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公开(公告)号：CN102559531A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201010596059.3
申请日：2010-12-15
Applicant: 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，具体涉及一种适用于副猪嗜血杆菌5型的高密度发酵培养基，其包括下列组分：按照重量/体积计，谷氨酸钠1～10g/L，酵母粉5～50g/L，氯化钠1～10g/L，无水磷酸二氢钾0.063～2.502g/L，三水磷酸氢二钾0.351～14.044g/L；按体积比计牛血清5～40％，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)1～10‰，余量是水。本发明有利于副猪嗜血杆菌5型的高密度发酵，菌体生长速度快，能获得较高菌量，培养后的副猪嗜血杆菌5型活菌数可达到50亿。本发明的培养基材料来源广泛，成本低廉，可有效扩增副猪嗜血杆菌5型，能满足大规模疫苗生产的需要。
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公开(公告)号：CN109030830B
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201810730559.8
申请日：2018-07-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/285 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种黏附素蛋白Apd及其在制备副猪嗜血杆菌间接ELISA抗体检测试剂盒中的应用。本发明证实黏附素蛋白Apd位于副猪嗜血杆菌的外膜，在已知的15个血清型中都有表达，但在猪的其他细菌性病原没有该蛋白，用其作为诊断抗原具有高的敏感性和特异性。优化重组黏附素蛋白的表达和纯化的方法，获得了免疫原性和反应原性良好的重组蛋白。优化以重组黏附素蛋白作为包被抗原的间接ELISA方法的组份与用量、反应条件、结果判定标准，制备了副猪嗜血杆菌的间接ELISA抗体检测试剂盒。动物试验证实了该试剂盒可用于副猪嗜血杆菌疫苗免疫和细菌感染后的抗体检测。在副猪嗜血杆菌病的综合防控和血清流行病学调查中，该试剂盒将具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109030830A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810730559.8
申请日：2018-07-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种黏附素蛋白Apd及其在制备副猪嗜血杆菌间接ELISA抗体检测试剂盒中的应用。本发明证实黏附素蛋白Apd位于副猪嗜血杆菌的外膜，在已知的15个血清型中都有表达，但在猪的其他细菌性病原没有该蛋白，用其作为诊断抗原具有高的敏感性和特异性。优化重组黏附素蛋白的表达和纯化的方法，获得了免疫原性和反应原性良好的重组蛋白。优化以重组黏附素蛋白作为包被抗原的间接ELISA方法的组份与用量、反应条件、结果判定标准，制备了副猪嗜血杆菌的间接ELISA抗体检测试剂盒。动物试验证实了该试剂盒可用于副猪嗜血杆菌疫苗免疫和细菌感染后的抗体检测。在副猪嗜血杆菌病的综合防控和血清流行病学调查中，该试剂盒将具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN103421904B
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201310353402.5
申请日：2013-08-14
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 发明名称：一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法本发明属于食源性病原菌分子检测技术领域，具体涉及一种基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因的LAMP可视化检测方法。反应体系包括针对靶基因prfA的4条特异性引物、LAMP检测的反应体系、显色溶剂和反应覆盖液。60℃温育50min，80℃5min后终止反应，电泳后阳性扩增产物为不同大小区带组成的阶梯式图谱。扩增产物中加入显色溶剂，肉眼观察结果，天蓝色为阳性，紫罗兰色为阴性。本发明特异性强，操作简单，结果易于观察，可用于基层单位对于临床样品中单核细胞增生李斯特菌的初步筛选和快速检测。
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公开(公告)号：CN102465145B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201010535055.4
申请日：2010-11-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，目的在于构建一种大肠杆菌与副猪嗜血杆菌之间的穿梭载体，该载体被命名为pSHK4，其包含有如序列表SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，它的编码区位于该序列的927-1742位序列对应的序列，编码271个氨基酸。本发明的载体的突出优点在于：首次利用副猪嗜血杆菌杆菌分离株中天然质粒的复制起始位点构建适用于该菌的穿梭载体，这种载体在该病原菌中具有稳定遗传的特点，可用于对副猪嗜血杆菌进行遗传操作，是研究副猪嗜血杆菌毒力因子的基本工具，对揭示该病原分子致病机理有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114381374B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202111573438.5
