一种表达HA基因的重组火鸡疱疹病毒及其应用

    公开(公告)号:CN110205308A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910443329.8

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种表达禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒及其应用,是以病毒载体HVT-BAC为平台,联合使用RED/ET重组技术和ccdB反向筛选技术通过两步重组法制备而来,其中,HA基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。其有益效果在于,本发明所使用的HA基因来自我国近年来广泛流行的H9N2毒株,对禽类具有广泛的免疫原性,本发明的制备方法实现了外源基因的快速、准确重组,所使用的筛选标记有利于减化筛选步骤,得到的重组病毒株能稳定传代,用该重组病毒株制备的疫苗可以刺激鸡体产生潜伏感染,引起终生免疫,为有效防控H9N2禽流感和马立克氏病提供技术支持,具有重要的生产指导意义。

    一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110079541B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN201910373562.3

    申请日:2019-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用,首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段,然后进行分段克隆,再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上,筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于,本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆,为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径,该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题,阳性克隆率高,且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性,拯救效率高,为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。

    一种制备重组病毒的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110184287A

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201910443328.3

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种制备重组病毒的方法,是以病毒载体为基体,先通过Red/ET重组引入双向筛选基因,进一步重组将双向筛选基因用目的基因替换,得到含有目的基因和病毒基因组的重组质粒,进而拯救获得重组病毒的。其有益效果在于,本方法步骤简单,能准确快速的实现重组病毒的构建,且构建成功的重组病毒可容纳外源基因,实现多位点定向插入,无痕迹插入,筛选标记方便的优点,最终形成一个可表达多种抗原基因的重组病毒,应用于载体疫苗,还具有宿主范围广,生产制备方法容易,安全性好,同时诱导多种免疫反应,无需添加佐剂的优点。

    ILTV gD蛋白抗原表位表达盒及重组病毒和应用

    公开(公告)号:CN118726484A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202410923024.8

    申请日:2024-07-10

    Abstract: 本发明公开了一种ILTV gD蛋白抗原表位表达盒及重组病毒和应用,涉及基因和蛋白质工程领域。本发明提供的ILTV gD蛋白抗原表位表达盒包括来源于鸡传染性喉气管炎病毒WG株的gD蛋白的T和B细胞表位。本发明用编码ILTV gD蛋白抗原表位表达盒的基因替换鸡传染性支气管炎病毒H120株的5ab基因,获得的重组病毒rH120‑gD‑T/B。该重组病毒具有良好的遗传稳定性,可用于研制安全有效的IB‑ILT二联活载体疫苗,解决了当前重组IBV稳定性差的问题。

    一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法

    公开(公告)号:CN110713989B

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN201911161596.2

    申请日:2019-11-22

    Abstract: 本发明提供了一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法,所述方法是以传染性支气管炎病毒H120疫苗株的感染性克隆为骨架载体,再将骨架载体中的抗原基因置换为传染性支气管炎流行毒株的目的抗原基因,从而获得重组支气管炎病毒的方法,所述目的抗原基因是不同血清型/基因型的传染性支气管炎流行毒株的S基因片段嵌合而成;所述置换还可以是目的抗原基因与N基因同时置换,置换时均需保留骨架载体中原有的S1基因的信号肽区域。其有益效果在于,本发明所述快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法,操作方法简单易行,重复性高,传代稳定性好,能快速高效的应对频繁变异的IBV流行,并且所述方法为载体疫苗的构建提供新思路。

    一种预防台湾型传染性支气管炎的疫苗株

    公开(公告)号:CN110819599A

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201911161598.1

    申请日:2019-11-22

    Abstract: 本发明提供一种预防台湾型传染性支气管炎的疫苗株,克服了现有疫苗株不能够有效预防TW型鸡传染性支气管炎病毒流行毒株攻击,以及保护效果不佳等缺陷,所述疫苗株是以台湾型传染性支气管炎病毒强致病毒株的抗原基因置换传染性支气管炎病毒H120毒株的抗原基因构建而成的重组病毒。其有益效果在于,本发明中重组疫苗株,可有效保护鸡抵抗TW I型传染性支气管炎病毒强毒的攻击,免疫保护率达到100%,同时,具有良好的安全性,无副反应。

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