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公开(公告)号：CN103421812A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310160491.1
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种从花花柴(Karelinia caspia)植物中鉴定的基因KcNHX1的分离克隆、功能验证和应用。本发明获得的编码基因的cDNA序列如SEQ ID NO：1所示；其编码基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了基因KcNHX1在拟南芥转基因中的应用，本发明克隆的基因可提高拟南芥对高温的耐受性及在高温条件下的产量，验证其具有提高拟南芥花器官中生长素含量的功能。
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公开(公告)号：CN101117634A
公开(公告)日：2008-02-06
申请号：CN200710052665.7
申请日：2007-07-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于棉花基因工程技术领域，具体涉及一种分离棉花叶绿体DNA的新方法。包括：以幼嫩的叶片为材料，用普通家用榨汁机将叶片充分匀浆，利用A、B、C、D四种缓冲溶液，常规速度离心，依次通过完整叶绿体的分离，裂解及叶绿体DNA(cpDNA)分离纯化三个连续步骤，最终获得棉花叶绿体DNA纯品。本发明制备分离的叶绿体DNA质量较高，紫外分光光度计检测表明，本发明制备的DNA样品的D260nm/D280nm在1.6－1.8之间；产率高达1－10μg cpDNA/g叶片样品。经过验证，以分离的cpDNA为模板完全能够满足特异性酶切、RAPD、PCR和目标基因序列的克隆等常规分子生物学操作的需要。与现有技术相比，本发明不需要超高速离心机，也不需要通过蔗糖密度梯度离心分离等设备和步骤。
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公开(公告)号：CN103421812B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201310160491.1
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种从花花柴(Karelinia caspia)植物中鉴定的基因KcNHX1的分离克隆、功能验证和应用。本发明获得的编码基因的cDNA序列如SEQ ID NO：1所示；其编码基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了基因KcNHX1在拟南芥转基因中的应用，本发明克隆的基因可提高拟南芥对高温的耐受性及在高温条件下的产量，验证其具有提高拟南芥花器官中生长素含量的功能。
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公开(公告)号：CN1727357A
公开(公告)日：2006-02-01
申请号：CN200410060637.6
申请日：2004-07-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于棉花分子生物学中RNA抽提技术领域。公开了一种新的利用硫氰酸胍－氯仿抽提，酚纯化棉花RNA的抽提方法。针对棉花的酚类、多糖类等和次生代谢物质对抽提纯化高质量RNA样品的影响，制备了新的裂解液和抽提工艺。利用高浓度的硫氰酸胍裂解细胞同时抑制细胞内源核酸酶的活性.该裂解液中含有聚乙烯吡咯烷酮4000和β－巯基乙醇，用于抑制棉花中多酚类物质的氧化。利用氯仿抽提以除去部分多糖，多酚和蛋白质。将粗提物用裂解液溶解后利用水饱和酚以更有效地去除多糖和蛋白质。本发明具有经济、快速、稳定的特点，抽提的RNA样品质量较高。
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公开(公告)号：CN103421826B
公开(公告)日：2015-04-15
申请号：CN201310006089.8
申请日：2013-01-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及从苦豆子中分离克隆一个SaVP1基因，该基因的cDNA序列如序列表SEQ ID NO：1所示，其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。功能验证表明，该基因能提高拟南芥对高温的耐受性和在高温条件下的产量，同时具有提高拟南芥花器官中生长素的含量，进而提高高温下拟南芥的结实能力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103421821B
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201310019959.5
申请日：2013-01-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及棉花硬脂酰去饱和化酶GbSSI2基因及应用，本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种从海岛棉中鉴定的基因GbSSI2的分离克隆、功能验证和应用。GbSSI2基因的cDNA序列如SEQ ID NO：1所示；其编码基因的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。功能验证表明，GbSSI2基因具有调控棉花内源抗病相关激素水杨酸和茉莉酸的合成的功能，通过遗传转化可应用于棉花抗黄萎病品系的培育。