申请日：2021-12-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/04 , C12N1/20 , A61K9/19 , A61K47/32 , A61K47/26 , A61K47/10 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/21
Abstract: 本发明公开了一种副猪嗜血杆菌无动物源冻干保护剂及其制备方法和应用，它的各组分重量百分比为：蔗糖：2％～8％，甘露醇：0.5％～4％，聚乙烯吡咯烷酮：0.25％～3％，右旋糖酐：2％～6％，余量为超纯水。该方法将聚乙烯吡咯烷酮和右旋糖酐溶于一部分的水中，高温灭菌得到溶液A；然后将蔗糖和甘露醇溶于剩余的水中，过滤除菌得到溶液B；最后将溶液A和溶液B混合均匀得到冻干保护剂。本发明的冻干保护剂生产成本较低，且不含动物源成分，降低了不良反应的发生。另外，该保护剂冻干的副猪嗜血杆菌活疫苗，具有良好的耐热能力和储存稳定性。
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公开(公告)号：CN117305341A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311289749.8
申请日：2023-10-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种副猪格拉瑟菌基因表达盒及预防格拉瑟病的弱毒疫苗株，所述表达盒由启动子PygiW和apd基因拼接而成，所述预防格拉瑟病的副猪格拉瑟菌弱毒疫苗株CF7066ΔnanH::PygiW‑apd以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株；在缺失唾液酸酶基因nanH的同时，并在其基因座插入副猪格拉瑟菌基因表达盒PygiW‑apd；本发明的疫苗株缺失了唾液酸酶基因，又过表达了免疫原性基因，实现了亲本株CF7066毒力的致弱和保护性增强，获得了安全有效的格拉瑟病弱毒疫苗株。
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公开(公告)号：CN102559531B
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201010596059.3
申请日：2010-12-15
Applicant: 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，具体涉及一种适用于副猪嗜血杆菌5型的高密度发酵培养基，其包括下列组分：按照重量/体积计，谷氨酸钠1～10g/L，酵母粉5～50g/L，氯化钠1～10g/L，无水磷酸二氢钾0.063～2.502g/L，三水磷酸氢二钾0.351～14.044g/L；按体积比计牛血清5～40％，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)1～10‰，余量是水。本发明有利于副猪嗜血杆菌5型的高密度发酵，菌体生长速度快，能获得较高菌量，培养后的副猪嗜血杆菌5型活菌数可达到50亿。本发明的培养基材料来源广泛，成本低廉，可有效扩增副猪嗜血杆菌5型，能满足大规模疫苗生产的需要。
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公开(公告)号：CN108018230B
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN201711237247.5
申请日：2017-11-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/20 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/21
Abstract: 本发明公开了一种血清7型副猪嗜血杆菌天然弱毒菌株及其应用，所述血清7型副猪嗜血杆菌天然弱毒菌株于2017年11月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2017706；本发明的血清7型副猪嗜血杆菌天然弱毒菌株致病力极低，适合用于制备治疗副猪嗜血杆菌病的药物；所述药物为疫苗；所述疫苗的制备方法包括如下步骤：S1.菌体培养；S2.菌体收集；S3.冻干。制备药物时无需灭活及灭活检验，制备方法简单，药物生产效率更高；所述疫苗对28‑35日龄仔猪，免疫剂量为2.0×108CFU/mL时，免疫保护率即可达到100％。
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公开(公告)号：CN108018230A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711237247.5
申请日：2017-11-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/20 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/21
CPC classification number: C12R1/21 , A61K39/102
Abstract: 本发明公开了一种血清7型副猪嗜血杆菌天然弱毒菌株及其应用，所述血清7型副猪嗜血杆菌天然弱毒菌株于2017年11月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2017706；本发明的血清7型副猪嗜血杆菌天然弱毒菌株致病力极低，适合用于制备治疗副猪嗜血杆菌病的药物；所述药物为疫苗；所述疫苗的制备方法包括如下步骤：S1.菌体培养；S2.菌体收集；S3.冻干。制备药物时无需灭活及灭活检验，制备方法简单，药物生产效率更高；所述疫苗对28‑35日龄仔猪，免疫剂量为2.0×108CFU/mL时，免疫保护率即可达到100％。
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