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公开(公告)号:CN109402087B
公开(公告)日:2021-07-13
申请号:CN201811494573.9
申请日:2018-12-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N9/18 , C12N15/55 , C12N15/70 , A62D3/02 , A62D101/28
Abstract: 本发明提供了一种来源于土壤宏基因文库的阿魏酸酯酶基因,其核苷酸序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。将该酯酶基因插入到质粒pET‑28a(+)后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现异源表达。纯化后的重组酶(BDS4)分子量为38.8kDa。此外,本发明首次提出新型阿魏酸酯酶可以水解邻苯二甲酸二甲酯,邻苯二甲酸二乙酯,邻苯二甲酸二丁酯等多种塑化剂。定点诱变实验表明BDS4的催化三联体由丝氨酸(S158),天冬氨酸(D256)和组氨酸(H286)组成,三者中任何氨基酸的突变都会导致BDS4失去催化能力。在木聚糖酶的存在下,BDS4可明显提高从去淀粉麦麸中释放阿魏酸的量。本发明的新型阿魏酸酯酶,由于其特有的活性及酶学特性,使其可应用于饲料、造纸、食品、制药等领域。
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公开(公告)号:CN109402087A
公开(公告)日:2019-03-01
申请号:CN201811494573.9
申请日:2018-12-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N9/18 , C12N15/55 , C12N15/70 , A62D3/02 , A62D101/28
Abstract: 本发明提供了一种来源于土壤宏基因文库的阿魏酸酯酶基因,其核苷酸序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。将该酯酶基因插入到质粒pET-28a(+)后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现异源表达。纯化后的重组酶(BDS4)分子量为38.8kDa。此外,本发明首次提出新型阿魏酸酯酶可以水解邻苯二甲酸二甲酯,邻苯二甲酸二乙酯,邻苯二甲酸二丁酯等多种塑化剂。定点诱变实验表明BDS4的催化三联体由丝氨酸(S158),天冬氨酸(D256)和组氨酸(H286)组成,三者中任何氨基酸的突变都会导致BDS4失去催化能力。在木聚糖酶的存在下,BDS4可明显提高从去淀粉麦麸中释放阿魏酸的量。本发明的新型阿魏酸酯酶,由于其特有的活性及酶学特性,使其可应用于饲料、造纸、食品、制药等领域。
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公开(公告)号:CN114436884A
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202011204342.7
申请日:2020-11-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07C233/18 , C07C231/24 , A61K8/68 , A61Q19/00 , A61K31/164 , A61P17/18 , A61P17/16 , A61P37/08 , A23L33/00
Abstract: 本发明利用现代分离技术和现代波谱学技术对牛蒡根进行化学成分研究,从中得到两个新的神经酰胺类化合物,并通过UPLC‑ESI‑MS和1H‑and13C‑NMR鉴定了两种化合物的结构。本发明的目的在于利用牛蒡根为原料,通过有机溶剂萃取分离、硅胶柱分离、结合硅胶柱与凝胶柱分离等方法,从牛蒡根中分离、纯化出两个神经酰胺类新化合物,在食品、生物制药、化工等领域具有广泛的工业化应用价值。化合物结构式如式Ⅰ或式Ⅱ所示:
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