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公开(公告)号：CN105532642B
公开(公告)日：2018-04-10
申请号：CN201511003963.8
申请日：2015-12-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法，其步骤：1、用无水乙醇固定团头鲂成鱼样本；2、用无水乙醇、蒸馏水对团头鲂成鱼标本复水；3、用TBST溶液浸泡团头鲂成鱼标本过夜处理；4、用蒸馏水浸泡团头鲂成鱼标本，洗去残余的TBST溶液；5、用新配的KOH溶液透明团头鲂成鱼标本；6、将标本转移至新的KOH溶液中，然后滴加茜素红染液染色，直至溶液变为深紫色；7、将标本转移至新的KOH溶液中，洗去团头鲂成鱼标本的染色液；8、将团头鲂成鱼标本转移至甘油中脱水保存。此方法易行，操作过程简单，无需复杂的仪器，获得身体透明、肌间骨染色为深紫色的团头鲂成鱼标本，标本可清楚观察团头鲂成鱼肌间骨的附着位置及形态。
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公开(公告)号：CN105532642A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201511003963.8
申请日：2015-12-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01N1/02
CPC classification number: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法，其步骤：1、用无水乙醇固定团头鲂成鱼样本；2、用无水乙醇、蒸馏水对团头鲂成鱼标本复水；3、用TBST溶液浸泡团头鲂成鱼标本过夜处理；4、用蒸馏水浸泡团头鲂成鱼标本，洗去残余的TBST溶液；5、用新配的KOH溶液透明团头鲂成鱼标本；6、将标本转移至新的KOH溶液中，然后滴加茜素红染液染色，直至溶液变为深紫色；7、将标本转移至新的KOH溶液中，洗去团头鲂成鱼标本的染色液；8、将团头鲂成鱼标本转移至甘油中脱水保存。此方法易行，操作过程简单，无需复杂的仪器，获得身体透明、肌间骨染色为深紫色的团头鲂成鱼标本，标本可清楚观察团头鲂成鱼肌间骨的附着位置及形态。
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公开(公告)号：CN119570862A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411755446.5
申请日：2024-12-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/0276 , C12N15/113 , C12N15/55
Abstract: 本发明公开了一种快速获得基因型纯合的无肌间刺草鱼方法，该方法以runx2b基因为靶基因对野生型草鱼进行基因编辑，筛选突变成功的F0代个体培育至性成熟后，随后筛选发生突变且突变类型相同的F0代雌雄个体进行交配获得F1代，基因型检测出F1代中runx2b等位基因均纯合的个体，即为F1代无肌间刺草鱼新种质。由于草鱼性成熟需要4‑5年，选育一代的周期较长，本发明旨在利用基因编技术建立一种快速获得无肌间刺草鱼的方法，缩短获得纯合子的周期，为草鱼等经济鱼类的经济性状的遗传改良提供了方法，为鱼类肌间刺发生的分子机制研究提供支持，具有重要的科学研究和产业应用价值。
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公开(公告)号：CN116515907A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202211436647.X
申请日：2022-11-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/87 , C12N15/12 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种在草鱼中双gRNA位点敲除runx2b基因的方法及应用，该方法设计靶位点gRNA‑1序列和靶位点gRNA‑2序列；体外转录并纯化分别获得gRNA‑1和gRNA‑2；再以pT3TS‑nCas9n线性化质粒为模板，体外转录合成Cas9mRNA；将gRNA‑1、gRNA‑2和Cas9mRNA混合显微注射到草鱼1细胞期的受精卵中；培育草鱼至三个月时，筛选出有突变的草鱼培育成亲本F0代；继续繁殖培育得到突变品系。该方法简单易行，操作简单，获得草鱼基因突变品系，具有开展水产生物基因功能研究，揭示其遗传发育规律，发掘和利用遗传资源培育高产、抗病抗逆品种等重要的科学意义。
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公开(公告)号：CN115720874A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211292370.8
申请日：2022-10-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/85 , C12N15/12
Abstract: 本发明属于水产生物育种领域，具体涉及养殖经济鱼类无肌间刺种质创制方法及应用，以runx2b基因为靶基因对经济鱼类团头鲂进行基因编辑，挑选有突变的F0代小鱼培养成亲本鱼，通过F0代突变体雌雄性亲本交配繁育产生F1代，筛选出无肌间刺的团头鲂F1培养至成鱼，用于培育无肌间刺团头鲂新种质。本发明利用基因突变方法获得无肌间刺养殖经济鱼类团头鲂新种质，为解决我国青草鲢鳙鲤鲫鲂等重要养殖经济鱼类因肌肉中肌间刺存在而显著影响食用和加工提供了改良方法，也为后续研究肌间刺的分子形成机制提供基础，具有重要的科学研究价值和产业应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110684777A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201911104496.6
