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公开(公告)号：CN112813076B
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202110283859.8
申请日：2021-03-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/10 , A01H6/60
Abstract: 本发明提供了一种敲除棉花GhTSTs基因的sgRNA组合物及其在创制棉花无短绒突变体中的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明针对8个GhTSTs基因的保守区段设计的3条基因编辑用sgRNA，构建二套CRISPR‑Cas9载体，进行农杆菌介导的遗传转化，获得棉花无短绒突变体。因此，本发明提供了GhTSTs基因在创制棉无短绒突变体中的应用。同时本发明还提供了敲除GhTSTs基因的载体在创制棉花无短绒突变体中的应用。本发明确定了GhTSTs基因为创制棉花无短绒性状的靶点基因，并成功创建棉花无短绒突变体，为后续研究短绒发生和无短绒相关育种及筛选提供材料基础。
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公开(公告)号：CN106801065A
公开(公告)日：2017-06-06
申请号：CN201510833618.0
申请日：2015-11-25
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种提高棉花再生及转化效率的方法及应用。通过再生能力比较筛选获得农艺性状优良的棉花转基因受体材料Y668，以Y668为受体转GFP基因获得的分离群体T1代中的阴性单株Null为组织培养受体材料，经过连续两次的体细胞再生获得R2群体，最后经过典型单株选择、自交获得再生能力比亲本提高3倍的转化受体材料Jin 668。本发明还公开了Jin 668在棉花转基因中的应用。以本发明培育的Jin668作为转基因受体材料,将多个抗虫、提高油份的基因导入棉花宿主细胞，得到表达外源基因的转基因棉花植株。
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公开(公告)号：CN103789325A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201410073300.2
申请日：2014-02-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一个分离克隆自棉花的细胞壁伸展蛋白基因GbEXPATR及应用。本发明从海岛棉纤维不同发育时期的cDNA文库中获得海岛棉纤维特异表达的缺少第二个结构域的细胞壁伸展蛋白基因GbEXPATR，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1所示，其中52-306为碱基所示的区域是编码区，它特异地在海岛棉纤维伸长期、转换期及次生壁合成初期高效表达。将获得的全长ORF构建到植物超量表达载体pCAMBIA2301m上，用农杆菌介导的遗传转化方法转化陆地棉，对转基因后代的纤维品质进行分析，发现它能够有效促进纤维的伸长；马克隆值降低；使纤维从C2级上升到B2级；断裂比强度的升高。利用本发明可以有效改良棉花纤维品质。
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公开(公告)号：CN116217683B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202211093025.1
申请日：2022-09-08
Applicant: 深圳全棉时代科技有限公司 , 华中农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/60 , C12N15/82
Abstract: 本发明提供了一种与棉花纤维品质相关的基因、超表达载体和敲除载体及应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明提供了与棉花纤维品质相关的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。超表达GhMYB4基因能促进棉花纤维次生壁的积累，棉纤维变短；敲除GhMYB4基因能使细胞壁变薄，促进纤维伸长，可以为培育“又长又细”的棉花新品种提供理想的途径。
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公开(公告)号：CN103571850A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201210260715.1
申请日：2012-07-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种棉花Phytosulfokine前体基因GhPSKP及制备方法和应用，从棉花纤维发育不同时期表达谱中分离出一条与其它植物PSKP基因高度同源的EST，生物信息学分析表明，该EST包含一个完整的ORF，将其命名为GhPSKP。该基因在纤维伸长各个时期高效表达，从陆地棉品种YZ1中提取10DPA纤维总RNA，利用反转录酶SuperscriptⅢ将其反转录合成cDNA，用引物GhPSKPF和GhPSKPR扩增出GhPSKP基因的全长cDNA。将扩增获得的PCR产物连入pGEM-T载体，筛选阳性克隆并测序，获得所需的基因全长cDNA。进一步证实该基因在棉花纤维快速伸长阶段优势表达。运用转基因手段在棉花体内超量表达该基因能够有效促进纤维的伸长。利用本发明可以有效促进棉花纤维的伸长，改良棉花纤维品质。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102485894A
