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公开(公告)号:CN114592090A
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202210190570.6
申请日:2022-02-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型和Ⅱ型非洲猪瘟病毒的双重荧光定量PCR检测引物和探针及试剂盒,所述双重荧光定量PCR检测引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2和4~5所示。并进一步建立了检测方法和检测试剂盒。该方法特异性强,与其他病毒无交叉反应;灵敏度高,最低检测拷贝数分别为1.07×102copies/μL和3.13×104copies/μL;重复性好,Ct值变异系数均小于2%;应用该方法与OIE推荐的荧光定量PCR方法检测结果一致。本发明建立的双重荧光定量PCR为鉴别基因I型和II型ASFV提供了快速检测方法,有利于完善中国针对ASF制定的高效防控措施。
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公开(公告)号:CN114272365A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202111079587.6
申请日:2021-09-15
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) , 金宇保灵生物药品有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒基因缺失减毒株及由该毒株制备的活疫苗,尤其是公开了一种缺失I73R基因的非洲猪瘟病毒减毒株及其活疫苗,缺失I73R全部基因功能的非洲猪瘟病毒减毒株,本发明还进一步提供了利用该减毒株制备的非洲猪瘟病毒基因缺失活疫苗,可保护易感猪免受ASFV强毒自然感染或人为攻毒,可用于非洲猪瘟的预防。下一步计划在此基础上再联合缺失其他致病基因片段或全基因可进一步提高其使用的安全性。
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公开(公告)号:CN106771178B
公开(公告)日:2018-05-01
申请号:CN201611015332.2
申请日:2016-11-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , C09K11/06
Abstract: 本发明提供了一种猪PRRSV、SIV、HEV抗体的液相芯片多重检测试剂盒;以PRRSV nsp7、SIV HA、HEV ORF2的不同荧光标记微球为载体,在PRRSV、SIV、HEV抗体单一液相芯片检测方法基础上,建立同时检测3种抗体的多重液相芯片检测方法,为HEV、PRRSV、SIV抗体监测提供一种更有效、更快速的检测方法,同时为猪病鉴别诊断及其他动物疫病抗体的血清检测新方法的建立提供新的线索;针对我国养猪业快速发展、猪病情况复杂、混合感染现象严重等养殖现状,进一步加强对猪群疫病情况进行准确、快速、有效的诊断和监测。
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公开(公告)号:CN106632618A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201611015845.3
申请日:2016-11-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/70 , G01N33/533 , G01N33/543 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2770/28131 , C12N2770/28151 , G01N33/533 , G01N33/54313 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明以表达HEV ORF2 C段第337个到第645个氨基酸片段的核苷酸序列为目的片段,利用引物扩增该目的片段;连接pMAL‑c5X载体,获得pMAL‑c5X‑ORF2重组质粒,原核表达获得重组蛋白。该蛋白能与猪戊型肝炎病毒抗体发生反应,利用该蛋白建立液相芯片检测技术,对猪常见的其他疾病阳性血清无交叉反应,其批内、批间变异系数分别为5%、6.6%。对102份临床血清样本检测结果显示,该方法与商品化ELISA试剂盒符合率为93.1%,关联性卡方检验显示两个方法具有一致性(P
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公开(公告)号:CN103837681B
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201310556500.9
申请日:2013-11-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种病毒抗体检验方法,尤其涉及一种人、猪戊型肝炎病毒抗体检验通用ELISA法及其应用。一种戊型肝炎病毒抗体检验通用ELISA法,所述通用ELISA法为单抗阻断ELISA法,使用猪戊型肝炎病毒的ORF3重组蛋白作为包被抗原。应用本发明建立的阻断ELISA方法对从广东省收集的100份猪血清和100份猪场工作人员血清进行HEV阳性血清的检验,得出结果与现有检验试剂盒检验结果的符合率为97%、98%。
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公开(公告)号:CN113876751B
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202111117591.7
