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公开(公告)号：CN110819599B
公开(公告)日：2023-05-19
申请号：CN201911161598.1
申请日：2019-11-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种预防台湾型传染性支气管炎的疫苗株，克服了现有疫苗株不能够有效预防TW型鸡传染性支气管炎病毒流行毒株攻击，以及保护效果不佳等缺陷，所述疫苗株是以台湾型传染性支气管炎病毒强致病毒株的抗原基因置换传染性支气管炎病毒H120毒株的抗原基因构建而成的重组病毒。其有益效果在于，本发明中重组疫苗株，可有效保护鸡抵抗TW I型传染性支气管炎病毒强毒的攻击，免疫保护率达到100％，同时，具有良好的安全性，无副反应。
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公开(公告)号：CN111875678A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010647705.8
申请日：2020-07-07
Abstract: 本发明属于基因重组和疫苗技术领域，本发明先用带三种不同启动子HPPRRSV或类NADC30毒株的GP3-GP5-M基因替换TK基因，而后用IL-18-IFN-γ替换gG基因得到，成功构建并拯救了6种以IL-18和IFN-γ作为免疫佐剂，表达PRRSV的GP3-GP5-M基因的重组伪狂犬病毒，该重组伪狂犬病毒能够在PK-15细胞上连续传代至少15代均能出现稳定病变，并稳定表达外源基因，说明6种重组病毒均具有良好的遗传稳定性及体外复制能力，该发明提供了构建对抗PRV和PRRSV共感染的二价候选疫苗的方法，为治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪伪狂犬病毒疾病感染提供候选疫苗株。
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公开(公告)号：CN114657213B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210559369.0
申请日：2022-05-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/64 , C12N1/21 , C12N7/01 , C12Q1/02 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种猪急性腹泻综合征冠状病毒人工染色体重组载体及其构建方法和应用。本发明利用Gibson组装将猪急性腹泻综合征冠状病毒基因组分段克隆到大肠杆菌的细菌人工染色体中，并将全长感染性克隆和辅助质粒共转染哺乳动物细胞快速拯救得到与野生型亲本基因相同的病毒。本发明绕过了传统方法繁琐的酶切位点设计和酶切连接操作，且病毒BAC在大肠杆菌中是稳定的，可以通过DNA同源重组工程和反向筛选系统进行进一步的基因操作。同时，本发明成功构建了毒株SADS‑CoV‑WT的感染性克隆并建立了基于DNA同源重组工程和ccdB反向筛选系统于辅助蛋白基因ORF3a和ORF7a/b位置进行敲除或插入外源基因的方法。
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公开(公告)号：CN110713989B
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN201911161596.2
申请日：2019-11-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法，所述方法是以传染性支气管炎病毒H120疫苗株的感染性克隆为骨架载体，再将骨架载体中的抗原基因置换为传染性支气管炎流行毒株的目的抗原基因，从而获得重组支气管炎病毒的方法，所述目的抗原基因是不同血清型/基因型的传染性支气管炎流行毒株的S基因片段嵌合而成；所述置换还可以是目的抗原基因与N基因同时置换，置换时均需保留骨架载体中原有的S1基因的信号肽区域。其有益效果在于，本发明所述快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法，操作方法简单易行，重复性高，传代稳定性好，能快速高效的应对频繁变异的IBV流行，并且所述方法为载体疫苗的构建提供新思路。
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公开(公告)号：CN114657213A
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202210559369.0
申请日：2022-05-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/64 , C12N1/21 , C12N7/01 , C12Q1/02 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种猪急性腹泻综合征冠状病毒人工染色体重组载体及其构建方法和应用。本发明利用Gibson组装将猪急性腹泻综合征冠状病毒基因组分段克隆到大肠杆菌的细菌人工染色体中，并将全长感染性克隆和辅助质粒共转染哺乳动物细胞快速拯救得到与野生型亲本基因相同的病毒。本发明绕过了传统方法繁琐的酶切位点设计和酶切连接操作，且病毒BAC在大肠杆菌中是稳定的，可以通过DNA同源重组工程和反向筛选系统进行进一步的基因操作。同时，本发明成功构建了毒株SADS‑CoV‑WT的感染性克隆并建立了基于DNA同源重组工程和ccdB反向筛选系统于辅助蛋白基因ORF3a和ORF7a/b位置进行敲除或插入外源基因的方法。
