公开(公告)号：CN105532642A

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201511003963.8

申请日：2015-12-25

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 高泽霞 ,  聂春红 ,  万世明 ,  张伟卓 ,  关柠楠 ,  王卫民

IPC: A01N1/02

CPC classification number: A01N1/02

Abstract: 本发明公开了一种团头鲂成鱼肌间骨染色的方法，其步骤：1、用无水乙醇固定团头鲂成鱼样本；2、用无水乙醇、蒸馏水对团头鲂成鱼标本复水；3、用TBST溶液浸泡团头鲂成鱼标本过夜处理；4、用蒸馏水浸泡团头鲂成鱼标本，洗去残余的TBST溶液；5、用新配的KOH溶液透明团头鲂成鱼标本；6、将标本转移至新的KOH溶液中，然后滴加茜素红染液染色，直至溶液变为深紫色；7、将标本转移至新的KOH溶液中，洗去团头鲂成鱼标本的染色液；8、将团头鲂成鱼标本转移至甘油中脱水保存。此方法易行，操作过程简单，无需复杂的仪器，获得身体透明、肌间骨染色为深紫色的团头鲂成鱼标本，标本可清楚观察团头鲂成鱼肌间骨的附着位置及形态。

公开(公告)号：CN106978392A

公开(公告)日：2017-07-25

申请号：CN201710358473.2

申请日：2017-05-19

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 高泽霞 ,  关柠楠 ,  兰天 ,  陈宇龙

IPC: C12N5/077

CPC classification number: C12N5/0654 ,  C12N2501/11 ,  C12N2501/115

Abstract: 本发明公开了一种团头鲂骨组织细胞培养的方法，其步骤是：1）选取3月龄团头鲂为实验材料；2）取团头鲂尾椎和肋骨及其周围结缔组织；3）PBS冲洗，将组织块在胎牛血清中润湿后，用镊子将其放入培养瓶底部；4）将培养瓶放入培养箱倒置培养；5）每日观察细胞生长情况，更换培养基；6）待细胞汇合度达到80%后进行胰蛋白酶消化传代，获得团头鲂原代骨组织细胞；7）待团头鲂原代骨组织细胞的汇合度达到70~80%时使用胰蛋白酶进行细胞的消化传代，细胞离心后重悬，接种于两个新的培养瓶中继续培养，获得传代细胞。方法易行，操作简便，解决了由于样品个体大小限制及胰蛋白酶消化法使用受限等问题，为日后鱼类骨骼生长发育等相关研究提供基础材料。