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公开(公告)号：CN119242630A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411089373.0
申请日：2024-08-09
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/62
Abstract: 本发明提供了一种构建表达moesin‑EGFP的MDA‑MB‑231细胞株的方法。通过设计靶向moesin基因终止子区域的sgRNA，并构建含有LHA、Linker、EGFP和RHA序列的Donor质粒，该质粒在moesin蛋白和EGFP蛋白之间加入连接序列，以避免EGFP影响moesin蛋白功能。利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，将sgRNA、Cas9蛋白和线性化Donor质粒共同转入MDA‑MB‑231细胞。通过流式细胞术分选出表达moesin‑EGFP的纯合子细胞，并通过PCR和Western blot验证基因编辑和蛋白表达情况。该方法实现了moesin‑EGFP融合蛋白的稳定表达，达到实时监测细胞中内源性moesin表达的目的。该细胞株可用于研究moesin在细胞迁移和信号传导中的功能，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN119614511A
公开(公告)日：2025-03-14
申请号：CN202411885785.5
申请日：2024-12-20
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一种改造HL60细胞的构建方法及其应用。本发明通过电转杯和电转针重复利用，并搭配SBB缓冲液，能成功地将外源物质转染到HL60细胞中，并摸索得到最适宜HL60细胞电转染的参数。因此该构建方法不仅解决了HL60难以转染的问题，而且成本低。依据该构建方法，能制备基于研究急性髓性白血病的改造HL60细胞株。本发明成功构建了敲除CD44和/或PSGL‑1的HL60细胞株，能用于研究内皮选择素配体。
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公开(公告)号：CN118240657A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410309346.3
申请日：2024-03-19
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种在流体剪切力和重力下观测细胞解离的可翻转微流控装置及方法，所述装置包括盖板、玻片和底板，所述盖板设有进口和出口，所述盖板与底板厚度相等，所述玻片设置在盖板与底板之间，且所述玻片朝向盖板一侧铺设实验样品，所述玻片与所述盖板之间形成流动腔。本发明的可翻转微流控装置能够模拟人体真实的血流环境，从而研究重力力学条件下细胞的解离过程并计算解离动力学常数，并且该可翻转微流控装置具有易于制作、体积小、精确控制剪切力大小及动态监测等特点，为研究流体剪切力和重力作用下观测细胞的解离的作用提供了可行的工具。
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公开(公告)号：CN110093244B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN201811015649.5
申请日：2018-08-31
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本发明公开一种可产生脉动流的流动腔系统，包括前储液器、前单向阀、脉动流生成装置、后单向阀、流动腔、后储液器和循环泵，所述循环泵与前储液器连接，所述前储液器与前单向阀连接，所述前单向阀与脉动流生成装置连接，所述脉动流生成装置与后单向阀连接，所述后单向阀与流动腔连接，所述流动腔和循环泵与后储液器连接；所述脉动流生成装置用于产生脉动流，所述循环泵用于保持流体的循环，所述前单向阀和后单向阀用于阻止流体回流，所述流动腔用于进行试验观察；本发明的一种可产生脉动流的流动腔系统，可编程控制产生不同幅度和周期的脉动流场，具有防止回流的产生、实现长时间实验观察、成本较低，组装简单的优点。
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公开(公告)号：CN110117524A
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201910307085.0
申请日：2019-04-17
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种流体剪切力诱导肿瘤细胞跨膜迁移的微流控芯片装置。该装置能够模拟人体真实的血流环境，研究力学条件下细胞的跨膜迁移行为。该装置包括注射泵、三通阀、微流控芯片、倒置显微镜、硅胶管及储液器。所述注射泵与三通阀相连，所述三通阀与微流控芯片相连，所述微流控芯片与储液器相连，所述倒置显微镜用于观察微流控芯片通道内细胞的迁移;所述微流控芯片包括上下两层模拟血管的通道和中间的薄膜。本发明还提供了微流控芯片的加工方法。本发明提供的芯片装置具有易于制作、体积小、精确控制剪切力大小及动态监测等特点，这为研究流体剪切力对肿瘤转移的作用提供了可行的工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101818164A