申请日：2019-11-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , A01K67/027
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一段分离的核苷酸序列在肌间刺减少的斑马鱼构建中的应用，所述的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，利用本领域的常规方法，以SEQ ID NO.1为靶基因进行基因突变操作，筛选出发生突变的F0，对F0与野生型杂交产生的F1进行基因分型，筛选出突变体F1并自交，即可获得肌间刺数目显著减少70%以上且稳定遗传的斑马鱼少肌间刺品系。本发明利用一段分离的核苷酸序列首次获得了肌间刺减少的鱼类品系，且具有性状改良效果显著、育种时间短、遗传稳定、成本低等优点，具有科学研究的基础价值和应用价值，不仅能用于鱼类肌间刺发育机制研究，而且为获得多种鱼类少肌间刺的稳定遗传品系提供了方法。
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公开(公告)号：CN118460623A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410599529.3
申请日：2024-05-15
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/0276 , C12N15/12
Abstract: 本发明公开了一种单碱基编辑系统在无肌间刺鱼类品系构建中的应用，所述的应用是利用单碱基编辑系统对有肌间刺鱼类的runx2b基因进行编辑，进而使所述鱼类的runx2b基因突变，达到敲除的目的，最终得到无肌间刺的鱼类品系。本发明利用单碱基编辑系统的方法更快速地获得纯合的无肌间刺斑马鱼品系，为后续研究鱼类肌间刺的分子形成机制和培育无肌间刺经济鱼类提供基础，具有科学研究的基础价值和应用价值。
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公开(公告)号：CN110684777B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201911104496.6
申请日：2019-11-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , A01K67/027
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一段分离的核苷酸序列在肌间刺减少的斑马鱼构建中的应用，所述的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，利用本领域的常规方法，以SEQ ID NO.1为靶基因进行基因突变操作，筛选出发生突变的F0，对F0与野生型杂交产生的F1进行基因分型，筛选出突变体F1并自交，即可获得肌间刺数目显著减少70%以上且稳定遗传的斑马鱼少肌间刺品系。本发明利用一段分离的核苷酸序列首次获得了肌间刺减少的鱼类品系，且具有性状改良效果显著、育种时间短、遗传稳定、成本低等优点，具有科学研究的基础价值和应用价值，不仅能用于鱼类肌间刺发育机制研究，而且为获得多种鱼类少肌间刺的稳定遗传品系提供了方法。
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公开(公告)号：CN117265017A
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202311195016.8
申请日：2023-09-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/89 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/12 , C07K14/46 , A01K67/027
Abstract: 本发明属于水产生物育种技术领域，公开了一种基于基因编辑技术创制无肌间刺草鱼新种质的方法及应用。申请人以runx2b基因为靶基因对野生型草鱼进行基因编辑，挑选有突变的F0代个体培育至性成熟后，筛选发生突变的F0代雌雄个体进行交配获得F1代，筛选出F1代中runx2b等位基因均发生突变的个体，即为F1代无肌间刺草鱼新种质。本发明利用runx2b基因突变方法获得无肌间刺草鱼，为草鱼等经济鱼类肌间刺性状的遗传改良提供了方法，为鱼类肌间刺发生的分子机制研究提供支持，具有重要的科学研究价值和产业应用价值。
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公开(公告)号：CN112226465B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202011115842.3
申请日：2020-10-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/89 , C12N15/55 , C12N15/12 , C12N15/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及了一段分离的核苷酸序列在无肌间骨斑马鱼构建中的应用，所述的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。以SEQ ID NO.1为靶基因进行基因突变，挑选有突变的F0的胚胎培养成亲本鱼，通过F0突变体亲本与野生鱼杂交产生F1胚胎，筛选出有义的突变杂合子F1培养至成鱼，然后F1杂合子自交能产生纯合子，杂合子，野生型的三种基因类型的F2后代。利用基因突变的方法获得无矿化肌间骨斑马鱼品系，为后续研究鱼类肌间骨的分子形成机制和培育无肌间骨经济鱼类提供基础，具有科学研究的基础价值和应用价值。
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