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公开(公告)号：CN110819599A
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201911161598.1
申请日：2019-11-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种预防台湾型传染性支气管炎的疫苗株，克服了现有疫苗株不能够有效预防TW型鸡传染性支气管炎病毒流行毒株攻击，以及保护效果不佳等缺陷，所述疫苗株是以台湾型传染性支气管炎病毒强致病毒株的抗原基因置换传染性支气管炎病毒H120毒株的抗原基因构建而成的重组病毒。其有益效果在于，本发明中重组疫苗株，可有效保护鸡抵抗TW I型传染性支气管炎病毒强毒的攻击，免疫保护率达到100％，同时，具有良好的安全性，无副反应。
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公开(公告)号：CN111875678B
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202010647705.8
申请日：2020-07-07
Abstract: 本发明属于基因重组和疫苗技术领域，本发明先用带三种不同启动子HPPRRSV或类NADC30毒株的GP3‑GP5‑M基因替换TK基因，而后用IL‑18‑IFN‑γ替换gG基因得到，成功构建并拯救了6种以IL‑18和IFN‑γ作为免疫佐剂，表达PRRSV的GP3‑GP5‑M基因的重组伪狂犬病毒，该重组伪狂犬病毒能够在PK‑15细胞上连续传代至少15代均能出现稳定病变，并稳定表达外源基因，说明6种重组病毒均具有良好的遗传稳定性及体外复制能力，该发明提供了构建对抗PRV和PRRSV共感染的二价候选疫苗的方法，为治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪伪狂犬病毒疾病感染提供候选疫苗株。
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公开(公告)号：CN116731982B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202310990050.8
申请日：2023-08-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸭瘟疱疹病毒基因缺失减毒疫苗株及其构建方法和应用，涉及基因工程技术领域，该疫苗株是以鸭瘟疱疹病毒VAC疫苗株的感染性克隆为骨架载体，然后将骨架载体中的毒力基因敲除，得到两种减毒疫苗株，均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学，保藏时间为2023年07月05日，保藏编号为CCTCC NO：V202340和CCTCC NO:V202339。本发明的疫苗株免疫保护率达到100%，本发明解决了现有疫苗株对非靶动物具有致病性、无法有效预防鸭瘟疱疹病毒强毒株的攻击，以及保护效果不佳的问题。
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公开(公告)号：CN116731982A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310990050.8
申请日：2023-08-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸭瘟疱疹病毒基因缺失减毒疫苗株及其构建方法和应用，涉及基因工程技术领域，该疫苗株是以鸭瘟疱疹病毒VAC疫苗株的感染性克隆为骨架载体，然后将骨架载体中的毒力基因敲除，得到两种减毒疫苗株，均保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学，保藏时间为2023年07月05日，保藏编号为CCTCC NO：V202340和CCTCC NO:V202339。本发明的疫苗株免疫保护率达到100%，本发明解决了现有疫苗株对非靶动物具有致病性、无法有效预防鸭瘟疱疹病毒强毒株的攻击，以及保护效果不佳的问题。
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公开(公告)号：CN114561367A
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN202210179819.3
申请日：2022-02-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/41 , C12N15/35 , C12N15/85 , A61K39/235 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提出了一种重组3型鸭腺病毒、制备方法及其应用，涉及分子生物学技术领域。该重组3型鸭腺病毒分别能表达鸭病毒性肝炎病毒VP1基因和番鸭细小病毒VP3基因，VP1基因的序列如SEQ ID NO.1所示，VP3基因的序列如SEQ ID NO.2所示，其能够主要解决现目前3型鸭腺病毒疫苗的应用范围较窄的技术问题，另外，本发明还提供了一种重组3型鸭腺病毒的制备方法，该方法不仅操作简单，且耗时短、精确性高。
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