公开(公告)日：2010-09-01
申请号：CN201010019381.X
申请日：2010-01-14
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种无假阳性平末端克隆载体及其制备方法。方法是应用高保真DNA聚合酶通过PCR扩增方法制备的线性化克隆载体。得到的线性化平末端克隆载体的两个5’端不含有磷酸基团。本发明的方法无需进行大量的质粒纯化，通过简单的PCR反应就可以产生大量的载体。使用该载体与含有磷酸基团的平末端PCR片段及其他DNA片段连接，克隆过程中产生的载体自连的概率为零。
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公开(公告)号：CN110093244A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201811015649.5
申请日：2018-08-31
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本发明公开一种可产生脉动流的流动腔系统，包括前储液器、前单向阀、脉动流生成装置、后单向阀、流动腔、后储液器和循环泵，所述循环泵与前储液器连接，所述前储液器与前单向阀连接，所述前单向阀与脉动流生成装置连接，所述脉动流生成装置与后单向阀连接，所述后单向阀与流动腔连接，所述流动腔和循环泵与后储液器连接；所述脉动流生成装置用于产生脉动流，所述循环泵用于保持流体的循环，所述前单向阀和后单向阀用于阻止流体回流，所述流动腔用于进行试验观察；本发明的一种可产生脉动流的流动腔系统，可编程控制产生不同幅度和周期的脉动流场，具有防止回流的产生、实现长时间实验观察、成本较低，组装简单的优点。
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公开(公告)号：CN108795702A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201811015643.8
申请日：2018-08-31
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12M1/00
CPC classification number: C12M29/18
Abstract: 本发明提供了一种流场稳定的循环流动腔系统，包括循环泵、前微型流场稳定器、流动腔、后微型流场稳定器和储液器，所述循环泵与前微型流场稳定器连接，所述前微型流场稳定器与流动腔连接，所述流动腔与后微型流场稳定器连接，所述后微型流场稳定器与储液器连接，所述储液器与循环泵连接；所述循环泵用于保持流体的循环，所述前微型流场稳定器用于储存多余流体，所述后微型流场稳定器用于减少流体回流，所述流动腔用于进行试验观察；本发明的一种流场稳定的循环流动腔系统具有流动腔内流场稳定、提供循环流动，实现长时间观察、微型流场稳定器的容积小，减少实验耗材、成本较低，组装简单的优点。
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公开(公告)号：CN120005727A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510009030.7
申请日：2025-01-03
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及微流控芯片技术领域，具体涉及一种用于研究胶质瘤CAR‑T疗法的动态微流控芯片装置、制备方法及其应用。所述制备方法包括：微流控芯片的制造；神经组织的重建；血脑屏障的重构；脑胶质瘤微环境的模拟。所述动态微流控芯片装置包括微流控芯片；微流控芯片包括从左到右依次设置的血管通道、脑实质通道、肿瘤通道和蛛网膜下腔通道；在血管通道、脑实质通道、肿瘤通道和蛛网膜下腔通道中，均包括一侧设置有进样口的细胞培养室；血管通道和蛛网膜下腔通道的细胞培养室，另一侧分别对应设置流出口。所述应用包括：CAR‑T细胞输注；跨膜迁移观察；生物标志物检测。本发明通过动态微流控芯片装置、制备方法及应用，以实现更准确的CAR‑T细胞疗法体外评估。
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公开(公告)号：CN209759428U
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201821432942.7
申请日：2018-08-31
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本实用新型公开一种可产生脉动流的流动腔系统，包括前储液器、前单向阀、脉动流生成装置、后单向阀、流动腔、后储液器和循环泵，所述循环泵与前储液器连接，所述前储液器与前单向阀连接，所述前单向阀与脉动流生成装置连接，所述脉动流生成装置与后单向阀连接，所述后单向阀与流动腔连接，所述流动腔和循环泵与后储液器连接；所述脉动流生成装置用于产生脉动流，所述循环泵用于保持流体的循环，所述前单向阀和后单向阀用于阻止流体回流，所述流动腔用于进行试验观察；本实用新型的一种可产生脉动流的流动腔系统，可编程控制产生不同幅度和周期的脉动流场，具有防止回流的产生、实现长时间实验观察、成本较低，组装简单的优点。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利
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