用于检测牛流行热和牛流行热病毒的引物和探针及其应用

    公开(公告)号:CN114410841A

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202210044975.9

    申请日:2022-01-14

    Inventor: 李守军 李琪 贾坤

    Abstract: 本发明公开了用于检测牛流行热和牛流行热病毒的引物和探针及其应用,引物核苷酸序列如SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示,所述探针的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。本发明利用ERA技术结合所述引物和探针建立了针对牛流行热病毒进行检测方法和检测试剂盒。扩增阶段搭配使用荧光恒温扩增仪,42℃恒温条件15分钟即可实现对目的片段的有效扩增,具有时间短、灵敏性高、特异性强和重复性好,成本低等优点,最低检测限为1.0×102copies/μL,可应用于基层实验室环境下短时间高精度的BEFV的临床检测,具有很好的应用前景。

    用于检测LSDV的引物和试剂盒

    公开(公告)号:CN113373263A

    公开(公告)日:2021-09-10

    申请号:CN202110583002.8

    申请日:2021-05-27

    Abstract: 本发明属于检测技术领域,公开了用于检测LSDV的引物和试剂盒,本发明通过检测LSDV RPO30基因,借助ERA技术,结合荧光探针的特性,构建出能够检测LSDV的ERA方法,其最低检测限为1×102拷贝/μL。综上所述,本研究建立的LSDV RPO30的检测方法,42℃恒温条件15分钟即可实现对目的片段的有效扩增,具有操作简单、敏感性高、特异性强和快速等优点,适用于现场和基层检测。

    一种可用于犬乳腺肿瘤诊断和预后判断的分子标志物

    公开(公告)号:CN109022575A

    公开(公告)日:2018-12-18

    申请号:CN201810737827.9

    申请日:2018-07-06

    Inventor: 贾坤 芶思

    Abstract: 本发明公开了种可用于犬乳腺肿瘤诊断和预后判断的分子标志物,所述分子标志物为ICAM1基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;以及一对检测ICAM1基因表达的RT‑qPCR检测引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2~3所示。并制备得到了一种犬乳腺肿瘤诊断和预后判断的试剂盒。ICAM1基因仅在恶性肿瘤组中显著低表达;在从转移灶分离出的犬乳腺肿瘤细胞中的ICAM1基因表达量与原发灶细胞相比差异显著,说明其可以鉴别犬乳腺肿瘤的良恶性并参与了犬乳腺肿瘤的浸润、转移过程。因此,ICAM1可以作为犬乳腺肿瘤诊断和预后判断的分子标志物。本发明提供的与犬乳腺肿瘤转移相关的分子标志物,具有较高的敏感性和特异性,对犬乳腺肿瘤的性质鉴别、预后评估、及时确定治疗方案,提高患病犬只的存活率具有重要的意义。

    一株H3N2犬流感病毒株CGD1的应用

    公开(公告)号:CN103223162B

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201310114762.X

    申请日:2013-04-03

    Abstract: 本发明属于病毒疫苗制备技术领域,具体公开了一株H3N2犬流感病毒株CGD1的应用。本发明利用自行分离、鉴定、保存的3株H3N2犬流感病毒株CGD1、CGD2和CGD3接种鸡胚进行传代培养,发现病毒株CGD1的遗传稳定性好,因此选择CGD1株进行噬斑纯化病毒选育出了一株H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1,该疫苗株已于2013年2月1日送交北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏,保藏号为CGMCCNO:7218。利用H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1接种鸡胚进行病毒繁殖,经过收获鸡胚尿囊液、灭活、配苗等步骤可以制备出安全、有效的H3N2犬流感病毒灭活疫苗。

    一种检测牛腹泻相关病毒的多联实时荧光定量试剂盒

    公开(公告)号:CN117721248A

    公开(公告)日:2024-03-19

    申请号:CN202311527703.5

    申请日:2023-11-15

    Abstract: 本发明公开了一种检测牛腹泻相关病毒的多联实时荧光定量试剂盒。本发明提供了一个检测牛腹泻相关病毒的引物组合物和一个检测牛腹泻相关病毒的探针组合物,并进一步利用其开发了能同时检测六种牛腹泻相关病毒的多联实时荧光定量PCR试剂盒。使用本发明提供的试剂盒,可以利用同一反应程序的两个反应体系同时检测BToV、BEV、BNoV、BCoV、BRV和BVDV六种病毒,具有操作简单、用时短、特异性高、灵敏性高和重复性良好等优点,可以快速、准确地实现定量检测。在犊牛腹泻疫病监测中具有重要意义和广泛的应用前景。

    马红球菌致病基因VapA重组蛋白的应用

    公开(公告)号:CN104888208B

    公开(公告)日:2017-12-26

    申请号:CN201510273207.0

    申请日:2015-05-26

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了马红球菌致病基因VapA重组蛋白在制备治疗或检测马红球菌病的制剂中的应用,其特征在于,所述马红球菌致病基因VapA重组蛋白为带MBP标签的MBP‑VapA,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。该重组蛋白具有良好的免疫原性,适于临床治疗用高免血清抗体、疫苗、临床诊断试剂等生物技术产品的开发。

    马红球菌致病基因VapA重组蛋白的应用

    公开(公告)号:CN104888208A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510273207.0

    申请日:2015-05-26

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了马红球菌致病基因VapA重组蛋白在制备治疗或检测马红球菌病的制剂中的应用,其特征在于,所述马红球菌致病基因VapA重组蛋白为带MBP标签的MBP-VapA,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示,获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。该重组蛋白具有良好的免疫原性,适于临床治疗用高免血清抗体、疫苗、临床诊断试剂等生物技术产品的开发。

    一种犬源单链抗体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN104017080A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410263525.4

    申请日:2014-06-13

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种犬源单链抗体及其构建方法和应用。本发明通过设计犬抗体可变区简并引物,成功扩增出犬的重链可变区VH和轻链可变区VL基因。在此基础上利用噬菌体展示技术,成功构建犬源单链抗体scFv文库。所构建的scFv单链抗体库具有多样性和足够大的库容量。本发明通过Dot-ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原从scFv单链抗体库中筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。其中Clone16具有较强的结合特性。根据Clone16基因构建了pET-32a-Clone16重组蛋白进行原核表达,纯化得到的抗体具有结合活性。为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了坚实的基础。

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