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公开(公告)号：CN109300376A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811269476.X
申请日：2018-10-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种骨骼标本去肉的方法。该方法包括以下步骤：剔除动物尸体85%～90%的软组织，保留骨骼部分，然后将骨骼分为四肢、头骨、胸廓、腰椎及髋骨部分，分别封装；将蛋白酶、脱脂剂和水按20～50：1～2：2000～2100的质量比配混合溶液后，进行恒温水浴；将封装好的骨骼分别放入混合溶液中，使得混合溶液刚好淹没骨骼，浸泡4～5 h，用高压水冲去软组织，剔除骨骼上的杂质；再次将骨骼放入混合溶液中，浸泡至骨骼表面无杂质，取出骨骼，用高压水冲去软组织，将骨骼用洗涤剂洗干净，即可。本发明处理后的骨骼干净且完整，避免了骨骼的损坏，去肉方法简单，在保持骨骼完整的情况下缩短去肉时间，有巨大的应用潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110079541B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN201910373562.3
申请日：2019-05-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/86 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用，首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段，然后进行分段克隆，再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上，筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于，本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆，为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径，该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题，阳性克隆率高，且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性，拯救效率高，为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。
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公开(公告)号：CN110184287A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910443328.3
申请日：2019-05-24
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种制备重组病毒的方法，是以病毒载体为基体，先通过Red/ET重组引入双向筛选基因，进一步重组将双向筛选基因用目的基因替换，得到含有目的基因和病毒基因组的重组质粒，进而拯救获得重组病毒的。其有益效果在于，本方法步骤简单，能准确快速的实现重组病毒的构建，且构建成功的重组病毒可容纳外源基因，实现多位点定向插入，无痕迹插入，筛选标记方便的优点，最终形成一个可表达多种抗原基因的重组病毒，应用于载体疫苗，还具有宿主范围广，生产制备方法容易，安全性好，同时诱导多种免疫反应，无需添加佐剂的优点。
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公开(公告)号：CN110184287B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN201910443328.3
申请日：2019-05-24
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种制备重组病毒的方法，是以病毒载体为基体，先通过Red/ET重组引入双向筛选基因，进一步重组将双向筛选基因用目的基因替换，得到含有目的基因和病毒基因组的重组质粒，进而拯救获得重组病毒的。其有益效果在于，本方法步骤简单，能准确快速的实现重组病毒的构建，且构建成功的重组病毒可容纳外源基因，实现多位点定向插入，无痕迹插入，筛选标记方便的优点，最终形成一个可表达多种抗原基因的重组病毒，应用于载体疫苗，还具有宿主范围(56)对比文件李奇蒙.表达IBDVvp2蛋白的rHVT的构建及其免疫保护评价《.中国优秀硕士学位论文全文数据库（农业科技辑）》.2015,(第05期),兰德松等.利用Rde/ET技术构建表达H5亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒《.微生物学报》.2009,第49卷(第01期),Erica Bickerton等.Recombinantinfectious bronchitis viruses expressingheterologous S1 subunits: potential for anew generation of vaccines that replicatein Vero cells《.Journal of GeneralVirology》.2018,第99卷(第12期),DörteLüschow等.Protection of chickensfrom lethal avian influenza A virusinfection by live-virus vaccination withinfectious laryngotracheitis virusrecombinants expressing the hemagglutinin(H5) gene《.Vaccine》.2001,第19卷(第30期),
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公开(公告)号：CN110079541A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910373562.3
申请日：2019-05-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/86 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用，首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段，然后进行分段克隆，再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上，筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于，本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆，为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径，该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题，阳性克隆率高，且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性，拯救效率高，为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。
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公开(公告)号：CN109300376B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201811269476.X
申请日：2018-10-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种骨骼标本去肉的方法。该方法包括以下步骤：剔除动物尸体85%～90%的软组织，保留骨骼部分，然后将骨骼分为四肢、头骨、胸廓、腰椎及髋骨部分，分别封装；将蛋白酶、脱脂剂和水按20～50：1～2：2000～2100的质量比配混合溶液后，进行恒温水浴；将封装好的骨骼分别放入混合溶液中，使得混合溶液刚好淹没骨骼，浸泡4～5 h，用高压水冲去软组织，剔除骨骼上的杂质；再次将骨骼放入混合溶液中，浸泡至骨骼表面无杂质，取出骨骼，用高压水冲去软组织，将骨骼用洗涤剂洗干净，即可。本发明处理后的骨骼干净且完整，避免了骨骼的损坏，去肉方法简单，在保持骨骼完整的情况下缩短去肉时间，有巨大的应用潜力。
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