申请日:2021-09-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/122 , A61K9/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了竹红菌乙素在制备防治非洲猪瘟的药物中的应用。本发明采用的竹红菌乙素生产工艺成熟可靠,可以为制备抗非洲猪瘟病毒的药物制备提供充足的原料。本发明首次证明公开了竹红菌乙素的抗ASFV病毒的作用。通过多种方法研究证实了竹红菌乙素对ASFV病毒感染的体外细胞具有显著的保护效果。竹红菌乙素抗ASFV病毒的作用机制明确,安全可靠,可用于制备防治非洲猪瘟病毒新药。本发明使用方便,药品为粉末制剂,2~8℃密封保存,易于运输,且即溶即用。
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公开(公告)号:CN112646934B
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN202110084102.6
申请日:2021-01-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的三重荧光定量PCR检测引物及试剂盒。本发明提供了一组检测非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的特异性引物和探针,通过RT‑qPCR方法同时检测非洲猪瘟病毒野毒株B646L基因和缺失株的EGFP、mCherry基因,能够鉴别样本是非洲猪瘟病毒野毒株还是基因缺失株。该检测方法灵敏度高,特异性强,B646L、EGFP和mCherry基因阳性标准质粒最低检测浓度分别为5.94×10‑9ng/μL、9.67×10‑9ng/μL、5.85×10‑9ng/μL。该方法检测范围广泛,能检测出多种非洲猪瘟病毒基因缺失株,且检测过程快速,高效,适合进行大批量检测,为鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失毒株提供了新手段,可用于生产实践中对非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的快速鉴定。
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公开(公告)号:CN113122511A
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN202110394476.8
申请日:2021-04-13
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司 , 华南农业大学 , 中国农业科学院上海兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒毒株及其构建方法和应用,属于生物疫苗制品技术领域。本发明通过同源重组方法构建的基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒毒株是在II型非洲猪瘟病毒基因组的基础上同时缺失了CD2v,MGF(12L,13L,14L)和I177L基因片段的基因缺失毒株,其相对于亲本毒株明显减毒,且不会影响基因缺失病毒株的稳定复制和免疫原性。将其接种实验猪后不会出现实验猪体温明显升高、关节肿胀、发病或死亡现象,也无病毒血症发生,表现出良好的安全性和良好的免疫攻毒保护效果。因此本发明提供的基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒毒株可以作为一种具有良好安全性和免疫保护效果的候选疫苗株。
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公开(公告)号:CN112646934A
公开(公告)日:2021-04-13
申请号:CN202110084102.6
申请日:2021-01-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的三重荧光定量PCR检测引物及试剂盒。本发明提供了一组检测非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的特异性引物和探针,通过RT‑qPCR方法同时检测非洲猪瘟病毒野毒株B646L基因和缺失株的EGFP、mCherry基因,能够鉴别样本是非洲猪瘟病毒野毒株还是基因缺失株。该检测方法灵敏度高,特异性强,B646L、EGFP和mCherry基因阳性标准质粒最低检测浓度分别为5.94×10‑9ng/μL、9.67×10‑9ng/μL、5.85×10‑9ng/μL。该方法检测范围广泛,能检测出多种非洲猪瘟病毒基因缺失株,且检测过程快速,高效,适合进行大批量检测,为鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失毒株提供了新手段,可用于生产实践中对非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的快速鉴定。
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公开(公告)号:CN111534639A
公开(公告)日:2020-08-14
申请号:CN202010373798.X
申请日:2020-05-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6837 , C40B40/06
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒的序列组合,所述序列组合包括DNA探针组,所述DNA探针包括SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.40、SEQ ID NO.73、SEQ ID NO.74、SEQ ID NO.77、SEQ ID NO.78、SEQ ID NO.84、SEQ ID NO.96、SEQ ID NO.130、SEQ ID NO.134、SEQ ID NO.142、SEQ ID NO.153。优选地,所述的DNA探针包括155条DNA探针,所述的DNA探针序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.155所示。利用本发明的优选实施方案,可以实现100%的突变位点的检出率。
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