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公开(公告)号：CN101011027A
公开(公告)日：2007-08-08
申请号：CN200710063650.0
申请日：2007-02-07
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A40/162
Abstract: 本发明属于棉花转基因技术领域，公开了超声波辅助农杆菌转化棉花胚芽的培育转基因棉花的新方法。包括：将剥掉种皮消毒后棉种接种到无菌苗萌发培养基上，将刚萌发两片子叶剥离，置润湿的无菌滤纸上，将10ml 0.5 OD600nm的农杆菌菌液加入到塑料离心管或玻璃小三角瓶中并将剥好的胚芽加到农杆菌液中，将离心管或者小三角瓶放在超声波清洗器中的中央，用100－150W的超声波处理1－5min，将处理过的胚芽转移至共培养培养基培养，再用含头孢霉素的无菌水冲洗，吸干胚芽表面水分，转移至恢复培养基上，在光照下恢复培养得到幼芽，将其转到选择培养基继代，得到抗性芽，将其切下转移至生根培养基上诱导生根或嫁接在棉花砧木上，得到再生转基因植株。本发明将GFP(绿色荧光蛋白)基因在胚芽的瞬时表达率提高100多倍；首次实现了海岛棉(长绒棉)的转基因植株；获得了一批转抗虫基因的棉花植株。分子及田间实验检测表明，外源基因已经稳定转入到受体棉花基因组中并能稳定表达和遗传。
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公开(公告)号：CN103421826A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310006089.8
申请日：2013-01-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及从苦豆子中分离克隆一个SaVP1基因，该基因的cDNA序列如序列表SEQ ID NO：1所示，其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。功能验证表明，该基因能提高拟南芥对高温的耐受性和在高温条件下的产量，同时具有提高拟南芥花器官中生长素的含量，进而提高高温下拟南芥的结实能力。
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公开(公告)号：CN101011027B
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN200710063650.0
申请日：2007-02-07
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A40/162
Abstract: 本发明属于棉花转基因技术领域，公开了超声波辅助农杆菌转化棉花胚芽的培育转基因棉花的新方法。包括：将剥掉种皮消毒后棉种接种到无菌苗萌发培养基上，将刚萌发两片子叶剥离，置润湿的无菌滤纸上，将10ml 0.5 OD600nm的农杆菌菌液加入到塑料离心管或玻璃小三角瓶中并将剥好的胚芽加到农杆菌液中，将离心管或者小三角瓶放在超声波清洗器中的中央，用100-150W的超声波处理1-5min，将处理过的胚芽转移至共培养培养基培养，再用含头孢霉素的无菌水冲洗，吸干胚芽表面水分，转移至恢复培养基上，在光照下恢复培养得到幼芽，将其转到选择培养基继代，得到抗性芽，将其切下转移至生根培养基上诱导生根或嫁接在棉花砧木上，得到再生转基因植株。本发明将GFP(绿色荧光蛋白)基因在胚芽的瞬时表达率提高100多倍；首次实现了海岛棉(长绒棉)的转基因植株；获得了一批转抗虫基因的棉花植株。分子及田间实验检测表明，外源基因已经稳定转入到受体棉花基因组中并能稳定表达和遗传。
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公开(公告)号：CN101020924A
公开(公告)日：2007-08-22
申请号：CN200610166552.5
申请日：2006-12-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于棉花育种领域，涉及一种海岛棉EST－SSR引物序列的制备技术及应用，利用这些引物进行棉花遗传多样性的评价、分子遗传连锁构建和棉花重要性状的QTL定位。步骤包括：1)建立海岛棉品系Pima3－79纤维发育的cDNA文库，从单一序列中挑出占其中富含二、三、四、五或六核苷酸重复且长度≥10碱基的EST；2)设计SSR侧翼引物；3)从田间取基因型为AA、DD和AADD的棉种材料和亲本鄂棉22、Pima3－79以及BC1群体植株的嫩绿叶片提取其总DNA；4)用设计的SSR引物扩增步骤3)所示的材料和群体；5)计算每对引物的多态性信息含量，并对步骤3)所示的基因型棉种材料作聚类和主坐标分析；6)将BC1作图群体扩增的EST－SSR整合到种间遗传连锁图谱相应的连锁群上，并作棉花重要性状的QTL定位。结果显示，位于连锁群15的引物HAU033与籽指性状连锁，位于连锁群29的引物HAU100与单株铃数性状连锁；分别贡献了表型变异的7.41％和5.95％。
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