公开(公告)号：CN114617085A

公开(公告)日：2022-06-14

申请号：CN202210196144.3

申请日：2022-02-28

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室

Inventor： 王庆 ,  秦启伟 ,  杨敏 ,  段旭琢 ,  梁凯珊

IPC: A01K61/10 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种鞍带石斑鱼抗病家系的培育方法，包括如下步骤：(1)亲本的培育；(2)亲鱼配对及家系构建；(3)攻毒；(4)抗病关键SNP标记的筛选；(5)抗病亲本的筛选；(6)抗病家系的培育；该方法通过GWAS技术找到鞍带石斑鱼抗神经坏死病毒的显著关联的分子标记，根据显著相关标记筛选出抗病亲本，再结合家系选育用抗病亲本培育出抗病子代，最终获得鞍带石斑鱼抗神经坏死病毒尤其是抗赤点石斑神经坏死病毒的品系。

公开(公告)号：CN114231664A

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN202111446874.6

申请日：2021-11-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王庆 ,  黄枫淇 ,  秦启伟 ,  杨敏 ,  段旭琢 ,  梁凯珊 ,  贾弦泽

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6818 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及其检测方法，包括RGNNV引物组，所述引物组包括正向引物和反向引物，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；还包括在正向引物前段加上T7启动子序列，所述T7启动子序列如SEQ ID NO.3所示，得到添加了T7启动子序列的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示。本发明检测方法，包括以下步骤：S1.RGNNV病毒RNA的提取、病毒RNA逆转录、核酸扩增、体外转录；S2.CRISPR‑Cas13a检测体系的建立；S3.将待测样品RNA添加到步骤S2得到的混合物中；S4.检测荧光值。本发明检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好,准确度高,可快速地检测RGNNV检测成本低,具有较高的应用价值和推广前景。

公开(公告)号：CN114231664B

公开(公告)日：2023-07-28

申请号：CN202111446874.6

申请日：2021-11-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王庆 ,  黄枫淇 ,  秦启伟 ,  杨敏 ,  段旭琢 ,  梁凯珊 ,  贾弦泽

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6818 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及其检测方法，包括RGNNV引物组，所述引物组包括正向引物和反向引物，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；还包括在正向引物前段加上T7启动子序列，所述T7启动子序列如SEQ ID NO.3所示，得到添加了T7启动子序列的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示。本发明检测方法，包括以下步骤：S1.RGNNV病毒RNA的提取、病毒RNA逆转录、核酸扩增、体外转录；S2.CRISPR‑Cas13a检测体系的建立；S3.将待测样品RNA添加到步骤S2得到的混合物中；S4.检测荧光值。本发明检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好,准确度高,可快速地检测RGNNV检测成本低,具有较高的应用价值和推广前景。

公开(公告)号：CN114736969A

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202210196158.5

申请日：2022-02-28

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室

Inventor： 王庆 ,  秦启伟 ,  杨敏 ,  段旭琢 ,  梁凯珊

IPC: C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种鞍带石斑鱼抗神经坏死病毒个体的选择方法，包括如下步骤：(1)鞍带石斑鱼SNP位点信息的获得；(2)SNP标记抗病权重值的分析和SNP标记的选取；(3)候选鞍带石斑鱼个体SNP位点信息的获取和抗神经坏死病毒能力个体的选择；(4)抗病个体选择准确性检验。该方法从鞍带石斑鱼SNP标记中筛选抗神经坏死病毒权重最大的SNP标记，以此建立一种能够选择抗神经坏死病毒个体的方法。

公开(公告)号：CN117248032A

公开(公告)日：2023-12-19

申请号：CN202311053311.X

申请日：2023-08-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王庆 ,  张敏琳 ,  左小玲 ,  梁建韬 ,  黄枫淇 ,  梁凯珊 ,  韦丽云 ,  卢柯宇 ,  闫旭

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于Crispr/Cas12a系统检测入侵物种的试剂盒，所述试剂盒包括CRISPR‑Cas12a检测体系和含有靶标的目的片段；其中所述CRISPR‑Cas12a检测体系包括Cas12a蛋白、入侵物种的特异性gRNA、淬灭荧光DNA报告探针、检测缓冲液和ddH2O，所述含有靶标的目的片段采用引物扩增获得。还公开了上述利用上述试剂盒检测入侵物种的方法，以及上述试剂盒在制备检测入侵物种产品中的应用。本发明检测试剂盒及方法设计了入侵物种特异性gRNA，可与入侵物种的保守序列特异性形成互补双链，与其他入侵物种不存在交叉反应，提高了入侵物种检测的特异性。

公开(公告)号：CN114617085B

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202210196144.3

申请日：2022-02-28

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室

Inventor： 王庆 ,  秦启伟 ,  杨敏 ,  段旭琢 ,  梁凯珊

IPC: A01K61/10 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种鞍带石斑鱼抗病家系的培育方法，包括如下步骤：(1)亲本的培育；(2)亲鱼配对及家系构建；(3)攻毒；(4)抗病关键SNP标记的筛选；(5)抗病亲本的筛选；(6)抗病家系的培育；该方法通过GWAS技术找到鞍带石斑鱼抗神经坏死病毒的显著关联的分子标记，根据显著相关标记筛选出抗病亲本，再结合家系选育用抗病亲本培育出抗病子代，最终获得鞍带石斑鱼抗神经坏死病毒尤其是抗赤点石斑神经坏死病毒的品系。