建了重组Hsp70蛋白的乳酸菌表达体系，通过快速诱导可大量表达Hsp70，由于乳酸菌本身不含内毒素，因此无需进行蛋白纯化，可将诱导表达的蛋白连同菌液一同饲喂小鼠，然后再攻毒，经检测上述含Hsp70的菌液可减轻霉菌毒素对小鼠的伤害，对攻毒后的小鼠能起到很好的保护作用。

公开(公告)号：CN114015698B

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202111521651.1

申请日：2021-12-13

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 黄克和 ,  李好磊 ,  岳冬梅 ,  王孟孟 ,  何文淼 ,  刘丹丹 ,  陈兴祥 ,  甘芳 ,  刘云欢

IPC: C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  A61K48/00 ,  A61K38/17 ,  A61P39/02 ,  A61P39/06 ,  C12R1/01 ,  A61K35/744

Abstract: 本发明公开了一种表达热休克蛋白Hsp70的重组乳酸乳球菌及其制备方法和应用，通过PCR扩增Hsp70基因全序列并回收纯化，之后制备pNZ8149线性化载体，将两者进行同源重组连接反应，得到重组表达质粒pNZ8149‑Hsp70；制备感受态细胞，将重组表达质粒pNZ8149‑Hsp70通过电转化转入感受态细胞，制得高效表达Hsp70的重组乳酸乳球菌。本发明利用同源重组技术构建了重组Hsp70蛋白的乳酸菌表达体系，通过快速诱导可大量表达Hsp70，由于乳酸菌本身不含内毒素，因此无需进行蛋白纯化，可将诱导表达的蛋白连同菌液一同饲喂小鼠，然后再攻毒，经检测上述含Hsp70的菌液可减轻霉菌毒素对小鼠的伤害，对攻毒后的小鼠能起到很好的保护作用。

公开(公告)号：CN116606766A

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202310463422.1

申请日：2023-04-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘云欢 ,  刘金燕 ,  刘鲜姣 ,  刘建新 ,  刘丹丹 ,  康玮笠 ,  李金燕 ,  史梦蝶 ,  王禹博

IPC: C12N1/20 ,  A61K35/747 ,  A61K47/46 ,  A61P1/16 ,  A61P29/00 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种食淀粉乳杆菌胞外囊泡的制备方法，其包括步骤：接种食淀粉乳杆菌进行培养，将发酵菌液离心，去除菌体沉淀，将上清液过滤，将得到的滤液使用高级离心管离心，将超滤液超速离心，将得到的沉淀重悬、过滤，获得所述食淀粉乳杆菌胞外囊泡。上述制备方法或其制备的食淀粉乳杆菌胞外囊泡可应用于制备预防或治疗胆汁淤积性肝病的制剂、制备胞外囊泡载药系统等。本发明以食淀粉乳杆菌的生长曲线为切入点，以特定培养时间扩大菌体产量，结合超滤法滤过小分子蛋白等杂质，再以超速离心法分离出胞外囊泡，从而获得高浓度的菌源胞外囊泡，提供了一种高效、高纯度、低成本的胞外囊泡制备方法，且不会破坏囊泡结构。