公开(公告)号：CN116621949B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202310459317.0

申请日：2023-04-25

Applicant: 华南生物医药研究院 ,  南方医科大学

Inventor： 苏海龙 ,  莫海锋 ,  毛莹莹 ,  颜仁和 ,  李红卫 ,  何跃忠 ,  何敏杰 ,  付玉玲 ,  陈学继

IPC: C07K14/145 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/47 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  A61K39/205 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种增加狂犬病毒G蛋白分泌表达的方法及其应用。该方法包括：1)以狂犬病毒的标准毒株的糖蛋白氨基酸序列为模板，在C端加入8个组氨酸序列，将表达糖蛋白全长密码子优化标记为G0蛋白；2)将G0蛋白460‑480跨膜区氨基酸进行突变，突变为柔性肽序列：GSGSGSGSGSGSGSGSGSGS，得到密码优化后的突变体G1蛋白；3)基因序列加入限制性内切酶位点和起始密码子序列后，合成序列；4)构建表达载体，转染宿主细胞后，进行单克隆株的筛选，得到狂犬病毒G蛋白分泌表达增高的单克隆株。本发明在狂犬病毒G蛋白构象的基础上，设计表达一种保留其原有抗原性且具有稳定构象的G蛋白，且

公开(公告)号：CN116621949A

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202310459317.0

申请日：2023-04-25

Applicant: 华南生物医药研究院 ,  南方医科大学

Inventor： 苏海龙 ,  莫海锋 ,  毛莹莹 ,  颜仁和 ,  李红卫 ,  何跃忠 ,  何敏杰 ,  付玉玲 ,  陈学继

IPC: C07K14/145 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/47 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  A61K39/205 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种增加狂犬病毒G蛋白分泌表达的方法及其应用。该方法包括：1)以狂犬病毒的标准毒株的糖蛋白氨基酸序列为模板，在C端加入8个组氨酸序列，将表达糖蛋白全长密码子优化标记为G0蛋白；2)将G0蛋白460‑480跨膜区氨基酸进行突变，突变为柔性肽序列：GSGSGSGSGSGSGSGSGSGS，得到密码优化后的突变体G1蛋白；3)基因序列加入限制性内切酶位点和起始密码子序列后，合成序列；4)构建表达载体，转染宿主细胞后，进行单克隆株的筛选，得到狂犬病毒G蛋白分泌表达增高的单克隆株。本发明在狂犬病毒G蛋白构象的基础上，设计表达一种保留其原有抗原性且具有稳定构象的G蛋白，且在真核表达系统中容易表达；通过小鼠免疫保护实验，验证其具有良好的抗原性。