公开(公告)日：2012-06-06
申请号：CN201010582387.8
申请日：2010-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82
Abstract: 本发明涉及植物基因工程领域。特征是：克隆鉴定了海岛棉GbEXPA1和GbEXPATR基因的启动子。其启动子的核苷酸序列如序列表1和序列表2所示。这两个启动子在棉花中是纤维特异/优势表达启动子。将启动子PGbEXPA1和PGbEXPATR DNA序列分别与GUS基因融合构建的植物表达载体经农杆菌介导的遗传转化方法转化棉花，获得转基因植株经染色鉴定，GUS基因在棉花纤维中优势表达。这两个启动子表达模式基本一致，但有微弱差异。通过一系列截短启动子序列与GUS融合，转基因棉花验证结果表明-461bp～-1bp的序列是该启动子PGbEXPA1的核心序列。本发明还公开了含有启动子PGbEXPA1的重组表达载体，该重组表达载体可应用于培育在植物根中特异表达目的基因的转基因植株。
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公开(公告)号：CN1727357A
公开(公告)日：2006-02-01
申请号：CN200410060637.6
申请日：2004-07-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于棉花分子生物学中RNA抽提技术领域。公开了一种新的利用硫氰酸胍－氯仿抽提，酚纯化棉花RNA的抽提方法。针对棉花的酚类、多糖类等和次生代谢物质对抽提纯化高质量RNA样品的影响，制备了新的裂解液和抽提工艺。利用高浓度的硫氰酸胍裂解细胞同时抑制细胞内源核酸酶的活性.该裂解液中含有聚乙烯吡咯烷酮4000和β－巯基乙醇，用于抑制棉花中多酚类物质的氧化。利用氯仿抽提以除去部分多糖，多酚和蛋白质。将粗提物用裂解液溶解后利用水饱和酚以更有效地去除多糖和蛋白质。本发明具有经济、快速、稳定的特点，抽提的RNA样品质量较高。
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公开(公告)号：CN116926069A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202310773087.5
申请日：2023-06-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种用于检测棉花OE‑3的核酸序列及其检测方法，所述棉花OE‑3的核酸序列包括SEQ ID NO:1所示序列或其反向互补序列、或者SEQ ID NO:2所示序列或其反向互补序列。本发明棉花OE‑3具有品质性状改良的特性，且检测方法可以准确快速地鉴定生物样品中是否包含转基因棉花事件OE‑3的DNA分子。
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公开(公告)号：CN116217683A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211093025.1
申请日：2022-09-08
Applicant: 深圳全棉时代科技有限公司 , 华中农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/60 , C12N15/82
Abstract: 本发明提供了一种与棉花纤维品质相关的基因、超表达载体和敲除载体及应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明提供了与棉花纤维品质相关的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。超表达GhMYB4基因能促进棉花纤维次生壁的积累，棉纤维变短；敲除GhMYB4基因能使细胞壁变薄，促进纤维伸长，可以为培育“又长又细”的棉花新品种提供理想的途径。
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公开(公告)号：CN112813076A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110283859.8
申请日：2021-03-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/10 , A01H6/60
Abstract: 本发明提供了一种敲除棉花GhTSTs基因的sgRNA组合物及其在创制棉花无短绒突变体中的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明针对8个GhTSTs基因的保守区段设计的3条基因编辑用sgRNA，构建二套CRISPR‑Cas9载体，进行农杆菌介导的遗传转化，获得棉花无短绒突变体。因此，本发明提供了GhTSTs基因在创制棉无短绒突变体中的应用。同时本发明还提供了敲除GhTSTs基因的载体在创制棉花无短绒突变体中的应用。本发明确定了GhTSTs基因为创制棉花无短绒性状的靶点基因，并成功创建棉花无短绒突变体，为后续研究短绒发生和无短绒相关育种及筛选提供材料基础。
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